脂肪源性干细胞向成纤维细胞的分化

发布时间：2021-10-05 12:03

　　目的探讨脂肪源性干细胞（ADSCs）向成纤维细胞分化的可能,为解决皮肤组织工程种子细胞提供有效途径。方法取健康成年SD大鼠10只,体重280～320 g,雌雄不限,麻醉、脱毛、消毒,于腹股沟处获取脂肪后进行ADSCs的体外分离、培养和传代,观察原代细胞的生长特点;取第3代细胞,成骨诱导后第16天行碱性磷酸酶（ALP）检测,成骨诱导后第23天行茜素红染色,成脂诱导后第12天行油红O染色;流式细胞术检测细胞表面标志;加入条件培养基向成纤维细胞诱导分化,于诱导后第2天、第4天、第6天、第8天摄片记录细胞形态变化过程,MTT检测各时相点的细胞活性;诱导后第6天和第8天行扫描电子显微镜检测;诱导后第8天行免疫细胞化学染色,检测成纤维细胞主要标志物波形蛋白（vimentin）的表达。结果原代ADSCs呈长梭形贴壁生长,成骨诱导后可见ALP强阳性表达,茜素红染色可见红色矿化结节;成脂诱导后可见胞内红染脂滴聚集;流式细胞术检测显示,间充质干细胞相关标志物CD90阳性表达,造血干细胞标记物CD45呈阴性表达; ADSCs向成纤维细胞诱导后第2天可见形态开始改变,部分细胞漂浮;诱导后第4天细胞呈水滴形或短... 

【文章来源】：解剖学报. 2020,51(04)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

原代脂肪源性干细胞标尺示25μm

纵向比较显示，诱导组和对照组吸光度均随时间的延长而逐渐增大(P<0.05);横向比较显示，第2天诱导组吸光度明显低于对照组(P<0.05);第4天、第6天、第8天诱导组与对照组吸光度差异均无显著性(P>0.05，图4)。5．扫描电子显微镜观察诱导细胞形态

免疫细胞化学染色可见诱导分化8 d后绝大多数细胞vimentin呈阳性表达，胞质内可见棕黄色颗粒(图6A);对照组ADSCs不表达vimentin(图6B)。图5 诱导后成纤维标尺示0.5μm

【参考文献】：
期刊论文
[1]大鼠脂肪源性干细胞与三维打印明胶支架的相容性[J]. 田晓红,张彬,房艳,柏树令,敖强,佟浩.  解剖学报. 2017(02)



本文编号：3419704