宿主ARFGAP1对CSFV复制的影响及与NS5A的互作研究
发布时间:2024-05-14 06:04
猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的猪瘟(Classical swine fever,CSF)是一种多系统、高传染性和具有重要经济意义的疾病,在全球范围内造成巨大的经济损失。探索出经济高效的防控方法在很大程度上取决于对CSFV致病机理的清楚认识。研究发现宿主细胞外被体蛋白Ⅰ(Coatproteincomplex Ⅰ,COP Ⅰ)可参与调控病毒的复制,而且发现COP Ⅰ与CSFV复制有着密切的关系。ADP核糖基化因子GTP酶活化蛋白 1(ADP ribosylation factor GTPase-activating protein 1,ARFGAP1)是 COPⅠ的一个关键调控蛋白,参与COP Ⅰ及网格蛋白包被的囊泡的形成,并且ARFGAP1还在病毒复制过程中发挥作用。CSFVNS5A蛋白是一个与病毒复制密切相关的非结构蛋白,但尚不清楚ARFGAP1是否与NS5A有互作关系。因此,本研究旨在探讨ARFGAP1对CSFV复制的影响及与NS5A的相互作用,获得了以下结果。(1)ARFGAP1正向调控CSFV的复制。用不同浓度ARFGAP1抑制...
【文章页数】:71 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
本文编号:3973291
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图2-3?ARFGAP1基因的PCR扩增??
?第二章ARFGAP1对猪瘟病毒复制的影响???1?M??|2000bp??lOOObp??750bp??500bp??250bp??lOObp??M.?DNA标准DL2000;?1.?ARFGAP1基因的扩増产物;??M.?DNA?Marker?DL2000;?1.?PCR?a....
图2-5?ARFGAPl-CMV载体转染效率的检测??Fig.?2-5?Detection?of?transfection?efficiency?of?ARFGAP1-CMV?vector??
西北农林科技大学硕:士学位论变??ARFGAP1-CMV质粒的细胞M现绿色荧光,说明带绿色荧光标签的ARFGAP1-CMV质??粒在PK-15细胞中成功表达,证明ARFGAP1-CMV载体构建成功。??图2-5?ARFGAPl-CMV载体转染效率的检测??Fig.?2-5?Det....
图2-9ARFGAP1慢病毒干扰细胞系的构建??Fig.?2-9?Construction?of?ARFGAP1?lentivirus?interference?cell?line??
?西北农林科技大学騎士季位谂文:???3个辅助质粒共同转染至293T细胞中进行慢病毒包装,南包装好的ARFGAP1童组慢??病毒感染细胞,观察到细胞开始发荧光时,添加曝呤霉素接连筛选高表达的阳性细胞,??直到细胞有95%左右发绿色荧光(图2-9),说明ARFGAP1慢病毒干扰细胞....
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