LA诱导和醇胁迫对植物乳杆菌p-8 CLA转化率的影响及机制初探
发布时间：2024-03-23 02:20
共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)是多种含共轭双键的十八碳二烯酸类物质的总称,具有多种益于生物体的生理功效。研究发现,乳酸菌可以将亚油酸(linoleic acid,LA)转化并生成CLA。在该转化过程中,需要脂肪酸水合酶(Fatty acid hydratase,CLA-HY)、羟基脂肪酸脱氢酶(Hydroxy fatty acid dehydrogenase,CLA-DH)、乙酰乙酸脱羧酶(Acetoacetate decarboxylase,CLA-DC)参与,还与烯酮还原酶(Enone reductase,CLA-ER)和烯醇化酶(Enolase,Eno)有关。本实验完成了 LA诱导和醇胁迫对植物乳杆菌p-8菌株CLA转化率的影响及机制初探的研究,为阐明植物乳杆菌p-8菌株产CLA的分子机制和寻找有效提高CLA生成的调控手段奠定了基础。实验得到以下结果和结论:1.植物乳杆菌p-8菌株具有较低的转化LA为CLA的能力,生成的CLA主要分布在发酵液中,有c9,t11-CLA、t10,c12-CLA和t9,t11-CLA三种异构体形式。但菌体中只有...
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
1 引言
1.1 共轭亚油酸的生理功能
1.1.1 预防及抑制癌症
1.1.2 减少体内脂肪积累
1.1.3 提高身体免疫力
1.1.4 清除血管垃圾
1.1.5 提高骨骼密度
1.2 共轭亚油酸的合成方式
1.2.1 化学合成
1.2.2 生物合成
1.3 微生物转化共轭亚油酸机制
1.3.1 瘤胃微生物
1.3.2 丙酸杆菌
1.3.3 乳酸菌
1.4 与CLA合成相关的酶
1.4.1 亚油酸异构酶
1.4.2 脂肪酸水合酶
1.4.3 羟基脂肪酸脱氢酶
1.4.4 乙酰乙酸脱羧酶
1.4.5 烯酮还原酶
1.4.6 烯醇化酶
1.5 LA对细胞影响
1.6 影响CLA产生的因素
1.7 亚油酸异构酶基因的转录调控研究
1.8 植物乳杆菌P-8菌株
1.9 研究意义与内容
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 菌株
2.1.2 引物
2.1.3 培养基
2.1.4 试剂盆
2.1.5 生化试剂
2.1.6 溶液配制
2.1.7 主要仪器设备
2.2 实验方法
2.2.1 L.plantarum P-8菌株培养
2.2.2 不同底物浓度对植物乳杆菌p-8菌株培养
2.2.3 不同浓度的甲醇胁迫下植物乳杆菌p-8菌株的培养
2.2.4 不同浓度的乙醇胁迫对植物乳杆菌p-8菌株的培养
2.2.5 CLA的检测
2.2.6 产CLA相关酶转录水平分析
3 结果与分析
3.1 菌种活化及生长曲线测定
3.2 标准样品和待测样品色谱图
3.3 不同底物浓度对植物乳杆菌p-8菌株CLA转化率
3.4 不同底物浓度诱导下植物乳杆菌p-8菌株CLA合成相关酶基因转录水平
3.4.1 不同底物浓度诱导下植物乳杆菌p-8菌株RNA提取结果
3.4.2 不同底物浓度诱导下植物乳杆菌p-8菌株CLA合成相关酶基因及内参基因的转录水平
3.5 不同浓度甲醇胁迫下植物乳杆菌p-8菌株CLA的转化率
3.6 不同甲醇浓度胁迫下植物乳杆菌p-8菌株CLA合成相关酶基因的转录水平
3.6.1 不同甲醇浓度胁迫下植物乳杆菌p-8菌株RNA提取结果
3.6.2 不同甲醇浓度胁迫下植物乳杆菌p-8菌株CLA合成相关酶基因的转录水平
3.7 不同乙醇浓度胁迫下植物乳杆菌p-8菌株CLA的转化率
3.8 不同乙醇浓度胁迫下植物乳杆菌p-8菌株CLA生成相关酶基因的转录水平
3.8.1 醇胁迫对植物乳杆菌p-8菌株CLA合成相关酶基因转录水平的影响
3.8.2 不同乙醇浓度胁迫下植物乳杆菌p-8菌株CLA合成相关酶基因的转录水平
4 讨论
5 结论
致谢
参考文献
作者简介
本文编号：3935302
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
1 引言
1.1 共轭亚油酸的生理功能
1.1.1 预防及抑制癌症
1.1.2 减少体内脂肪积累
1.1.3 提高身体免疫力
1.1.4 清除血管垃圾
1.1.5 提高骨骼密度
1.2 共轭亚油酸的合成方式
1.2.1 化学合成
1.2.2 生物合成
1.3 微生物转化共轭亚油酸机制
1.3.1 瘤胃微生物
1.3.2 丙酸杆菌
1.3.3 乳酸菌
1.4 与CLA合成相关的酶
1.4.1 亚油酸异构酶
1.4.2 脂肪酸水合酶
1.4.3 羟基脂肪酸脱氢酶
1.4.4 乙酰乙酸脱羧酶
1.4.5 烯酮还原酶
1.4.6 烯醇化酶
1.5 LA对细胞影响
1.6 影响CLA产生的因素
1.7 亚油酸异构酶基因的转录调控研究
1.8 植物乳杆菌P-8菌株
1.9 研究意义与内容
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 菌株
2.1.2 引物
2.1.3 培养基
2.1.4 试剂盆
2.1.5 生化试剂
2.1.6 溶液配制
2.1.7 主要仪器设备
2.2 实验方法
2.2.1 L.plantarum P-8菌株培养
2.2.2 不同底物浓度对植物乳杆菌p-8菌株培养
2.2.3 不同浓度的甲醇胁迫下植物乳杆菌p-8菌株的培养
2.2.4 不同浓度的乙醇胁迫对植物乳杆菌p-8菌株的培养
2.2.5 CLA的检测
2.2.6 产CLA相关酶转录水平分析
3 结果与分析
3.1 菌种活化及生长曲线测定
3.2 标准样品和待测样品色谱图
3.3 不同底物浓度对植物乳杆菌p-8菌株CLA转化率
3.4 不同底物浓度诱导下植物乳杆菌p-8菌株CLA合成相关酶基因转录水平
3.4.1 不同底物浓度诱导下植物乳杆菌p-8菌株RNA提取结果
3.4.2 不同底物浓度诱导下植物乳杆菌p-8菌株CLA合成相关酶基因及内参基因的转录水平
3.5 不同浓度甲醇胁迫下植物乳杆菌p-8菌株CLA的转化率
3.6 不同甲醇浓度胁迫下植物乳杆菌p-8菌株CLA合成相关酶基因的转录水平
3.6.1 不同甲醇浓度胁迫下植物乳杆菌p-8菌株RNA提取结果
3.6.2 不同甲醇浓度胁迫下植物乳杆菌p-8菌株CLA合成相关酶基因的转录水平
3.7 不同乙醇浓度胁迫下植物乳杆菌p-8菌株CLA的转化率
3.8 不同乙醇浓度胁迫下植物乳杆菌p-8菌株CLA生成相关酶基因的转录水平
3.8.1 醇胁迫对植物乳杆菌p-8菌株CLA合成相关酶基因转录水平的影响
3.8.2 不同乙醇浓度胁迫下植物乳杆菌p-8菌株CLA合成相关酶基因的转录水平
4 讨论
5 结论
致谢
参考文献
作者简介
本文编号：3935302
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