稳定高效培养小鼠骨髓间充质干细胞及其外泌体的特征化的研究

发布时间：2022-11-03 20:54

　　目的:本实验研究尝试建立一个稳定、高效的小鼠骨髓间充质干细胞的培养方法;并尝试对其培养后分泌的外泌体应用最简易、最常用的超高速离心分离的方法进行提取及并进行特征化;为小鼠骨髓间充质干细胞外泌体的有效获取奠定实验基础和方法。方法:通过应用“全骨髓、差速贴壁并辅助以低氧环境”的优化方法进行小鼠骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）的培养,并收集干细胞,进行传代,应用流式细胞仪鉴定干细胞表面标记物（CD117抗原、CD31抗原,整合素家族类抗原标志分子CD29、黏附分子家族类抗原标志分子CD44和Ly-6抗原家族成员Sca-1）。然后进行成骨组织、成脂组织及成软骨组织诱导;茜素红S鉴定成骨情况,油红O染色鉴定成脂肪情况,阿利辛蓝染色鉴定成软骨情况;另外,在培养5代后收集BM-MSCs的上清液,应用超高速离心分离的方法提取外泌体,电镜检测外泌体物理结构、形态;Western blot鉴定外泌体的特征性阳性蛋白标志物（HSP70抗原、Syntenin1抗原、CD9抗原、CD63抗原、及TSG101抗原）,阴性蛋白标志物Grp94抗原);纳米颗粒跟踪分析仪分析BM-MSCs外泌体囊泡的直径大小及分布规... 

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

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英文缩略词表
摘要
Abstract
1.引言
2.材料与方法
4.结果
5.讨论
6.结论
参考文献
个人简历
致谢
综述 间充质干细胞外泌体组织修复的研究进展—以骨关节炎为例
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]兔骨髓间充质干细胞分离培养后的活力检测[J]. 孔根现,蒋知新,沙杭,张清华.  中国组织工程研究. 2013(01)
[2]小鼠骨髓间充质干细胞SCA-1+/CD45+/CD31+亚群在心肌梗死中的作用[J]. 贺继刚,沈振亚,滕小梅,余云生,叶文学,黄浩岳,丁英龙.  实用医学杂志. 2012(22)



本文编号：3700610