鼠衣原体TC0668突变株在小鼠生殖道感染模型中免疫原性和免疫保护作用的初步研究
发布时间：2021-08-04 04:40
背景:衣原体（Chlamydia）是一类严格胞内寄生的原核细胞型微生物,可对人和动物均致病。衣原体感染人类结膜、呼吸道、生殖道可以引起结膜炎、呼吸道和生殖道感染等多种疾病。沙眼衣原体（C.trachomatis,Ct）作为众多国家与地区性传播感染（sexually transmitted infection,STI）的主要病原体之一,其感染人类不仅可引起沙眼与包涵体结膜炎,还能引起生殖道感染等疾病。鼠衣原体（C.muridarum,Cm）因与Ct种系关系较接近,常用于建立Ct感染女性生殖道的小鼠模型。Cm TC0668是一种染色体毒力蛋白,与Cm感染引起的小鼠输卵管炎性病变有关。将TC0668野生型单克隆菌株(Cm TC0668wt)与TC0668突变型单克隆菌株(Cm TC0668mut)平行接种小鼠建立生殖道感染模型,与Cm TC0668wt菌株比较,Cm TC0668mut菌株感染小鼠生殖道致病率明显降低,但Cm TC0668mut菌株作为减毒活疫苗在预防衣原体感染性输卵...
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：111 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
IFA检测衣原体感染HeLa细胞后形成的包涵体数目
25图2小鼠免疫时间流程图Fig.2Thetimelineofimmunizationandallexperimentsviatheterminaltimepointonday125.4.2.2小鼠免疫后下生殖道衣原体载量检测小鼠阴道免疫后每隔3天或7天收集阴道分泌物，通过IFA检测阴道分泌物中的衣原体载量来检测衣原体在下生殖道的清除情况。结果显示：各组小鼠阴道拭子中衣原体检出率相似，不同时间点各组小鼠带菌阳性率也相似（阴性对照SPG组除外）。在免疫后3天，各组小鼠阴道带菌量均较高，并且在免疫后第3~7天，各组小鼠阴道中衣原体载量相比较于免疫后第3天所检测的载量均有所上升或保持第3天衣原体载量相似水平，未出现衣原体清零情况；在免疫7天后，各组小鼠阴道拭子中衣原体的检出率呈现逐渐下降的趋势，并且在免疫后第28天小鼠阴道拭子中衣原体完全清除，阴性对照组阴道拭子中在不同时间点均无衣原体检出（图3A）。图3B为免疫后不同时间点每组小鼠阴道拭子中衣原体未完全清除的小鼠所占各组小鼠总数的百分比（即每组小鼠带菌阳性率）。在免疫后第3~7天，各组小鼠带菌阳性率均为100%（阴性对照SPG组除外）；在免疫后第3~7天，各组小鼠带菌阳性率均逐渐下降，且CmPF组和G28.51.1菌株组小鼠其带菌阳性率于免疫后第21天降为0，CmNiggⅡ菌株组和G13.11.1菌株组小鼠带菌阳性率于免疫后第28天降为0，阴性对照组带菌阳性率一直为0。
26图3BALB/c小鼠感染衣原体后下生殖道衣原体载量Fig.3SheddingoflivechlamydialorganismfromlowergenitaltractofBALB/cmiceafterinfectionwithChlamydia.A.TheliveorganismsrecoveredfromeachswabareexpressedasLog10IFUalongtheyaxis.B.Thepercentageofmiceremainingpositiveforsheddingoflivechlamydialorganismateachtimepointwasplottedalongtheyaxis.4.2.3小鼠免疫后诱导体液免疫应答水平4.2.3.1小鼠免疫后血清特异性IgG和IgA抗体水平衣原体菌株通过阴道免疫小鼠后，收集免疫后28天（4周）和56天（8周）的小鼠尾静脉血，间接ELISA法检测免疫后小鼠血清中特异性IgG和IgA抗体水平。通过阶段性的检测小鼠血清特异性抗体应答水平，发现各实验组血清特异性IgG抗体水平随着免疫时间的延长呈现逐渐升高的趋势且均在第8周达到峰值（阴性对照SPG组无变化），免疫后第4周和第8周Cm（NiggⅡ）组、G28.51.1（TC0668mut）组、G13.11.1（TC0668mut）组以及PF组的IgG抗体水平均逐渐升高且明显高于阴性对照SPG组，并具有统计学意义（P<0.05），结果如图4A所示。图4B为小鼠血清IgA抗体应答水平，发现随着时间的延长，免疫后第4周和第8周各组小鼠血清IgA抗体应答水平均无显著变化（P>0.05）。
