钝刺血蜱防御素基因的克

发布时间：2025-02-07 12:13

　　钝刺血蜱(Haemaphysalis doenitzi)主要分布于中国的福建、云南、台湾等地,多寄生在鸟类和小型哺乳动物体表上,能携带巴贝斯虫等多种病原体,对野生动物和人类造成严重危害。防御素(defensin)具有抵抗外来病原体的生物活性,在蜱类先天免疫系统中发挥重要作用。本研究以钝刺血蜱为研究对象,通过基因克隆得到5条防御素基因序列,对其进行生物信息学分析(蛋白序列、同源性、理化性质以及三维结构),并对原核表达的重组蛋白进行功能研究(抑菌活性、抗氧化活性、溶血活性)。将5条基因分别命名为Hd-defensin-1、Hd-defensin-2、Hd-defensin-3、Hd-defensin-4、Hd-defensin-5,其开放阅读框分别为246bp、225bp、225bp、210bp和225bp;编码氨基酸个数为88、74、74、69和74;成熟肽长度为48、38、38、38和38;等电点大小为7.47、8.73、11.51、7.47和9.65。与NCBI中的不同蜱源防御素进行比对,同源性均达到60%以上,其中Hd-defensin-1和Hd-defensin-2与长角血蜱的防御...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2.3不同蜂种与Hddefsnxin-I-S防御素蛋白序列对比

132.2.2.3理化参数的分析根据扩增到的基因全长对其进行信号肽的预测（见图2.4）及理化性质分析（见表），包括以下几个方面：开放阅读框大小、氨基酸个数、信号肽氨基酸个数、成熟肽酸个数以及成熟肽的等电点。结果表明5条基因等电点均高于7，属于阳离子肽。Hd-defen....

图2.5蛋白模型预测

抵抗外来微生物具有免疫特性的小分子多肽，最pia)，之后从细菌到哺乳动物都有发现。防御素是，蜱源防御素首次由JohnsR等在变异革蜱的血。目前收录在NCBI的蜱类防御素主要为硬蜱科的硬蜱属、革蜱属、花蜱属、钝缘蜱属和璃眼蜱属御素基因，其它血蜱均未报道。有关钝刺血蜱的对防....

图3₁PE}SY-TI-d}ffensin-3;5酶切电泳图

24图3.2Defensin-pET-32(a+）转入BL21中菌液PCR电泳图M：DNA分子量标准S1、S2：目的基因Fig.3.2Electeophoretogramofdefensin-pET-32(a+）plasmidintoBL21byP....

图3.2Defensin-pET-32(a+）转入BL21中菌液PCR电泳图

24图3.2Defensin-pET-32(a+）转入BL21中菌液PCR电泳图M：DNA分子量标准S1、S2：目的基因Fig.3.2Electeophoretogramofdefensin-pET-32(a+）plasmidintoBL21byP....

本文编号：4030855