eat-17在神经元树突形态建成中的功能及其分子机制

发布时间：2024-03-09 00:23

　　神经系统信息传导依赖于正确的神经环路。神经环路建成的前提是精确的轴突与树突导向和生长,因此研究树突发育对理解神经环路建成具有重要的意义。线虫PVD神经元是一类具有大量树突分支的感觉神经元。前人的研究主要聚焦在促进树突分支形成的分子机制,而抑制树突分支形成的机制还知之甚少。本研究通过RNA干扰和化学诱变遗传学筛选发现,eat-17功能缺失导致神经元产生大量异位树突分支。该基因编码了6种蛋白亚型,根据长度可以简单的分为长型(long isoform a,b,d,e)和短型(short isoform c,f)的蛋白亚型,通过蛋白结构预测发现长亚型蛋白包含TBC结构域和三个CC结构域(coil-coiled domain),TBC结构域被证明为含有GAP(GTPase activating protein,GTP酶活化蛋白)活性,能够激活GTP水解酶从而将活化的G蛋白转变为失活状态^[1,2],CC结构域一般介导蛋白质相互作用,而短亚型蛋白仅包含了两个CC结构域。我们获得了在CC3结构域有基因片段删除的突变体,发现该突变体表现出与敲降类似的异位树突分支增多表型。遗传拯救实...

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【部分图文】：

图1-2PVD树突分支形态的区分

浙江大学硕士学位论文1.引言4能够造成PVD产生异常增多的异位分支表型的突变体，并开展一系列进一步的实验而解析具体的作用机制。我们的研究将有助于揭示神经元树突发育中异位分支的产生原因，更加充分的理解神经元树突发育的分子机制。图1-1线虫中PVD和FLP两类感觉神经元的分支形态及分....

图3.1敲降eat-17导致线虫PVD神经元树突产生异位分支A-C.RNAi作用下的PVD形态

浙江大学硕士学位论文3.实验结果15图3.1敲降eat-17导致线虫PVD神经元树突产生异位分支A-C.RNAi作用下的PVD形态。A.阴性对照L4440RNAi；B.201F11RNAi；C.201F10RNAi。D.eat-17基因的6种转录本示意图，引自线虫数据库WormB....

图3.4-1通过EMS正向遗传学筛选获得的树突异位分支增加的突变体表型A-D.分别显示了WT、zac26、zac51和zac64的PVD表型，该组图片的PVD标记蛋白均为wyIs594（整合在V号染色体上），它与wyIs592（在III号染色体）一样也是一种PVD上表达的

浙江大学硕士学位论文3.实验结果25图3.4-1通过EMS正向遗传学筛选获得的树突异位分支增加的突变体表型A-D.分别显示了WT、zac26、zac51和zac64的PVD表型，该组图片的PVD标记蛋白均为wyIs594（整合在V号染色体上），它与wyIs592（在III号染色体....

图3.4-2zac51突变体的基因遗传定位A.用SNP方法对突变体进行染色体定位，图示为经过PCR和DraI酶切后的DNA条带图，该结果显示了zac51突变基因位于IV号染色体

浙江大学硕士学位论文3.实验结果26图3.4-2zac51突变体的基因遗传定位A.用SNP方法对突变体进行染色体定位，图示为经过PCR和DraI酶切后的DNA条带图，该结果显示了zac51突变基因位于IV号染色体。每条染色体共有8个SNP检测位点，图示DNA泳道依次两个为一组，前....

本文编号：3922618