低氧环境下纤维生长因子2对人牙髓干细胞增殖及分化的影响

发布时间：2024-05-19 06:25

　　目的探究低氧环境下纤维生长因子2对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖及分化的影响。方法收集hDPSCs并对其表面标记进行鉴定后,分别在常氧(21%O₂)和低氧(3%O₂)环境下,加或不加成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)培养,MTT法分别检测各组细胞的增殖能力。对各组细胞进行成骨及成脂诱导培养21 d,观察低氧环境下纤维生长因子2对hDPSCs多向分化能力的影响。结果 MTT结果显示,低氧+FGF2组hDPSCs在第2 d、3 d的增殖活性高于其余三组,低氧组及FGF2组次之,均高于常氧组;成骨诱导结果显示,低氧+FGF2组矿化结节最多,常氧组矿化结节最少;成脂诱导结果显示,低氧+FGF2组形成脂滴最多,常氧组形成脂滴最少。结论低氧环境下使用FGF2预处理培养能够提高hDPSCs的增殖能力表达,并可促进hDPSCs的分化。

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【部分图文】：

图1原代培养hDPSCs形态×100

组织块酶消化法获得的组织培养5～7天后可见部分组织块有游离细胞游出,传代培养后hDPSCs贴壁生长,呈长梭形,形态均一(图1)。2.2hDPSCs表面标记表达情况

图2流式细胞仪分别检测四种细胞表面标记物的总数

流式细胞仪检测细胞表面标记物CD44、CD29、CD45、CD31,结果显示CD44、CD29即间充质干细胞表面标记物呈现高表达,阳性率为98.77%、98.66%;造血干细胞表面标记物CD45和内皮细胞标记物CD31低表达,阳性率分别为0.09%和0.03%(图2)。2.3低....

图3各组hDPSCs成骨矿化情况茜素红染色×100

四组成脂诱导组镜下可见细胞体积增大,细胞内可见大小不一的小泡聚集,油红O染色后,镜下观察到鲜红染色的脂滴,其中低氧+FGF2组形成脂滴最多,常氧组形成脂滴最少(图4)。图4各组hDPSCs成脂诱导情况油红O染色×100

图4各组hDPSCs成脂诱导情况油红O染色×100

图3各组hDPSCs成骨矿化情况茜素红染色×1002.4低氧及FGF2对hDPSCs增殖的影响

本文编号：3977727