GATA3对耳蜗发育和功能维持的作用

发布时间：2021-11-01 04:40

　　利用条件性基因敲除方法和免疫荧光技术,检测和分析了小鼠从胚胎到成体耳蜗柯蒂氏器中Gata3的表达.结果表明,Gfi1-cre可以高效敲除特定时期毛细胞内Gata3基因的表达.同时发现成体Gata3-Null的毛细胞数量减少且排列发生紊乱.提示转录因子GATA3在耳蜗毛细胞发育和结构维持中起着重要作用. 

【文章来源】：杭州师范大学学报(自然科学版). 2020,19(05)

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

Gata3-CKO小鼠基因结构简图和杂交遗传图及小鼠基因鉴定结果

Gata3在小鼠内耳的发育过程中持续表达.本研究利用抗Gata3免疫组化方法,观察到Gata3在E9.5时开始在整个听囊(otocyst)表达.表达出截断的GATA3蛋白质,由于缺乏进入细胞核的引导序列,从而只能停留在细胞质内[20-22].本研究中使用的GATA3抗体可以识别截断的GATA3. E11.5到E12.5 Gata3的表达局限于听囊的背侧和中腹部.E15.5到出生后,OC发育基本成型(图 2F),期间可见支持细胞和毛细胞内持续表达Gata3(图 2A-E).MYO7A在毛细胞的细胞质内表达,一般被用作毛细胞的Marker.在鉴定Gfi1-cre驱动的CKO Gata3-Null小鼠的敲除效率时,本研究发现从E15.5开始到P5,Gata3-Null小鼠的毛细胞核内不再表达GATA3,而同期野生型对照的毛细胞核内表达明显(图 2G-2K).此期未见OC的结构异常,但发现突变体与野生型对照相比较,紧邻毛细胞下的支持细胞核内的Gata3表达有降低现象.提示Gata3在毛细胞的表达水平与支持细胞的表达水平之间存在某种联系.2.3 条件性敲除Gata3后对耳蜗其他细胞和结构的影响

已有多项研究确认内耳的发育受众多基因的调控,其中有很多重要的转录因子[3, 23-28].Sox2 (编码Sry-related HMG box transcription factor)基因隶属于Sox转录因子家族,是耳蜗毛细胞(听觉受体细胞)发育的关键基因,对毛细胞祖细胞的增殖有重要影响[29].Sox2在毛细胞和支持细胞中的表达不一致,提示OC细胞分化和结构形成过程中Sox2受其他因素的影响.本研究发现,在E15.5敲除Gata3后(图2H-H″),P0前Gata3-Null小鼠Sox2的表达模式与野生型无明显差异.虽然E18.5时野生型小鼠毛细胞已经停止表达Sox2(图 3A-A″;a-a″);但在P0时Gata3-Null小鼠内毛细胞内持续表达Sox2(图 3B-B″;b-b″).提示Gata3基因在决定毛细胞命运和维持其结构和功能方面有比较广泛和关键的影响.图4 Gata3缺失对成体耳蜗毛细胞数量和排列的影响


本文编号：3469512