人尿液细胞来源的诱导多能干细胞定向分化为毛囊干细胞
发布时间:2024-05-17 22:44
目的观察诱导多能干细胞(iPSCs)定向分化为毛囊干细胞(HFSCs)的潜能。方法通过4个转录因子(OCT4、SOX2、KLF4和c-Myc)重编程健康人尿液细胞为诱导多能干细胞(iPSCs)。通过调控维甲酸(RA)、骨形态发生蛋白4(BMP-4)、表皮细胞生长因子(EGF)信号通路,将iPSCs诱导为毛囊干细胞(HFSCs),并对iPSCs来源的毛囊干细胞(iPS-HFSCs)进行免疫细胞化学分析、RT-qPCR。结果人尿液细胞来源的iPSCs具有胚胎干细胞(ESCs)类似的细胞形态、基因表达。通过调控RA、BMP-4及EGF信号通路,iPSCs定向分化为具有类似毛囊干细胞形态、基因表达和表型的细胞。结论通过4个转录因子,尿液细胞成功重编程为全能性的iPSCs。iPSCs具有毛囊干细胞类似特性,为构建基于iPSCs的组织工程皮肤提供参考。
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【部分图文】:
本文编号:3976080
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图1尿液细胞来源iPSCs鉴定
iPSCs团块悬浮培养1~2d,可见拟胚体形成(图2A),接种到3T3饲养层2d后,可见细胞从拟胚体边缘爬出(图2B)。分化11d,爬出的细胞呈紧密的多角形,与iPSCs具有显著差异(图2C),分化18d细胞呈现表皮干细胞特异性的铺路石形态(图2D)。图2iPSCs分化....
图2iPSCs分化为毛囊干细胞
图1尿液细胞来源iPSCs鉴定免疫荧光检测细胞中毛囊干细胞特异性标记(CD200、ITGA6、KRT15和KRT19)的阳性表达(图3A)。iPSC-HFSCs的RT-qPCR分析显示人毛囊干细胞特异性基因(CD200、KRT15、KRT19和ITGA6)高表达(图3B),而....
图3iPSCs来源毛囊干细胞鉴定
iPSCs的分化受多种生长因子调控,骨形态发生蛋白4(BMP-4)能够诱导多能干细胞上皮分化,并通过Smad信号通路阻断神经分化,BMP-4诱导胚胎干细胞分化为角质细胞[9]。而维甲酸(retinoicacid,RA)和表皮细胞生长因子(epidermalgrowthfac....
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