小鼠骨髓淋巴管内皮祖细胞分离培养与鉴定

发布时间：2021-12-25 03:08

　　目的在小鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)的基础上,分离淋巴管内皮祖细胞(LEPCs),并引入外源性血管内皮生长因子-C(VEGF-C)进行干预,完善小鼠淋巴内皮祖细胞(LEPCs)体外分离、培养及诱导分化的实验方法。方法1、研究以C57BL/6小鼠为对象,通过改良差时贴壁法收集48小时内未贴壁的细胞,并使用EGM-2MV培养基培养至第三代,从而分离纯化骨髓细胞中的内皮祖细胞(EPCs)。2、使用流式细胞仪检测第三代细胞表面标记物CD34、CD133、VEGFR-3,并分析VEGFR-3+CD34+细胞和VEGFR-3+CD133+细胞在EPCs中所占的百分比。3、通过流式细胞术分选出表面标记物血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)阳性的细胞,并使用免疫荧光化学法鉴定其表面CD34、CD133的分布及表达情况。4、将流式细胞仪分选出的LEPCs培养至第3代,用MTT比色法检测LEPCs增殖能力。5、引入外源性血管内皮生长因子-C(VEGF-C)对LEPCs进行诱导分化,光镜下观察LEPCs形态变化,诱导分化28天后通过免疫荧光化学法检测淋巴管内皮透明质酸受体-1(LYVE-1)表达情况。...

【文章来源】： 石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校

【文章页数】：50 页

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
缩略词说明
前言
材料与方法
    1 材料
    2 方法
    3 统计处理
    4 技术路线
结果
    1 LEPCs的生物学特性
    2 LEPCs培养与诱导分化
讨论
结论
参考文献
文献综述
    参考文献
致谢
作者简介
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【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3551680