拟南芥HOOKLESS1基因的功能研究及其编码蛋白的抗体制备

发布时间：2022-01-16 11:54

　　双子叶植物种子在黑暗中萌发时,为了使植物快速穿破土壤见光并进行光合作用,形成顶端弯钩结构来保护植物幼嫩分生组织不受损害。顶端弯钩的形成受生长素、赤霉素和乙烯等激素以及光照等外界环境条件的复杂调控。研究表明乙烯应答基因HOOKLESS1对顶端弯钩的形成具有调控作用。此外,拟南芥HLS1基因还参与调控生长素的分布和糖响应基因的表达以及植物免疫。本研究以拟南芥HLS1基因为研究对象,以HLS1突变体hls1-1和Salk₁36528c为材料,对HLS1基因进行克隆和功能的研究。得出以下实验结果:（1）通过对不同环境的T2代转基因植物进行GUS组织化学染色,结果显示HLS1主要在植物新生组织和器官中表达。通过拟南芥WT叶肉细胞原生质体转化实验对HLS1进行亚细胞定位发现HLS1定位在细胞核和晚期内体,推测HLS1与内体参与的生物学途径有关。系统进化树和蛋白序列比对分析发现HLS1的生物学功能具有较强保守型。（2）构建二元表达载体,以HLS1基因突变体hls1-1和Salk₁36528c为遗传背景,农杆菌转化法过表达HLS1建立回复系。对回复系的研究发... 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

(a)黑暗诱导叶片衰老

数据库（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/）下载得到拟南芥 HLS1one 数据库下载到玉米等 13 个与 HLS1 同源性较高的物种蛋白构建系统进化树。S1 多序列比对 HLS1 与其它 13 个不同物种的氨基酸序列通过 Clustal Omeg各物种 HLS1 比较结果输出，在 BoxShade 软件中分析，黑色区，灰色区域为相似的氨基酸序列，根据黑色和灰色分布区域来中的保守性。芥 HLS1 突变体介绍与表型分析LS1 突变体 hls1-1 为 HLS1 基因的第三个外显子上从 ATG 开始为 A，氨基酸由谷氨酸变为赖氨酸；Salk_136528c 突变体是由因的第三个外显子上引起的突变（图 2-1）。

T、hls1-1 和 Salk_136528c 顶端弯钩表型分析，BarsAnalysis of the hook phenotypic in WT, hls1-1 and Salk_ 突变体在光照环境中的表型分析T、hls1-1 和 Salk_136528c，24 h 持续光照恒温现 2 周大的 hls1-1、Salk_136528c 表现出叶片的表型（图 2-3）。图 2-3 WT、hls1-1 和 Salk_136528c 表型分析2-3 Phenotypic analysis of WT, hls1-1 and Salk_136528c 突变体在碳饥饿诱导衰老模型实验中表型分析

【参考文献】：
期刊论文
[1]玉米暗形态建成突变体的筛选[J]. 张昊,汪海,朱莉,郎志宏.  中国农业科技导报. 2017(01)



本文编号：3592610