LncRNA ANCR通过上调HNRNPA1表达促进肝细胞癌转移的机制研究

发布时间：2021-03-27 15:55

　　目的:既往研究显示,长链非编码RNA ANCR在上皮间充质转化EMT和肿瘤转移中起作用。然而,ANCR在调节肝细胞癌HCC转移中的作用尚不清楚。为此,本研究拟探讨肝癌转移中ANCR的调控作用以及促癌的潜在机制。方法:采用MTT法和Transwell法检测肝癌细胞增殖和迁移/侵袭能力。建立异种移植模型,观察ANCR对肝癌生长和转移的影响。采用芯片法检测ANCR启动子区域H3和H4组蛋白乙酰化水平。用RNA下拉和RIP分析ANCR与异质性核糖核蛋白A1 HNRNPA1的关系。通过双荧光素酶报告基因分析确定了ANCR与miR-140-3p之间的相互作用。结果:ANCR在肝癌组织和细胞中高表达,且能促进了肝癌细胞的增殖和迁移、侵袭。体内实验表明,干扰ANCR可抑制肝癌的生长和转移。在肝癌组织和细胞中,ANCR启动子区域的H3/H4组蛋白乙酰化水平升高,干扰组蛋白去乙酰化酶3 HDAC3可显著上调ANCR的表达。ANCR可与HNRNPA1结合,通过调节HNRNPA1的降解促进HNRNPA1的表达。此外,ANCR通过海绵miR-140-3p上调HNRNPA1的表达。最后,我们发现ANCR通过调节H... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

LncRNAANCR在肝细胞癌(HCC)组织和细胞中上调A.采用qRT-PCR方法检测肝癌组织和配对的正常组织中ANCR的表达

结果213.3体内干扰ANCR抑制肝癌细胞增殖和转移由于在HepG2和Huh7细胞中干扰ANCR抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭，因此我们在体内干扰ANCR，观察ANCR对肝癌细胞增殖和转移的影响。将Lenti-si-ANCR或Lenti-GFP转染HepG2细胞，然后将慢病毒感染的HepG2细胞皮下注射到5周龄雌性裸鼠的右侧背部。28天后处死小鼠，收集肿瘤。如图3A所示，Lenti-si-ANCR组的肿瘤体积和瘤重明显小于Lenti-GFP组(p<0.01)，表明干扰ANCR抑制了HCC的增殖。然后，将慢病毒感染的HepG2细胞经尾静脉注射到小鼠体内，计数肺结节数，以明确si-ANCR的抗转移能力。我们发现，与Lenti-GFP组相比，Lenti-si-ANCR组的肺转移结节数明显减少(p<0.01)，并且H&E染色显示结节中的肿瘤细胞较少(图3B)，这表明干扰ANCR抑制了HCC的肺转移，并且与Lenti-GFP组相比，Lenti-si-ANCR组的肺转移结节数明显减少(p<0.01)，并且H&E染色显示Lenti-si-ANCR组结节内肿瘤细胞较少。与Lenti-GFP组相比，Lenti-si-ANCR组肝癌组织中ANCR的表达明显下调(图3C，p<0.01)，提示抑制HCC的增殖和转移与下调ANCR有关。

体内干扰LncRNAAN


本文编号：3103781