PIP5K1γ的SUMO化修饰对角质形成细胞功能的调控

发布时间:2021-01-20 05:06
  目的探索PIP5K1γ及其SUMO化修饰与角质形成细胞功能的关系。方法及内容第一部分:PIP5K1γ能够特异的发生SUMO化修饰:在HEK293T细胞中分别转染HA-PIP5K1α、HA-PIP5K1β、HA-PIP5K1γ质粒以及FLAG-UBC9,通过免疫共沉淀及蛋白免疫印迹检测发现何种类型的PIP5K可以与UBC9结合;在HEK293T细胞中过表达HA-PIP5K1γ、FLAG-SUMO1和Myc-UBC9,通过免疫共沉淀和蛋白免疫印迹方法检测PIP5K1γ的是否确实发生SUMO化修饰;在HEK293T细胞中过表达HA-PIP5K1γ、FLAG-SUMO1、RGS-HIS-SENP1和RGS-HIS-SENP1mutant,通过免疫共沉淀和蛋白免疫印迹法检测进一步确定PIP5K1γ的SUMO化修饰的作用。在大肠杆菌中过表达GST-PIP5K1γ和pE1E2S1,共培养后裂解细菌提取蛋白,通过免疫共沉淀和蛋白免疫印迹法检测PIP5K1γ的SUMO化修饰;同时,内源性PIP5K1γ的SUMO化修饰则在角质形成细胞HaCat中免疫沉淀内源性PIP5K1γ后经蛋白免疫印迹法和SUMO1抗... 

【文章来源】:蚌埠医学院安徽省

【文章页数】:45 页

【学位级别】:硕士

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中文摘要
Abstract
英文缩写表
引言
第一部分 关于PIP5K1γ的SUMO化修饰的研究
    1. 材料与方法
    2. 结果
    3. 小结
第二部分PIP5K1γ的SUMOylation修饰位点的探索以及PIP5K1γ在角质细胞功能中的作用研究
    1. 材料与方法
    2. 结果
    3. 小结
第三部分PIP5K1γ的SUMOylation对角质细胞功能的作用研究及其作用机制研究
    1. 材料与方法
    2. 结果
    3. 小结
讨论
结论
参考文献
致谢



本文编号:2988436

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