本文编号：3321023
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：111 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
IFA检测衣原体感染HeLa细胞后形成的包涵体数目
25图2小鼠免疫时间流程图Fig.2Thetimelineofimmunizationandallexperimentsviatheterminaltimepointonday125.4.2.2小鼠免疫后下生殖道衣原体载量检测小鼠阴道免疫后每隔3天或7天收集阴道分泌物，通过IFA检测阴道分泌物中的衣原体载量来检测衣原体在下生殖道的清除情况。结果显示：各组小鼠阴道拭子中衣原体检出率相似，不同时间点各组小鼠带菌阳性率也相似（阴性对照SPG组除外）。在免疫后3天，各组小鼠阴道带菌量均较高，并且在免疫后第3~7天，各组小鼠阴道中衣原体载量相比较于免疫后第3天所检测的载量均有所上升或保持第3天衣原体载量相似水平，未出现衣原体清零情况；在免疫7天后，各组小鼠阴道拭子中衣原体的检出率呈现逐渐下降的趋势，并且在免疫后第28天小鼠阴道拭子中衣原体完全清除，阴性对照组阴道拭子中在不同时间点均无衣原体检出（图3A）。图3B为免疫后不同时间点每组小鼠阴道拭子中衣原体未完全清除的小鼠所占各组小鼠总数的百分比（即每组小鼠带菌阳性率）。在免疫后第3~7天，各组小鼠带菌阳性率均为100%（阴性对照SPG组除外）；在免疫后第3~7天，各组小鼠带菌阳性率均逐渐下降，且CmPF组和G28.51.1菌株组小鼠其带菌阳性率于免疫后第21天降为0，CmNiggⅡ菌株组和G13.11.1菌株组小鼠带菌阳性率于免疫后第28天降为0，阴性对照组带菌阳性率一直为0。
26图3BALB/c小鼠感染衣原体后下生殖道衣原体载量Fig.3SheddingoflivechlamydialorganismfromlowergenitaltractofBALB/cmiceafterinfectionwithChlamydia.A.TheliveorganismsrecoveredfromeachswabareexpressedasLog10IFUalongtheyaxis.B.Thepercentageofmiceremainingpositiveforsheddingoflivechlamydialorganismateachtimepointwasplottedalongtheyaxis.4.2.3小鼠免疫后诱导体液免疫应答水平4.2.3.1小鼠免疫后血清特异性IgG和IgA抗体水平衣原体菌株通过阴道免疫小鼠后，收集免疫后28天（4周）和56天（8周）的小鼠尾静脉血，间接ELISA法检测免疫后小鼠血清中特异性IgG和IgA抗体水平。通过阶段性的检测小鼠血清特异性抗体应答水平，发现各实验组血清特异性IgG抗体水平随着免疫时间的延长呈现逐渐升高的趋势且均在第8周达到峰值（阴性对照SPG组无变化），免疫后第4周和第8周Cm（NiggⅡ）组、G28.51.1（TC0668mut）组、G13.11.1（TC0668mut）组以及PF组的IgG抗体水平均逐渐升高且明显高于阴性对照SPG组，并具有统计学意义（P<0.05），结果如图4A所示。图4B为小鼠血清IgA抗体应答水平，发现随着时间的延长，免疫后第4周和第8周各组小鼠血清IgA抗体应答水平均无显著变化（P>0.05）。
本文编号：3321023
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/benkebiyelunwen/3321023.html
