上游序列转录复合物（USTC）调控piRNA转录的机制研究

发布时间：2024-06-05 00:37

　　小RNA是重要的基因调控分子。自RNA干扰现象被发现以来,在秀丽隐杆线虫中发现了多种小RNA。其中,piRNAs(Piwi-interacting RNAs)是一种在动物中高度保守的小RNA。在多种动物中,piRNA抑制转座子与非我基因的表达,维持基因组稳定性,是配子形成的重要因素。在秀丽隐杆线虫中,piRNA开启了基因沉默的代际遗传。大多数piRNA前体从基因组上含有上千个独立的piRNA转录单元的两个基因簇中转录。之后,piRNA转录本经过一系列加工过程,并结合到Piwi蛋白上。尽管我们已经知道一些基因参与piRNA的生成过程,但是,piRNA的转录与加工过程并不完全明朗。本文利用遗传学,细胞生物学,分子生物学中的多种技术来研究秀丽隐杆线虫中的piRNA生成机制。首先,我们利用MosSCI技术构建了单拷贝GFP::3xFLAG标记的TOFU(Twenty-One-u Fouled Ups)基因的转基因线虫。我们发现TOFU-1,TOFU-2和TOFU-7定位在生殖腺细胞质中。TOFU-3,TOFU-4和TOFU-5在生殖腺细胞核中与piRNA生成因子PRDE-1蛋白共定位。利用显微...

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【部分图文】：

图1.1线虫的生命周期((Corsietal.,2015)

图注：秀丽隐杆线虫的生命周期。顺时针方向依次为成年线虫，虫卵，Ｌ１时期幼虫，Ｌ２时??期幼虫，Ｌ３时期幼虫，Ｄａｒｅｒ虫，Ｌ４时期幼虫在体式解剖显微镜下的形态。并列的??上下两个上为雌雄同体线虫，下为雄虫。??２??

图１．６在ＲＮＡ干扰遗传中ＷＡＧＯ－４和ＨＲＤＥ－１的不同角色（Ｘｕ?ｅｔ?ａＬ，?２０１８ａ）??图注：ＧＦＰ基因ＲＮＡ干扰的表型

会延续到子代。而／ｊｒ也－／突变体中，ＧＦＰ在Ｆ１代卵中处于沉默状态，在Ｌａｒｖａ丨??幼虫中微量表达。在ｈｙ＾ｏ－４突变体中，ＧＦＰ在Ｆ１代的卵中就开始重新表达（如??图１．６Ａ）。这说明ＨＲＤＥ－丨蛋白可能不参与到ＲＮＡ干扰在Ｆ１代卵和幼虫中的沉??默，而ＷＡＧ０－４蛋白参与....

图１．７秀丽隐杆线虫中ｐｉＲＮＡ与ＰＲＧ?

会延续到子代。而／ｊｒ也－／突变体中，ＧＦＰ在Ｆ１代卵中处于沉默状态，在Ｌａｒｖａ丨??幼虫中微量表达。在ｈｙ＾ｏ－４突变体中，ＧＦＰ在Ｆ１代的卵中就开始重新表达（如??图１．６Ａ）。这说明ＨＲＤＥ－丨蛋白可能不参与到ＲＮＡ干扰在Ｆ１代卵和幼虫中的沉??默，而ＷＡＧ０－４蛋白参与....

图1.8果蝇中的piRNA生成通路((CzechetaL,2018)

－－１．７）?（Ｂｕｃｋｌｅｙ?ｅｔ?ａｌ．，?２０１２；?Ｄａｓ?ｅｔ?ａｌ．，?２００８；?Ｌｅｅ?ｅｔ?ａｌ．，?２０１２；?Ｍａｏ?ｅｔ?ａｌ．，?２０１５；??ＳｈｉｒａｙａｍａｅｔａＬ，?２０１２）。而部分的内源靶标基因与ＣＳＲ－１的部分靶标基因重叠，??ＰＲＧ－１抑....

本文编号：3989398