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开阳地区桑葚果园富硒酵母菌的筛选及其特性研究

发布时间:2023-08-25 20:36
  硒是对人体具有多种生理功能的必需微量元素,而我国多数人群硒摄入量不足,因此进行富硒产品的研究与开发对于提高国民健康水平意义重大。富硒酵母菌作为一种有机硒源,比无机硒源具有更高的生物活性和安全性,是富硒功能性产品的理想添加剂,应用前景广阔。本研究以贵州开阳这一富硒地区的桑葚果园为酵母菌的分离源,通过定性定量的方法筛选出一株富硒能力强的酵母菌,对其进行了分子生物学鉴定和生长特性研究,同时对菌株的富硒发酵条件进行了优化,分析了富硒酵母菌的氨基酸组成,最后基于转录组学技术对酵母菌的富硒机理进行了初步探究,以期为富硒酵母菌的进一步开发利用提供参考。研究的主要结果如下:(1)从富硒地区开阳的某桑葚果园中,共分离得到75株酵母菌,然后利用耐硒法和红硒法进行初筛,再以硒转化率进行复筛,得到一株硒转化率较高的酵母菌,其富硒量为2278.35μg/g,生物量为4.31 g/L,硒转化率为49.11%,编号为SY2,通过WL培养基初步鉴定及26S r DNA序列分析,鉴定该菌株为酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)。(2)对S.cerevisiae SY2的生长特性进行了研究,其延...

【文章页数】:124 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 引言
    1.2 硒的概述
        1.2.1 硒元素的发现
        1.2.2 硒的分布及存在方式
        1.2.3 硒的生理功能
        1.2.4 生物体补硒方式
    1.3 酵母菌
        1.3.1 酵母菌的分布
        1.3.2 酵母菌的鉴定
    1.4 富硒酵母菌
        1.4.1 富硒酵母菌的筛选
        1.4.2 酵母菌作为富硒载体的优越性
        1.4.3 富硒酵母的研究现状
    1.5 转录组学
        1.5.1 转录组学简介
        1.5.2 转录组学在酵母菌研究中的应用
    1.6 研究意义及内容
        1.6.1 研究意义
        1.6.2 研究内容
        1.6.3 技术路线
第二章 桑葚果园富硒酵母菌的分离、筛选与鉴定
    2.1 引言
    2.2 试验材料
        2.2.1 样品
        2.2.2 试验试剂
        2.2.3 主要试剂的配制
        2.2.4 试验仪器与设备
        2.2.5 培养基
    2.3 试验方法
        2.3.1 酵母菌的分离纯化及保藏
        2.3.2 酵母菌种子液的制备
        2.3.3 富硒酵母菌的初筛
        2.3.4 富硒酵母菌的复筛
        2.3.5 富硒酵母菌的初步鉴定
        2.3.6 富硒酵母菌的分子生物学鉴定
        2.3.7 分析测定方法
        2.3.8 数据处理与分析
    2.4 结果与分析
        2.4.1 酵母菌的分离纯化
        2.4.2 富硒酵母菌的初筛
        2.4.3 富硒酵母菌的复筛
        2.4.4 富硒酵母菌的初步鉴定
        2.4.5 富硒酵母菌的分子生物学鉴定
    2.5 本章小结
第三章 富硒酵母菌的生长特性及富硒发酵条件优化研究
    3.1 引言
    3.2 试验材料
        3.2.1 试验样品
        3.2.2 试验试剂
        3.2.3 主要试剂的配制
        3.2.4 试验仪器与设备
        3.2.5 培养基
    3.3 试验方法
        3.3.1 富硒酵母菌种子液的制备
        3.3.2 富硒酵母菌生长曲线的绘制
        3.3.3 富硒酵母菌发酵力的测定
        3.3.4 富硒酵母菌生长条件的研究
        3.3.5 富硒酵母菌培养基的选择
        3.3.6 富硒发酵条件的研究
        3.3.7 富硒酵母菌氨基酸的测定
        3.3.8 分析测定方法
        3.3.9 数据处理与分析
    3.4 结果与分析
        3.4.1 富硒酵母菌生长曲线的绘制
        3.4.2 富硒酵母菌发酵力的测定
        3.4.3 富硒酵母菌的生长条件
        3.4.4 富硒酵母菌培养基的选择
        3.4.5 富硒发酵条件的研究
        3.4.6 富硒酵母菌的氨基酸分析
    3.5 本章小结
第四章 基于转录组学对酵母菌富硒机理的初步研究
    4.1 引言
    4.2 试验材料
        4.2.1 试验材料
        4.2.2 试验试剂
        4.2.3 主要试剂的配制
        4.2.4 试验仪器与设备
        4.2.5 培养基
    4.3 试验方法
        4.3.1 富硒酵母菌种子液的制备
        4.3.2 富硒酵母菌培养
        4.3.3 酵母菌总RNA提取与质量检测
        4.3.4 文库制备和转录组测序
        4.3.5 测序数据质量分析
        4.3.6 序列比对分析
        4.3.7 基因功能注释
        4.3.8 表达量分析
        4.3.9 差异表达基因筛选
        4.3.10 差异基因GO富集分析
        4.3.11 差异基因KEGG富集分析
    4.4 结果与讨论
        4.4.1 RNA样品质量检测及文库构建
        4.4.2 测序数据质量评估
        4.4.3 序列比对分析
        4.4.4 基因功能注释
        4.4.5 表达量分析
        4.4.6 差异表达基因的筛选及注释
        4.4.7 差异表达基因GO富集分析
        4.4.8 差异表达基因KEGG富集分析
        4.4.9 iPath代谢通路分析
    4.5 本章小结
第五章 结论与展望
    5.1 结论与创新点
        5.1.1 主要结论
        5.1.2 创新点
    5.2 展望
致谢
主要参考文献
附录一
附录二
图版



本文编号:3843269

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