金黄色葡萄球菌α-溶血素对NLRP3炎性小体的诱导及EGCG的干预机制

发布时间：2021-08-23 15:12

　　由细菌污染引起的食源性疾病是影响人类健康和食品安全的最大问题之一。为避免食源性致病菌引起的食品安全问题,在食品制造过程中添加防腐剂以抑制致病菌生长。而人工合成的化学防腐剂在实际应用中很可能因不恰当使用对人体健康产生危害。因此,寻找绿色,安全的天然防腐抗菌剂来抑制食品中的微生物污染对保障公共食品安全具有重要意义。表没食子儿茶素没食子酸酯（Epigallocatechin gallate,EGCG）是绿茶中含量最多的多酚物质,具有抗氧化,抗癌,抗炎症等多种生物活性,而且对多种微生物具有抑制作用,是一种潜在的天然防腐抗菌剂。金黄色葡萄球菌（金葡菌）是一种常见的食源性致病菌,在世界范围内引起极高发生频率的食物中毒事件。α-溶血素（α-hemolysin,Hla）是金葡菌hla基因编码的胞外成孔毒素,能诱导宿主的炎症反应,在金葡菌感染中发挥重要作用。目前尚无研究报道EGCG对金葡菌Hla诱导炎症反应的影响。因此本文旨在探讨EGCG对金葡菌Hla诱导的NLRP3蛋白复合体激活的抑制作用,从蛋白水平揭示其分子机制。在体外实验中,通过药敏实验证明EGCG对金葡菌具有良好的抑制作用,测得EGCG对金葡菌... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

EGCG化学结构

技术路线图

吉林大学硕士学位论文22度达到64μg/mL时，纸片周围细菌生长在一定程度上被抑制，因此在纸片周围出现了抑菌圈。随着EGCG浓度提高，抑菌圈逐渐扩大。当EGCG浓度达到256μg/mL时，滤纸片周围的抑菌圈直径达到11mm，说明EGCG对金葡菌的抑菌圈大小与EGCG浓度呈剂量依赖性关系，表明EGCG对金葡菌的抑制呈明显的剂量依赖性。图2.1EGCG对金葡菌8325-4琼脂扩散实验Fig.2.1AgardiskdiffusionassayforEGCGagainstS.aureus8325-4.2.3.3EGCG对金黄色葡萄球菌生长曲线测定通过测定在EGCG作用下，金葡菌培养不同时间后的菌液OD600，绘制EGCG对金葡菌8325-4与DU1090在MH培养基中的生长曲线，如图2.2所示。在空白对照组（PBS处理）中，金葡菌8325-4菌株在不含EGCG的培养基中呈现正常的生长情况。在实验药物组中，不同浓度EGCG处理使金葡菌生长情况受到不同程度的影响。当EGCG在16-32μg/mL浓度范围内时，OD600值变化与对照组情况无明显差异，培养24h后，菌液的OD600值可达到2.5左右，呈现正常的生长情况。当EGCG浓度提高到64μg/mL时，在生长过程中OD600值呈现缓慢的增长速率，在24h后菌液的OD600值达到1.33±0.11，与空白对照组相比，8325-4菌株生长受到明显抑制，生长速率受EGCG影响减慢。当EGCG浓度达到128μg/mL即MIC值时，OD600值在24h内无明显变化，说明金葡菌8325-4的生长被完全抑制。在相同EGCG处理条件下，DU1090菌株显示出与8325-4类似的生长情况，说明EGCG对金葡菌8325-4与DU1090菌株的生长均具有呈明显剂量依赖性的抑制作用。

【参考文献】：
硕士论文
[1]舍曲林对金黄色葡萄球菌多重耐药逆转以及毒力抑制作用的研究[D]. 谢胜海.华南理工大学 2019
[2]食品中金黄色葡萄球菌快速检测测试片基质的开发[D]. 侯典朋.黑龙江东方学院 2018
[3]盐酸小檗碱抑制金黄色葡萄球菌α-溶血素及其诱导的氧化损伤[D]. 车美垚.吉林大学 2018



本文编号：3358103