基于固体核磁共振方法的蛋白质组装体三维结构解析

发布时间：2023-11-10 19:12

　　蛋白质组装体广泛存在于生物体内,具有相关生物学功能或与人类的重要疾病密切相关。蛋白质组装体分子量大,通常难以溶解和结晶,限制了常用的结构研究手段如X射线晶体学和液体NMR等在其高分辨三维结构解析中的应用。固体核磁共振技术(ssNMR)在难溶、非结晶样品的三维结构解析中具有独特的优势,尤其随着固体NMR硬件包括高场磁体和高性能的探头、固体NMR多维脉冲实验技术和样品制备技术特别是同位素标记技术的快速发展,固体NMR已经成为了蛋白组装体三维结构解析的重要手段。在样品制备方法方面,强调了样品制备条件的优化对得到构象均一样品的重要性,以及丰富的同位素标记方法的使用对固体NMR谱图分辨率提高的重要作用。同时多种脉冲序列如质子驱动自旋扩散技术(PDSD),偶极辅助旋转共振技术(DARR),质子辅助重偶技术(PAR)或转移回波双共振技术(TEDOR)等的建立和发展为结构约束条件收集提供了基本的技术方法。此外,固体NMR与其它实验技术如扫描透射电镜(STEM),冷冻电镜(Cryo-EM)等和理论模拟方法的联用能显著地提高固体NMR的能力,从而能解析分子量更大、结构更复杂的蛋白质组装体的三维结构。本文以...

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【文章目录】：
1 引言
2 利用固体NMR技术获得蛋白质结构约束信息
    2.1 改善谱图质量的方法
        2.1.1 优化样品制备方法
        2.1.2 优化样品同位素标记方法
        2.1.3 其它方法
    2.2 提取结构约束的方法
        2.2.1 角度约束
        2.2.2 距离约束
        2.2.3 其它获得距离约束的方法
3 固体NMR联合其它技术解析蛋白质结构
4 固体NMR在蛋白质组装体结构解析中的应用
    4.1 Aβ淀粉样蛋白纤维结构解析
    4.2 T3SS针状组装体结构解析
6 总结与展望



本文编号：3862150