醛酮还原酶AKR1C系列酶在癌细胞中的活性研究
发布时间：2021-09-28 14:29
醛酮还原酶（AKR）超家族是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）依赖的氧化还原酶,研究发现,其中AKR1C的四种亚型在人体大多数器官中均有表达,并且与癌症的发生、转移以及耐药息息相关,目前关于AKR1C在同一组织癌细胞、不同组织癌细胞差异性表达与肿瘤发生及肿瘤耐药关系研究,尤其是否可以通过抑制AKR1C的表达量来逆转耐药性研究成为了近些年的研究热点。本研究选取了肝细胞HL-7702、肝癌细胞HepG2、耐顺铂的肝癌细胞HepG2/DDP、肺细胞MRC-5、肺癌细胞A549、耐顺铂的肺癌细胞A549/DDP、乳腺细胞MCF-10A、乳腺癌细胞MCF-7以及耐顺铂的乳腺癌细胞MCF-7/DDP这九种细胞系进行试验,通过实时荧光定量PCR技术在mRNA水平研究AKR1C四种酶在这三类九种不同细胞系中的表达情况;运用Western Blot技术在蛋白水平研究AKR1C这四种酶在蛋白水平上的表达情况;对肝、肺、乳腺癌细胞以及对应的耐药癌细胞进行转录组分析,进而研究耐药癌细胞的耐药性机制与途径;利用脂质体转染对耐药肝癌细胞、耐药肺癌细胞、耐药乳腺癌细胞中的AKR1C四种酶进行敲低,并对敲低细胞进...
【文章来源】：长春理工大学吉林省
【文章页数】：101 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
人源AKR
第一章绪论2KDa左右，这些酶具有84%-98%的同源性，特别是AKR1C1和AKR1C2，仅有7个氨基酸的差异。醛酮还原酶AKR1C1-AKR1C4是在甾体激素的活性与非活性形式之间相互转化的酶，通过这种方式，他们可以调节各种激素的生产、失活以及异生物素的代谢，因此他们代表了重要的新兴药物的标靶，可以用于开发治疗激素依赖性癌症的药物，如乳腺癌、前列腺癌、子宫内膜癌等等[5-8]。1.2.1AKR1C的结构AKR1C酶具有相似的结构，包括（α/β）8的8桶结构和三个相关的大环[9]。“桶”由核心区域的β链（β1-β8）和外围的α螺旋（α1-α8）组成，伴随的三个环（A，B，C）部分覆盖C环，在N端的部分有两个附加的螺旋（B1，B2）用来封闭枪管，在C端的部分有两个附加的螺旋（H1，H2）用来包装枪管的侧面[5,9]，如图1.2所示。图1.2AKR1C酶的空间结构图AKR1C酶具有高度的相似性，同源性达到80%以上，如表1.1所示。他们的晶体结构即PDB经叠加显示出了高度的结构相似性，碳骨架的方根偏差（RMSD）低于1.29，如表1.2所示[10-12]。表1.1AKR1C酶的成对序列同一性（%）PdbcodeAKR1C1AKR1C2AKR1C3AKR1C4AKR1C11MRQ10097.888.382.7AKR1C21IHI97.810087.381.6AKR1C31XF088.387.310083.9AKR1C42FVL82.781.683.9100
第一章绪论3表1.2AKR1C酶的成对碳骨架均方根偏差PdbcodeAKR1C1AKR1C2AKR1C3AKR1C4AKR1C11MRQ00.8231.2830.980AKR1C21IHI0.82301.2391.004AKR1C31XF01.2831.23901.156AKR1C42FVL0.9801.0041.1560所有的AKR1C酶都保留了关键的催化位点的氨基酸残基，并且都使用烟酰胺作为辅因子[9]，如图1.3所示，氨基酸形成了参与质子传递的所谓的催化四联体：Tyr充当一般的酸碱催化剂，His和Lys影响pKa，Asp和Lys与2-羟基相互作用于烟酰胺核糖[13]。因此，底物与其各自催化的四联体之间的正确的相互作用，对AKR1C酶的催化作用至关重要。图1.3AKR1C酶的催化位点1.2.2AKR1C的功能1）催化性人源的AKR1C酶参与性激素的合成与失活，他们具有羟基类固醇脱氢酶（HSD）的活性，可以催化甾体底物的3-，17-，20-位的羰基的还原，形成各自的3-，17-，20-羟基[14]。由于NADPH可以有效抑制NAD＋的依赖性氧化，因此AKR1C酶在细胞中起到还原性的作用[15,16]。AKR1C酶催化性激素、雌激素和孕激素的合成，他们就像
