富含血小板血浆(PRP)修复低氧环境下兔跟腱病的实验研究
发布时间:2021-04-28 15:20
研究背景肌腱病(tendinopathy)不仅是一种职业病,也是最常见的运动损伤性疾病,发病率高,是目前足踝外科、运动医学、康复医学等学科常见的伤病之一,严重影响了人们的日常工作与生活。目前的治疗方式主要是保守治疗和手术治疗,保守治疗的方法包括局部制动休息、减负训练、口服甾体类抗炎药、物理治疗,中医疗法、干细胞疗法等;对于保守治疗无效、临床症状持续加重的患者,可予以外科手术治疗。这些保守治疗方式在治疗过程中发生的不良反应多,治疗效果较差。肌腱病的发病机制目前为止还没有一个明确的定论,肌腱的过度拉伸使用和肌腱干细胞的异常分化是肌腱病比较公认的发生机制。富血小板血浆(Platelet-rich plasma,PRP)局部注射能够有效地促进跟腱组织损伤的修复。但临床上PRP应用不存在明确的定义,因而不同的患者、不同的医师操作会产生不同的效果,甚至出现截然相反的结果,因此完善PRP的临床使用规范是我们迫切需要解决的科学问题。本课题提出了三点假设:第一,在常氧和低氧的条件下,PRP能促进TSCs成腱分化;第二,PRP对兔跟腱病的修复效果具有浓度相关性;第三,PRP对兔跟腱病的修复效果与注射部位(...
【文章来源】:甘肃中医药大学甘肃省
【文章页数】:94 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
英文缩写表
前言
第一部分 兔肌腱干细胞的分离、提取与鉴定
前言
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器与实验设备
1.4 主要溶液的配制
2 实验方法
2.1 兔肌腱干细胞的分离与原代培养
2.2 肌腱干细胞的鉴定
3 结果
3.1 肌腱干细胞的形态学观察
3.2 克隆平板实验结果分析
3.3 流式细胞技术表型鉴定结果分析
3.4 肌腱干细胞多项分化能力鉴定结果分析
3.5 免疫荧光鉴定结果分析
4 讨论
5 小结
第二部分 PRP在低氧环境下诱导TSCs成腱细胞分化的研究
前言
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器与实验设备
1.4 主要溶液的配制
2 实验方法
2.1 富血小板血浆(PRP)的制备及检测
2.2 不同浓度的PRP对 TSCs成腱分化的影响
2.3 低氧环境下PRP对 TSCs成腱分化与凋亡的影响
2.4 肌腱干细胞生物学特征检测
2.5 数据统计及分析
3 结果
3.1 富血小板血浆检测结果分析
3.2 细胞凋亡检测结果分析
3.3 蛋白印迹法(western blot)结果分析
3.4 RT-PCR检测结果分析
4 讨论
5 小结
第三部分 不同浓度PRP对兔跟腱病模型修复的疗效评价
前言
1 材料与方法
1.1 实验动物
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器与实验设备
1.4 主要溶液配制
2 实验方法
2.1 建立兔跟腱损伤模型
2.2 不同浓度的PRP治疗兔跟腱病的实验分组
2.3 疗效评价指标
2.4 数据统计及分析
3 结果
3.1 弹性定量超声结果分析
3.2 核磁共振(MRI)结果分析
3.3 组织病理学结果分析
3.4 蛋白印迹法(western blot)结果分析
3.5 RT-PCR检测结果分析
4 讨论
5 小结
第四部分 PRP注射在不同部位对兔跟腱病模型修复的疗效评价
前言
1 材料与方法
1.1 实验动物
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器与实验设备
1.4 主要溶液配制
2 实验方法
2.1 相同浓度的PRP注射在不同部位治疗兔跟腱病的实验分组
2.2 疗效评价指标
2.3 数据统计及分析
3 结果
3.1 弹性定量超声结果分析
3.2 核磁共振(MRI)结果分析
3.3 组织病理学结果分析
3.4 蛋白印迹法(western blot)结果分析
3.5 RT-PCR检测结果分析
4 讨论
5 小结
参考文献
全文结论
文献综述 富血小板血浆(PRP)疗法在跟腱病中应用的研究进展
参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]干细胞治疗骨科慢性疼痛的研究进展[J]. 祝兆琛,谢宗平. 国际骨科学杂志. 2020(01)
[2]肌腱力学生物学与运动性肌腱损伤病理机制研究进展[J]. 杨金娟,陈俊飞,支子,严翊. 中国运动医学杂志. 2019(10)
[3]自体富血小板血浆治疗骨关节与运动损伤疾病的机制与应用[J]. 福嘉欣,王树森. 中国组织工程研究. 2017(30)
[4]局部注射自体富血小板血浆联合运动疗法和局部注射曲安奈德治疗跟腱病的临床疗效对比[J]. 刘步云,咸杰,孙育良,吴骁,何本祥. 四川医学. 2017(05)
[5]富血小板血浆制备方法稳定性的研究[J]. 潘红娟,王雅丽,吕爽,刘铁梅. 中国实验诊断学. 2016(06)
[6]肌腱干细胞研究新进展[J]. James H-C.Wang,周义钦. 国际骨科学杂志. 2015(03)
[7]富血小板血浆(PRP)治疗技术及应用[J]. 吕汝举,刘美静. 中国医疗器械信息. 2013(10)
