影响草酸青霉纤维素酶合成的膜蛋白鉴定及其功能研究

发布时间：2024-04-22 06:03

　　草酸青霉(Penicillium oxalicum)分泌的纤维素酶组分比里氏木霉(Trichoderma reesei)的更丰富、合理,β-葡萄糖苷酶酶活力更高,已成为生物炼制的研究热点。草酸青霉菌株HP7-1是本实验从原始森林筛选出的一株能高效降解木质纤维素的丝状真菌。对P.oxalicum HP7-1基因组和转录组测定已完成,其纤维素酶表达调控的机理也得到了一定的揭示。纤维素酶的产生涉及到纤维素的诱导、基因表达调控、纤维素酶的合成、转运和分泌等诸多方面。转运蛋白在运送可溶性糖进入细胞及形成纤维素诱导信号过程中起到关键作用。对于木质纤维素降解真菌而言,糖分子本身既是碳源,又是重要的信号分子,与木质纤维素降解酶的诱导表达息息相关。因此,与纤维素酶合成相关的膜蛋白特别是糖转运蛋白的研究对进一步认识纤维素的降解利用具有重要意义。本课题首先构建了草酸青霉可重复利用筛选标记PyrG转化系统,解决转化系统筛选标记不足的问题,利于对草酸青霉进行基因敲除和遗传改造。首先,以PyrG缺失菌株△ku70△PyrG-K(以kan为筛选标记敲除了PyrG 基因)为宿主菌,构建kan删除盒(5kan-T-Py...

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【学位级别】：硕士

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通过ＰＣＲ分别扩增出／＞＊Ｇ基因同源左臂、同源右臂；以质粒ｐＲ－ｐｙｒＧ为模板，用引物??ＴＶｐｙｒＧＦ／ＩＶＰｙｒＧＲ?通过?ＰＣＲ?扩增出?ｉ？－／７＿＞ＴＧ（ＴＴｌ－ＰｇｐｄＡ－ｐｙｒＧ－ＴＴ）作为筛选标记，实??验结果如图３－２?Ｂ所示，三个片段大小ＰＣＲ扩增结果与理论大....

本文编号：3962033