动粒蛋白CENP-C/H/K复合物的体外重组与互作机制研究

发布时间：2022-02-17 14:05

　　有丝分裂过程中,染色体的准确分离需要诸多亚细胞结构的协同运作。位于着丝粒两侧的动粒复合物是其重要的参与者之一。动粒蛋白的缺失或异常可导致纺锤体微管与染色体结合异常、染色体向两级移动过程滞后、染色体排列错误和非整倍性等灾难性后果。人源动粒复合物可分为内层动粒和外层动粒。内层动粒与组蛋白H3的变体CENP-A结合,与着丝粒区域DNA相连。内层动粒依据其功能分为五组亚复合物:CENP-C,CENP-H/I/K/M,CENP-L/N,CENP-T/W/S/X和CENP-O/P/Q/U/R。外层动粒可分为KNL1,MIS12,NDC80三组亚复合物,在连接微管和激活纺锤体检查点上发挥重要作用。近年来动粒复合物的研究获得较大进展,但其结构与组装方面仍存在许多未知。本文聚焦于内层动粒重要亚基CENP-C、CENP-H、CENP-K三种蛋白的相互作用分析与结构生物学尝试。通过分子克隆与重组表达系统,我们表达纯化了不同长度的CENP-C和CENP-K蛋白,并重组获得了CENP-H/K二元复合物及CENP-C/H/K三元复合物。通过蛋白质复合物体外重组,我们发现CENP-H与CENP-K通过二者C端可直接... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省211工程院校985工程院校教育部直属院校

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 细胞分裂简述
    1.2 细胞分裂相关的亚细胞结构
    1.3 动粒
    1.4 CENP-C/H/K蛋白的功能研究
    1.5 本文拟解决的问题
2 实验材料和方法
    2.1 实验材料
    2.2 实验方法
3 实验结果与讨论
    3.1 CENP-C蛋白质PEST-rich结构域的表达、纯化与表征
    3.2 CENP-K蛋白质及CENP-H/K复合物的表达、纯化与表征
    3.3 CENP-C与 CENP-H/K复合物的相互作用探索
    3.4 CENP-C/H/K复合物的纯化和晶体生长尝试
4 小结和展望
致谢
参考文献
附录1 在读期间发表的学术论文
附录2 主要符号和缩略词表


【参考文献】：
期刊论文
[1]Overexpression of centromere protein H is significantly associated with breast cancer progression and overall patient survival[J]. Wen-Ting Liao1,2,3,Yan Feng1,2,Men-Lin Li1,2,Guang-Lin Liu1,2,Man-Zhi Li1,2,Mu-Sheng Zeng1,2 and Li-Bing Song1,2 1State Key Laboratory of Oncology in South China,Guangzhou,Guangdong 510060,P.R.China;2Department of Experimental Research,Sun Yat-sen University Cancer Center,Guangzhou,Guangdong 510060,P.R.China;3Department of Pathology,School of Basic Medical Sciences,Southern Medical University,Guangdong Provincial Key Laboratory of Molecular Tumor Pathology,Guangzhou,Guangdong 510515,P.R.China..  癌症. 2011(09)



本文编号：3629533