贵州地区人呼吸道合胞病毒的分离与基因变异分析

发布时间：2021-10-26 07:33

　　目的:人呼吸道合胞病毒（Human respiratory syncytial virus,HRSV）是引起全世界婴幼儿严重急性下呼吸道感染（acute lower respiratory tract infection,ALRTI）的最重要病毒性病原体之一。对2017年12月～2018年3月贵州地区婴幼儿呼吸道合胞病毒进行分离培养与基因变异分析,可以掌握贵州地区HRSV的分子流行病学特征,并对其临床特征进行分析,判断基因型与临床特征及病情的是否相关,对贵州地区HRSV引起的呼吸道感染的预防控制提供重要依据。方法:收集贵州省某三甲医院2017年12月至2018年3月收治的急性呼吸道感染患者的鼻咽分泌物。将鼻咽分泌物标本接种到Hep-2细胞中,分离出HRSV。采用间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence assay,IFA）和逆转录聚合酶链式反应（reverse transcription polymerase,RT-PCR）对出现细胞病变（cytopathic effect,CPE）的样本进一步验证,并将PCR产物测序。对贵州地区HRSV分离株进行核苷酸和... 

【文章来源】：贵州大学贵州省 211工程院校

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

HRSV病毒分离株在Hep-2细胞上的细胞病变效应(CPE)A:正常Hep-2细胞;B:感染的Hep-2细胞;

将上述所得的39份培养物进行免疫荧光检测,在本次检测中,在荧光显微镜下显示苹果绿荧光颜色的细胞是被HRSV病毒成功感染的细胞即阳性细胞。荧光显微镜观察结果如图2所示,图A是正常Hep-2细胞对照组,在荧光显微镜未见任何荧光阳性细胞;图B为标本组均显示出了苹果绿荧光阳性细胞。3.4 RT-PCR琼脂糖凝胶电泳鉴定

在本次实验中,选取经病毒分离培养和免疫荧光检测出的阳性标本,进行RT-PCR实验鉴定,通过凝胶成像系统,在紫外透射仪下观察,根据marker条带的大小判断到,在500bp~750bp之间均出现大小与预期相符的明亮的特异性条带。如图3所示。3.5 基因扩增与序列分析


本文编号：3459110