维氏气单胞菌acrR敲除株的构建

发布时间：2021-11-03 13:48

　　从维氏气单胞菌C4（A.veronii C4）基因组DNA中扩增得到acrR基因上游同源臂片段和下游同源臂片段,连接到自杀质粒pRE112中以构建敲除重组质粒pRE112-ΔacrR,并通过电转化将敲除重组质粒导入大肠杆菌WM3064中,再通过双亲接合将其转入维氏气单胞菌C4中,以筛选得到acrR基因敲除的维氏气单胞菌突变株。生长曲线测定结果显示acrR基因敲除不会影响维氏气单胞菌的生长。生物膜测定表明,敲除acrR基因的维氏气单胞菌株表现出生物膜的形成显著增加。所构建的敲除株为进一步探索AcrR在维氏气单胞菌中的功能提供了必要材料,并提示AcrR在细菌生物膜形成中的潜在调控功能。 

【文章来源】：生物学杂志. 2020,37(06)北大核心CSCD

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 质粒、菌株及引物
        1.1.2 试剂盒、酶及药品
    1.2 方法
        1.2.1 acrR基因上、下游同源序列扩增
        1.2.2 pRE112-ΔacrR载体构建
        1.2.3 双亲接合及acrR基因敲除菌株的筛选
        1.2.4 生长曲线测定
        1.2.5 生物膜测定
2 结果与分析
    2.1 pRE112-ΔacrR载体的构建
    2.2 双亲接合及ΔacrR菌株的筛选
    2.3 ΔacrR敲除对生长的影响
    2.4 ΔacrR敲除对生物膜形成的影响
3 结论


【参考文献】：
期刊论文
[1]肠杆菌科细菌外排泵AcrAB-TolC调控机制的研究进展[J]. 程玉谦,祁伟.  山东医药. 2015(21)
[2]维氏气单胞菌研究进展[J]. 吴同垒,单晓枫,孟庆峰,郭伟生,王伟利,钱爱东.  中国兽药杂志. 2011(07)
[3]鱼源维氏气单胞菌的生物特性和基因分型[J]. 汪开毓,范方玲,肖丹,牟巧凤,黄锦炉.  中国兽医科学. 2011(04)



本文编号：3473799