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磁性纳米粒子对脂肪酶CRL的固定化

发布时间:2024-03-30 12:43
  脂肪酶(EC3.11)作为绿色生物催化剂,广泛应用于生物制药、食品加工、化学分析等领域。固定化为提升酶重用性及稳定性提供了一种有效的解决途径,而以磁性纳米粒子为固定化载体可以更为方便快捷地回收酶。本文围绕磁性纳米粒子,制备出三种复合载体,包括化学共沉淀法制备得到磁性氧化石墨纳米复合物(MGO)、表面活性剂改性磁性氧化石墨烯(SMGO)和表面活性剂改性Fe304磁性纳米粒子(Span/Tween Fe304),探讨三种载体用于褶皱假丝酵母脂肪酶(CRL)的固定化效果,并重点研究表面活性剂改性载体对脂肪酶催化特性的影响。采用正交实验对MGO载体的制备进行优化,以酶活与比活为考察指标,得到MGO的最佳制备工艺。傅里叶红外光谱(FT-IR)与扫描电镜(SEM)表征分析表明MGO制备成功,GO表层的羧基官能团在强碱条件下被部分还原,导致MGO表面羧基含量明显减少。在最优固定化条件下,固定化酶活力回收率及蛋白回收率分别为92.41%、88.2%。固定化酶重复利用第二次相对酶活下降至40%左右,推测MGO载体上固定的脂肪酶大部分为物理吸附,极少部分为共价固定。采用化学共沉淀法制备MGO,直接在反应体...

【文章页数】:82 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图1-1洋葱伯克霍尔德氏菌脂肪酶(BCL)结构色带示意图[16]?(p带用箭头和螺旋线圈表示,盖子??(118-159)为红色螺旋,面向盖子的子域(214-261)为蓝色,Ca2_由球形表示,催化三联体(S87,??D264和H286)和氨基酸残基用球棍表示??

图1-1洋葱伯克霍尔德氏菌脂肪酶(BCL)结构色带示意图[16]?(p带用箭头和螺旋线圈表示,盖子??(118-159)为红色螺旋,面向盖子的子域(214-261)为蓝色,Ca2_由球形表示,催化三联体(S87,??D264和H286)和氨基酸残基用球棍表示??

研宄人员通过对多种脂肪酶全尺寸3D结构的研究,发现不同来源的脂肪??酶虽然会在尺寸大小及氨基酸序列上存在差异,但它们均拥有类似的结构基序,即a/p??水解酶折叠。其核心由五个及以上类似的P带构成,侧翼为a螺旋。其结构如图1-1所示。??脂肪酶的活性中心包含三个氨基酸残基,分别为丝....


图1-2酶的固定化方法??Fig.?1-2?The?methods?for?enzyme?immobilization^9]??

图1-2酶的固定化方法??Fig.?1-2?The?methods?for?enzyme?immobilization^9]??

??固定化方式是影响固定化酶催化特性的主要因素之一1171。固定化方式有多种,按照??人类来分有化‘7:法和物理法(图1-2所示)。吸附法和包埋法均属于物理法.前者是指??将_勾各类载体材料或者吸附剂在温和条件下直接接触,酶通过氢键、范德华力、静电??相互作用或疏水相互作用吸附在....


图1-4氧化石墨烯结构??-

图1-4氧化石墨烯结构??-

氧化石墨烯(GO)为新型二维(2D)纳米材料,具有优异的物理化学性能,在氧??化石墨烯结构中,其边缘和褶皱处多为羧基,片层表面上的官能团主要为羟基和环氧基。??其结构如图1-4所示。氧化石墨烯被广泛应用于纳米载体的研究,可应用于多种生物活??性物质,进而开发新型生物催化剂、生物传....


图2-3磁性氧化石墨烯固定化酶分散液(a);固定化酶液在外部磁场作用2min(b)??Fig.?2-3?The?dispersing?liquid?of?the?magnetic?grapHene?immobilized?enzyme?(a);??

图2-3磁性氧化石墨烯固定化酶分散液(a);固定化酶液在外部磁场作用2min(b)??Fig.?2-3?The?dispersing?liquid?of?the?magnetic?grapHene?immobilized?enzyme?(a);??

硕士学位论文磁纳米子对脂?肪酶CRL的固定化??图2-2〇〇(0.5尺)、?63〇4(21〇、1^〇〇(2{(:,8幻8£1^图??Fig?2-2?GO、Fe3〇4、MGO?Scanning?electron?microscope。??屬屬:::丨??_:::.1:._|難??图....



本文编号:3942372

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