仿野生金钗石斛物质基础积累与环境因素相关性研究
发布时间：2021-04-07 21:49
目的:通过对不同生长环境对金钗石斛化学成分的影响进行分析,首先考察环境因素对金钗石斛国家药典质量控制指标的影响规律,然后通过高通量次生代谢产物组学研究,考察环境因素对金钗石斛广谱物质基础的影响规律,发现对次生代谢产物合成的关键性影响因素,挖掘出优势化学成分,并结合网络药理学方法对其可能影响的药效进行预判,为金钗石斛质量标准从分析导向提升至药效导向奠定基础。方法:1.不同环境因素下石斛样本的采集:依据产地、海拔、光照因素的不同,分别收集金钗石斛样本。对采集的新鲜金钗石斛样本的茎,进行分离、切段、烘干、称重、粉碎成粉末状,过三号筛。2.金钗石斛国家药典质控指标的测定:按2015版《中国药典》方法,采用0.05%甲酸-甲醇溶液回流提取,利用气相色谱（GC）测定样本中石斛碱的含量,萘为内标,火焰离子化检测仪（FID）为检测器,筛选影响金钗石斛中石斛碱含量的主要环境因素。3.金钗石斛中小分子次生代谢产物组学分析:采用超高效液相色谱四极杆时间飞行质谱联用仪（UPLC-Q/TOF-MS）对金钗石斛的次生代谢产物谱进行高通量检测,并结合文献报道及数据库信息进行结构推定,初步推测优势化学成分的结构。4....
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
金钗石斛样本采集情况
遵义医科大学硕士生毕业论文陆安静17取空白溶剂（甲醇）、内标溶液、对照品溶液、石斛碱内标混合对照品溶液及供试品溶液，按1.4.2项下色谱条件测定，结果如图2。由图可知，石斛碱与萘在此检测条件下互不干扰，供试品溶液中石斛碱保留时间与对照品溶液一致，且无背景干扰，与相邻峰分离度大于1.5，表明该方法专属性良好。图2专属性考察结果Fig.2Theresultofspecificityexamination（A）空白溶剂；（B）内标溶液；（C）对照品溶液；（D）石斛碱内标混合对照品溶液；（E）供试品溶液.1.萘；2.石斛碱(A)Blanksolution;(B)Internalstandardsolution;(C)Referencesolution;(D)mixedreferencesolutionofdendrobineandinternalstandard;(E)Samplesolution1.Naphthalene;2.Dendrobine2.2.2线性范围考察结果如图3所示，以浓度（X）为横坐标，峰面积比值（对照品峰面积/内标物峰面积，Y）为纵坐标进行线性回归，绘制标准曲线，标准曲线方程为Y=0.1448X-0.0137（r=0.9997），线性关系良好，表明石斛碱在0.30~50.00μg·mL-1浓度范围内具有良好的线性关系。
遵义医科大学硕士生毕业论文陆安静18图3线性范围考察结果Fig.3Theresultoflinearrangeinvestigation2.2.3精密度考察结果按1.4.2项下方法制备对照品溶液，并连续进样6次，计算RSD值。结果见表5，RSD为0.48%，表明精密度良好。表5精密度考察结果Table.5TheresultofprecisioninvestigationIDArAsAr/As均值（%）RSD(%）1137.669140.72573.38043.380.482136.942040.91943.34663137.556940.74633.37594139.769741.20073.39245138.133640.77143.38806138.284340.96953.3753注：Ar：石斛碱内标混合对照品溶液中石斛碱峰面积；As：石斛碱内标混合对照品溶液中萘峰面积；Ar/As：石斛碱内标混合对照品溶液中石斛碱峰面积与萘峰面积的比值2.2.4重复性考察结果按1.4.2项下方法，平行制备6份供试品溶液，测定石斛碱含量，结果见表6。供试品溶液中石斛碱含量平均值为0.36%，RSD为1.50%，表明该方法重复性良好。
【参考文献】：
期刊论文
[1]金钗石斛破壁粉对裸鼠人肝癌细胞HepG2移植瘤生长的抑制作用[J]. 贺凯,张丹,李小芳,刘睿涵,黄健麟,刘明华. 中国药学杂志. 2019(22)
[2]金钗石斛倍半萜类成分研究进展[J]. 王晓雅,蒙春旺,周勤梅. 天然产物研究与开发. 2019(10)
[3]金钗石斛总生物碱对糖尿病合并非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗的影响[J]. 黄琦,廖鑫,吴芹,王攀,石京山. 中国比较医学杂志. 2019(08)
[4]石斛属植物生物碱成分研究进展[J]. 李振坚,王元成,韩彬,杨业波,王振,孙振元. 中草药. 2019(13)
[5]金钗石斛中联苄基衍生物化学成分研究[J]. 张茂生,令狐浪,张建永,聂绪强,李晓飞,郭大乐,肖世基. 有机化学. 2019(11)
[6]金钗石斛总生物碱抗慢性应激诱导的大鼠焦虑作用及机制[J]. 熊庭旺,吴芹,刘波,徐云燕,王丽娜,张成宸,张玮,石京山. 中国药理学与毒理学杂志. 2019(06)
[7]金钗石斛总生物碱抗秀丽隐杆线虫衰老作用及其机制[J]. 刘静,吴芹,刘波,徐云燕,张成宸,张玮,王丽娜,石京山. 中国药理学与毒理学杂志. 2019(06)