[8]TGF-β1和VEGF在富血小板血浆治疗跟腱断裂模型中的表达及意义[J]. 伍亮,熊小龙,相大勇,倪国新,余斌. 中华临床医师杂志(电子版). 2013(04)
[9]不同抗凝剂和激活剂联合应用对富血小板血浆凝胶释放生长因子影响的比较[J]. 罗涛,李放,张宁. 中国组织工程研究. 2012(16)
[10]富血小板血浆对大鼠跟腱断裂早期愈合的影响[J]. 熊小龙,伍亮,相大勇,倪国新,赵培冉,余斌. 中国修复重建外科杂志. 2012(04)
硕士论文
[1]富血小板血浆制备技术的优化及其组分的检测[D]. 潘红娟.吉林大学 2017
本文编号:3165711
【文章来源】:甘肃中医药大学甘肃省
【文章页数】:94 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
英文缩写表
前言
第一部分 兔肌腱干细胞的分离、提取与鉴定
前言
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器与实验设备
1.4 主要溶液的配制
2 实验方法
2.1 兔肌腱干细胞的分离与原代培养
2.2 肌腱干细胞的鉴定
3 结果
3.1 肌腱干细胞的形态学观察
3.2 克隆平板实验结果分析
3.3 流式细胞技术表型鉴定结果分析
3.4 肌腱干细胞多项分化能力鉴定结果分析
3.5 免疫荧光鉴定结果分析
4 讨论
5 小结
第二部分 PRP在低氧环境下诱导TSCs成腱细胞分化的研究
前言
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器与实验设备
1.4 主要溶液的配制
2 实验方法
2.1 富血小板血浆(PRP)的制备及检测
2.2 不同浓度的PRP对 TSCs成腱分化的影响
2.3 低氧环境下PRP对 TSCs成腱分化与凋亡的影响
2.4 肌腱干细胞生物学特征检测
2.5 数据统计及分析
3 结果
3.1 富血小板血浆检测结果分析
3.2 细胞凋亡检测结果分析
3.3 蛋白印迹法(western blot)结果分析
3.4 RT-PCR检测结果分析
4 讨论
5 小结
第三部分 不同浓度PRP对兔跟腱病模型修复的疗效评价
前言
1 材料与方法
1.1 实验动物
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器与实验设备
1.4 主要溶液配制
2 实验方法
2.1 建立兔跟腱损伤模型
2.2 不同浓度的PRP治疗兔跟腱病的实验分组
2.3 疗效评价指标
2.4 数据统计及分析
3 结果
3.1 弹性定量超声结果分析
3.2 核磁共振(MRI)结果分析
3.3 组织病理学结果分析
3.4 蛋白印迹法(western blot)结果分析
3.5 RT-PCR检测结果分析
4 讨论
5 小结
第四部分 PRP注射在不同部位对兔跟腱病模型修复的疗效评价
前言
1 材料与方法
1.1 实验动物
1.2 主要试剂
1.3 主要仪器与实验设备
1.4 主要溶液配制
2 实验方法
2.1 相同浓度的PRP注射在不同部位治疗兔跟腱病的实验分组
2.2 疗效评价指标
2.3 数据统计及分析
3 结果
3.1 弹性定量超声结果分析
3.2 核磁共振(MRI)结果分析
3.3 组织病理学结果分析
3.4 蛋白印迹法(western blot)结果分析
3.5 RT-PCR检测结果分析
4 讨论
5 小结
参考文献
全文结论
文献综述 富血小板血浆(PRP)疗法在跟腱病中应用的研究进展
参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]干细胞治疗骨科慢性疼痛的研究进展[J]. 祝兆琛,谢宗平. 国际骨科学杂志. 2020(01)
[2]肌腱力学生物学与运动性肌腱损伤病理机制研究进展[J]. 杨金娟,陈俊飞,支子,严翊. 中国运动医学杂志. 2019(10)
[3]自体富血小板血浆治疗骨关节与运动损伤疾病的机制与应用[J]. 福嘉欣,王树森. 中国组织工程研究. 2017(30)
[4]局部注射自体富血小板血浆联合运动疗法和局部注射曲安奈德治疗跟腱病的临床疗效对比[J]. 刘步云,咸杰,孙育良,吴骁,何本祥. 四川医学. 2017(05)
[5]富血小板血浆制备方法稳定性的研究[J]. 潘红娟,王雅丽,吕爽,刘铁梅. 中国实验诊断学. 2016(06)
[6]肌腱干细胞研究新进展[J]. James H-C.Wang,周义钦. 国际骨科学杂志. 2015(03)
[7]富血小板血浆(PRP)治疗技术及应用[J]. 吕汝举,刘美静. 中国医疗器械信息. 2013(10)
[8]TGF-β1和VEGF在富血小板血浆治疗跟腱断裂模型中的表达及意义[J]. 伍亮,熊小龙,相大勇,倪国新,余斌. 中华临床医师杂志(电子版). 2013(04)
[9]不同抗凝剂和激活剂联合应用对富血小板血浆凝胶释放生长因子影响的比较[J]. 罗涛,李放,张宁. 中国组织工程研究. 2012(16)
[10]富血小板血浆对大鼠跟腱断裂早期愈合的影响[J]. 熊小龙,伍亮,相大勇,倪国新,赵培冉,余斌. 中国修复重建外科杂志. 2012(04)
硕士论文
[1]富血小板血浆制备技术的优化及其组分的检测[D]. 潘红娟.吉林大学 2017
本文编号:3165711
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