【参考文献】：
期刊论文
[1]醛酮还原酶超家族与肺癌[J]. 张丽娜,岳文涛. 国际肿瘤学杂志. 2013 (01)
本文编号：3412080
【文章来源】：长春理工大学吉林省
【文章页数】：101 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
人源AKR
第一章绪论2KDa左右，这些酶具有84%-98%的同源性，特别是AKR1C1和AKR1C2，仅有7个氨基酸的差异。醛酮还原酶AKR1C1-AKR1C4是在甾体激素的活性与非活性形式之间相互转化的酶，通过这种方式，他们可以调节各种激素的生产、失活以及异生物素的代谢，因此他们代表了重要的新兴药物的标靶，可以用于开发治疗激素依赖性癌症的药物，如乳腺癌、前列腺癌、子宫内膜癌等等[5-8]。1.2.1AKR1C的结构AKR1C酶具有相似的结构，包括（α/β）8的8桶结构和三个相关的大环[9]。“桶”由核心区域的β链（β1-β8）和外围的α螺旋（α1-α8）组成，伴随的三个环（A，B，C）部分覆盖C环，在N端的部分有两个附加的螺旋（B1，B2）用来封闭枪管，在C端的部分有两个附加的螺旋（H1，H2）用来包装枪管的侧面[5,9]，如图1.2所示。图1.2AKR1C酶的空间结构图AKR1C酶具有高度的相似性，同源性达到80%以上，如表1.1所示。他们的晶体结构即PDB经叠加显示出了高度的结构相似性，碳骨架的方根偏差（RMSD）低于1.29，如表1.2所示[10-12]。表1.1AKR1C酶的成对序列同一性（%）PdbcodeAKR1C1AKR1C2AKR1C3AKR1C4AKR1C11MRQ10097.888.382.7AKR1C21IHI97.810087.381.6AKR1C31XF088.387.310083.9AKR1C42FVL82.781.683.9100
第一章绪论3表1.2AKR1C酶的成对碳骨架均方根偏差PdbcodeAKR1C1AKR1C2AKR1C3AKR1C4AKR1C11MRQ00.8231.2830.980AKR1C21IHI0.82301.2391.004AKR1C31XF01.2831.23901.156AKR1C42FVL0.9801.0041.1560所有的AKR1C酶都保留了关键的催化位点的氨基酸残基，并且都使用烟酰胺作为辅因子[9]，如图1.3所示，氨基酸形成了参与质子传递的所谓的催化四联体：Tyr充当一般的酸碱催化剂，His和Lys影响pKa，Asp和Lys与2-羟基相互作用于烟酰胺核糖[13]。因此，底物与其各自催化的四联体之间的正确的相互作用，对AKR1C酶的催化作用至关重要。图1.3AKR1C酶的催化位点1.2.2AKR1C的功能1）催化性人源的AKR1C酶参与性激素的合成与失活，他们具有羟基类固醇脱氢酶（HSD）的活性，可以催化甾体底物的3-，17-，20-位的羰基的还原，形成各自的3-，17-，20-羟基[14]。由于NADPH可以有效抑制NAD＋的依赖性氧化，因此AKR1C酶在细胞中起到还原性的作用[15,16]。AKR1C酶催化性激素、雌激素和孕激素的合成，他们就像
【参考文献】：
期刊论文
[1]醛酮还原酶超家族与肺癌[J]. 张丽娜,岳文涛. 国际肿瘤学杂志. 2013 (01)
本文编号：3412080
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/swxlw/3412080.html
