不同炎性微环境对脂肪来源间充质干细胞增殖及分化的影响

发布时间：2024-03-24 05:04

　　目的:研究不同类型巨噬细胞介导的炎性微环境对脂肪来源间充质干细胞(ADSCs)增殖和分化的影响。方法:利用M1、M2型巨噬细胞条件培养基(conditioned media,CMs)模拟不同的炎性微环境。分别在不同环境下(CM1组、CM2组以及Norm组)培养并诱导ADSCs。利用CCK-8法检测细胞增殖能力,茜素红染色、油红O染色以及RT-PCR检测各组细胞成骨或成脂情况。结果:CCK-8检测结果显示CM1组ADSCs增殖能力强于其他两组;茜素红染色及RT-PCR检测结果显示CM2可显著提高ADSCs成骨能力;油红O染色及RT-PCR检测结果显示CM1可显著提高ADSCs成脂能力。结论:CM1可以增强ADSCs的增殖和脂肪形成能力,CM2对ADSCs的成骨分化有显著促进作用。

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【部分图文】：

图1巨噬细胞表型鉴定

表1RT-PCR引物序列Tab1PrimersequencesforRT-PCR基因名称引物序列(5’-3’)大小(bp)RUNX2正向:TCTTCCAAAGCCAGAGCG18反向:TGCCATTGAGGTGGTCG17OCN正向:CA....

图2不同类型巨噬细胞表型鉴定

免疫荧光染色结果显示巨噬细胞极化后形态发生变化,向M1型极化的巨噬细胞呈“煎蛋样”,伪足较短(图2A);而向M2型极化巨噬细胞伪足较细长,呈“细长纺锤样”[13](图2C)。流式细胞术分析显示F4/80+细胞中CD86+的比例约为90.7%(图2B);F4/80+细胞中CD....

图33组ADSCs增殖曲线

图2不同类型巨噬细胞表型鉴定2.3ADSCs增殖的检测

图43组ADSCs成骨诱导后茜素红染色以及半定量分析结果

油红O染色结果及半定量分析显示成脂诱导14d后CM1组中的ADSCs相比其他2组产生了更多的脂滴(P<0.05)(图6)。RT-PCR分析显示,CM1组PPAR-γ、C/EBPαmRNA相对表达量均明显高于其他2组(P<0.01)。PPAR-γ相对表达量Norm组....

本文编号：3937010