CPZ诱导的脱髓鞘小鼠模型中胶质细胞反应和免疫反应的时空动态变化研究

发布时间：2021-04-12 14:37

　　目的:本课题应用双环己酮草酰二腙（Cuprizone,CPZ）诱导C57BL/6小鼠,建立不同时间的中枢神经系统（Central nervous system,CNS）脱髓鞘模型。观察不同CPZ喂食时间小鼠的髓鞘脱失情况、免疫反应及胶质细胞反应的时空变化。试图找到理想的药物干预靶点,为髓鞘再生和脱髓鞘疾病的神经保护提供理论和实验依据。方法:本实验采用8周龄C57BL/6雄性小鼠,建立CPZ喂食诱导的小鼠脱髓鞘模型。小鼠分为对照组、2周组、4周组、6周组,每组8只小鼠。正常组常规啮齿动物标准饲料,连续饲喂6周;2周组常规啮齿动物标准饲料先饲喂4周,然后继续饲喂含0.2%（w/w）CPZ的混合饲料2周;4周组常规啮齿动物标准饲料先饲喂2周,然后继续饲喂含0.2%（w/w）CPZ的混合饲料4周;6周组含0.2%（w/w）CPZ的混合饲料,连续饲喂6周。并从造模开始记录动物的体重。在第六周结束时处死动物,取脾脏、脑组织,分离脾脏单个核细胞（Mononuclear cells,MNCs）,将脑组织分为提取蛋白质和固定两部分。进行Luxol Fast Blue染色、Black Gold II染色、... 

【文章来源】：山西中医药大学山西省

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【图文】：

CPZ喂养引起髓鞘脱失的病理变化

CPZ喂养诱导的BBB损伤

CPZ诱导的脱髓鞘小鼠模型中胶质细胞反应和免疫反应的时空动态变化研究14图3CPZ喂养诱导中枢T细胞浸润及其活化状态（a）免疫荧光染色显示CD4+T细胞在大脑中的表达。（b）用Image-ProPlus6.0定量评估CD4+T细胞的数量。（c）免疫荧光双重染色显示CD4+T细胞的状态。（d）用Image-ProPlus6.0定量评估IL17+CD4+和IFN-γ+CD4+T细胞的数量。（e）Elisa法检测脑提取液中IL-17和IFN-γ的水平。（f）实验观察部位的小鼠大脑位置图。每组从3只动物获得数据，采用Tukey-Kramer单因素方差分析，结果用均数±标准误（mean±SEM）表示（*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，#p<0.05）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]小胶质细胞在中枢神经系统的生理功能[J]. 王蕾,张毅.  临床急诊杂志. 2018(07)
[2]多发性硬化中医研究进展[J]. 詹宇婷,汪美霞,杨文明.  中医药临床杂志. 2017(12)
[3]全反式维甲酸对小鼠神经系统作用的一般药理试验研究[J]. 蒋鹏,林春琴,袁晨星,丁玲.  中国现代应用药学. 2016(10)
[4]小胶质细胞极化在中枢神经系统髓鞘再生中的作用研究进展[J]. 王小蕊,孙豪,蔡其燕,肖岚.  生理科学进展. 2016(05)
[5]Olig2在cuprizone介导的脱髓鞘动物模型中的表达变化[J]. 陈丽萍,张静,马顺利,李振飞,张金丽,董梅,单明月,郭力.  中国实验动物学报. 2014(02)
[6]少突胶质细胞前体细胞在双环己酮草酰二腙诱导的脱髓鞘模型中的变化特点[J]. 黄嘉璐,穆建坤,孟召友,周振华,陈康宁.  第三军医大学学报. 2013(12)
[7]他克莫司对EAE鼠血清IL-12和IFN-γ的影响及其与髓鞘碱性蛋白相关性的研究[J]. 赵丽波,张健莉,付宏娟,黄月萍.  中国医药导报. 2013(02)

硕士论文
[1]多发性硬化的中医理论文献研究[D]. 张法英.中国中医科学院 2015



本文编号：3133469