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丁香精油对单核细胞增生李斯特菌及其生物膜的抑制研究

发布时间:2024-09-17 17:33
  单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,L.monocytogenes)在自然界中广泛分布,被世界卫生组织(WHO)列为四大食源性病源体之一。L.monocytogenes可以粘附在食品加工设备及储存容器上,形成生物膜后污染食品,从而造成严重的食品安全问题。因此,本论文选用了L.monocytogenes作为主要参试菌,深入研究了天然抗菌剂丁香精油(Clove essential oil,CEO)对其游离菌和生物膜的抗菌效果和作用机制。对游离菌的抗菌机制研究包括精油对L.monocytogenes的抗菌活性,对三种胞内大分子物质含量及两种胞内关键酶活性的影响,对呼吸代谢的主要抑制途径以及其主成分丁香酚与DNA间的作用方式。在此基础上,进一步探究了CEO对生物膜的抑制机制,分别测定了CEO对几个生物膜形成关键调控因素的影响,包括细胞早期运动能力、胞外基质(蛋白质、多糖、DNA)分泌以及L.monocytogenes生物膜形成有关基因agr操纵子各基因、毒力调控因子的调控基因prfA和压力应答因子的调控基因sigB的表达量水平。最后将CEO应用于蔬菜和不同容器材料...

【文章页数】:93 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
缩略词
第一章 绪论
    1.1 单核细胞增生李斯特菌的研究进展
        1.1.1 单核增生李斯特菌概述
        1.1.2 单核增生李斯特菌的侵染机制
    1.2 细菌生物膜的研究进展
        1.2.1 生物膜的简介
        1.2.2 生物膜的形成过程
        1.2.3 生物膜与食品安全
    1.3 单核增生李斯特菌生物膜研究进展
        1.3.1 单核增生李斯特菌生物膜简介
        1.3.2 单核增生李斯特菌生物膜形成的调控机制
    1.4 丁香精油及其主成分抗菌机制及抗生物膜机制研究进展
        1.4.1 丁香精油及其主成分的抗菌活性及机制研究进展
        1.4.2 丁香精油及其主成分抗生物膜活性及机制研究进展
        1.4.3 丁香精油在食品行业的应用
    1.5 课题研究背景和立题意义
    1.6 课题主要研究内容
第二章 丁香精油对单核增生李斯特菌的抑制机制研究
    2.1 引言
    2.2 实验材料与仪器
        2.2.1 供试菌株
        2.2.2 实验材料
        2.2.3 实验仪器
        2.2.4 实验主要试剂配制
    2.3 试验方法
        2.3.1 丁香精油对L.monocytogenes的抗菌活性的研究
        2.3.2 丁香精油对L.monocytogenes胞内大分子浓度和含量的影响
        2.3.3 丁香精油对L.monocytogenes胞内酶活的影响
        2.3.4 丁香精油对L.monocytogenes呼吸代谢的影响
        2.3.5 丁香酚与DNA作用方式
        2.3.6 数据处理与分析
    2.4 试验结果
        2.4.1 丁香精油对L.monocytogenes的抑制作用
        2.4.2 丁香精油对L.monocytogenes胞内大分子浓度和含量的影响
        2.4.3 丁香精油对L.monocytogenes胞内酶活的影响
        2.4.4 丁香精油对L.monocytogenes呼吸代谢的影响
        2.4.5 丁香酚与DNA作用方式
    2.5 本章小结
第三章 丁香精油对单核增生李斯特菌生物膜的抑制作用和机制研究
    3.1 引言
    3.2 实验材料与仪器
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 实验仪器
        3.2.3 实验主要试剂配制
    3.3 试验方法
        3.3.1 结晶紫染色法测定L.monocytogenes EDG-e生物膜形成能力
        3.3.2 丁香精油对L.monocytogenes生物膜的MBIC和 MBEC的测定
        3.3.3 丁香精油对L.monocytogenes生物膜的清除作用
        3.3.4 丁香精油对L.monocytogenes微观形态的影响
        3.3.5 丁香精油对L.monocytogenes生物膜膜内细菌新陈代谢的影响
        3.3.6 丁香精油对L.monocytogenes早期运动能力的影响
        3.3.7 丁香精油对L.monocytogenes生物膜胞外聚合物的影响
        3.3.8 丁香精油对L.monocytogenes生物膜调控的分子机制
        3.3.9 数据处理与分析
    3.4 实验结果
        3.4.1 L.monocytogenes EDG-e生物膜形成能力
        3.4.2 丁香精油对L.monocytogenes生物膜的MBIC和 MBEC的测定
        3.4.3 丁香精油对L.monocytogenes生物膜的清除作用
        3.4.4 丁香精油对L.monocytogenes微观形态的影响
        3.4.5 丁香精油对L.monocytogenes生物膜膜内细菌新陈代谢的影响
        3.4.6 丁香精油对L.monocytogenes早期运动能力的影响
        3.4.7 丁香精油对L.monocytogenes生物膜胞外聚合物的影响
        3.4.8 丁香精油对L.monocytogenes生物膜调控的分子机制
    3.5 本章小结
第四章 丁香精油在食品容器以及蔬菜表面的应用
    4.1 引言
    4.2 实验材料与仪器
        4.2.1 实验材料
        4.2.2 实验仪器
        4.2.3 实验主要试剂配制
    4.3 试验方法
        4.3.1 丁香精油对不同食品容器材料表面生物膜的清除作用
        4.3.2 丁香精油对蔬菜表面L.monocytogenes生物膜的清除作用
        4.3.3 色度分析及感官评定
        4.3.4 数据处理与分析
    4.4 结果与讨论
        4.4.1 丁香精油对不同食品容器材料表面生物膜的清除作用
        4.4.2 丁香精油对黄瓜和生菜表面L.monocytogenes生物膜的清除作用
        4.4.3 色度分析及感官评价
    4.5 本章小结
第五章 结论与展望
    5.1 主要结论
    5.2 展望
参考文献
致谢
在读学位期间发表论文及专利情况



本文编号:4005797

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