过表达骨形态发生蛋白4对兔骨髓间充质干细胞增殖与成软骨的影响

发布时间：2024-03-12 19:01

　　目的通过腺病毒(Ad)载体感染过表达骨形态发生蛋白4(BMP-4),研究BMP-4对兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外增殖和成软骨的影响。方法全骨髓贴壁法分离获取BMSCs,传代培养提升细胞纯度,通过细胞形态学及流式细胞术测定表面分子标志物以鉴定细胞;设立病毒感染复数(MOI)梯度组,通过倒置相差显微镜和流式细胞仪确定最佳MOI;酶联免疫吸附试验(ELISA)及蛋白印迹法分析过表达BMP-4对细胞分泌Ⅱ型胶原(COLLⅡ),性别决定基因盒9(Sox9)和BMP-4的影响;细胞计数试剂盒8(CCK-8)法鉴定过表达BMP-4对BMSCs体外增殖的影响。结果原代细胞呈圆形、椭圆和梭形不等,第2代细胞呈典型成纤维样长梭形,漩涡状分布,低表达造血干细胞表面分子标志物CD34(1.94%)和CD45(2.13%),高表达CD44(98.2%)、CD29(99.7%)和CD90(98.8%)。MOI为100时,病毒感染效率较高,且对细胞损伤最小,为最适MOI。与对照组相比,过表达BMP-4能显著促进BMSCs的增殖,并能分泌成软骨特异指标COLLⅡ、BMP-4及Sox9(P<0.05)。结...

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本文编号：3926730