反向PCR法构建TRAF6蛋白截短体质粒

发布时间：2023-04-04 10:41

　　目的:构建肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)截短体质粒pCMV-Myc-TRAF6 N和pCMV-Myc-TRAF6 C。方法:采用反向PCR法。结果:经双酶切鉴定,分别得到约900和750 bp的TRAF6截短体质粒pCMVMyc-TRAF6 N和pCMV-Myc-TRAF6 C,符合预期;转染293FT细胞后,Western印迹检测到TRAF6 N和TRAF6 C的表达。结论:构建了TRAF6蛋白截短体质粒,有助于进一步验证TRAF6的生物学功能。

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 PCR引物的设计与合成
    1.3 截短体质粒的构建
    1.4 转化及提取
    1.5 病毒包装和转染
    1.6 免疫印迹法检测目的基因的表达
2 结果
    2.1 TRAF6截短体基因克隆的转化
    2.2 p CMV-Myc-TRAF6 N和p CMV-Myc-TRAF6C质粒的鉴定
    2.3 转染后TRAF6 N和TRAF6 C蛋白的表达
3 讨论



本文编号：3781937