[8]金钗石斛生物碱对四氯化碳诱导急性肝损伤小鼠的作用[J]. 李世月,杨媛,周金鑫,黄波,周少玉,唐琦,石京山,吴芹. 中国新药与临床杂志. 2019(04)
[9]细茎石斛花朵挥发性成分分析[J]. 仇硕,郑文俊,夏科,唐凤鸾,赵健,丁莉,赵志国. 广西植物. 2019(11)
[10]不同地区金钗石斛的石斛碱含量测定及分析[J]. 徐晓林,丁刚,李标. 时珍国医国药. 2019(02)
本文编号：3124246
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
金钗石斛样本采集情况
遵义医科大学硕士生毕业论文陆安静17取空白溶剂（甲醇）、内标溶液、对照品溶液、石斛碱内标混合对照品溶液及供试品溶液，按1.4.2项下色谱条件测定，结果如图2。由图可知，石斛碱与萘在此检测条件下互不干扰，供试品溶液中石斛碱保留时间与对照品溶液一致，且无背景干扰，与相邻峰分离度大于1.5，表明该方法专属性良好。图2专属性考察结果Fig.2Theresultofspecificityexamination（A）空白溶剂；（B）内标溶液；（C）对照品溶液；（D）石斛碱内标混合对照品溶液；（E）供试品溶液.1.萘；2.石斛碱(A)Blanksolution;(B)Internalstandardsolution;(C)Referencesolution;(D)mixedreferencesolutionofdendrobineandinternalstandard;(E)Samplesolution1.Naphthalene;2.Dendrobine2.2.2线性范围考察结果如图3所示，以浓度（X）为横坐标，峰面积比值（对照品峰面积/内标物峰面积，Y）为纵坐标进行线性回归，绘制标准曲线，标准曲线方程为Y=0.1448X-0.0137（r=0.9997），线性关系良好，表明石斛碱在0.30~50.00μg·mL-1浓度范围内具有良好的线性关系。
遵义医科大学硕士生毕业论文陆安静18图3线性范围考察结果Fig.3Theresultoflinearrangeinvestigation2.2.3精密度考察结果按1.4.2项下方法制备对照品溶液，并连续进样6次，计算RSD值。结果见表5，RSD为0.48%，表明精密度良好。表5精密度考察结果Table.5TheresultofprecisioninvestigationIDArAsAr/As均值（%）RSD(%）1137.669140.72573.38043.380.482136.942040.91943.34663137.556940.74633.37594139.769741.20073.39245138.133640.77143.38806138.284340.96953.3753注：Ar：石斛碱内标混合对照品溶液中石斛碱峰面积；As：石斛碱内标混合对照品溶液中萘峰面积；Ar/As：石斛碱内标混合对照品溶液中石斛碱峰面积与萘峰面积的比值2.2.4重复性考察结果按1.4.2项下方法，平行制备6份供试品溶液，测定石斛碱含量，结果见表6。供试品溶液中石斛碱含量平均值为0.36%，RSD为1.50%，表明该方法重复性良好。
【参考文献】：
期刊论文
[1]金钗石斛破壁粉对裸鼠人肝癌细胞HepG2移植瘤生长的抑制作用[J]. 贺凯,张丹,李小芳,刘睿涵,黄健麟,刘明华. 中国药学杂志. 2019(22)
[2]金钗石斛倍半萜类成分研究进展[J]. 王晓雅,蒙春旺,周勤梅. 天然产物研究与开发. 2019(10)
[3]金钗石斛总生物碱对糖尿病合并非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗的影响[J]. 黄琦,廖鑫,吴芹,王攀,石京山. 中国比较医学杂志. 2019(08)
[4]石斛属植物生物碱成分研究进展[J]. 李振坚,王元成,韩彬,杨业波,王振,孙振元. 中草药. 2019(13)
[5]金钗石斛中联苄基衍生物化学成分研究[J]. 张茂生,令狐浪,张建永,聂绪强,李晓飞,郭大乐,肖世基. 有机化学. 2019(11)
[6]金钗石斛总生物碱抗慢性应激诱导的大鼠焦虑作用及机制[J]. 熊庭旺,吴芹,刘波,徐云燕,王丽娜,张成宸,张玮,石京山. 中国药理学与毒理学杂志. 2019(06)
[7]金钗石斛总生物碱抗秀丽隐杆线虫衰老作用及其机制[J]. 刘静,吴芹,刘波,徐云燕,张成宸,张玮,王丽娜,石京山. 中国药理学与毒理学杂志. 2019(06)
[8]金钗石斛生物碱对四氯化碳诱导急性肝损伤小鼠的作用[J]. 李世月,杨媛,周金鑫,黄波,周少玉,唐琦,石京山,吴芹. 中国新药与临床杂志. 2019(04)
[9]细茎石斛花朵挥发性成分分析[J]. 仇硕,郑文俊,夏科,唐凤鸾,赵健,丁莉,赵志国. 广西植物. 2019(11)
[10]不同地区金钗石斛的石斛碱含量测定及分析[J]. 徐晓林,丁刚,李标. 时珍国医国药. 2019(02)
本文编号：3124246
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