胃癌细胞白藜芦醇敏感性与STAT3信号通路关系的初探
本文关键词：胃癌细胞白藜芦醇敏感性与STAT3信号通路关系的初探，，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：研究背景胃癌是世界上第四大常见的癌症,其致死率在肿瘤中高居第二。目前临床上5-FU、顺铂、紫杉醇、奥沙利铂和草酸铂为常用的化疗药物,但是这些药物或多或少都会给病人带来毒副作用。因此寻找无毒副作用又具有疗效的药物具有非常重要的临床意义。白藜芦醇广泛存在于虎杖、葡萄等70多种天然植物中。白藜芦醇具有多种生物学功能,包括抗炎、抗氧化、抗肿瘤和神经保护等,而且对人和动物无毒副作用。所以白藜芦醇对胃癌的预防和治疗具有很好地前景。大量研究表明,白藜芦醇可能是通过细胞内信号通路(如Wnt、Notch或JAK/STAT信号通路等)的抑制或激活来控制细胞的增殖或凋亡。也有文献报道,STAT3不仅在膀胱癌、乳腺癌、胰腺癌和宫颈癌,还在胃癌中异常活化和表达升高。但是有关白藜芦醇对胃癌的影响及其与STAT3信号通路的关系研究尚少。目的(1)研究胃癌细胞系MGC-803、BGC-823和AGS对白藜芦醇的敏感性及其作用特点。(2)研究分析100μM白藜芦醇处理胃癌细胞系MGC-803、BGC-823和AGS 48h前后,STAT3、p-STAT3以及该信号通路中STAT3负向调控因子SOCS3、p-SHP2和PIAS3的表达情况,并分析可能的作用机制。(3)分析JAK特异性抑制剂AG490作用于MGC-803、BGC-823和AGS细胞48h前后,胃癌细胞的生长和凋亡情况,从而探讨在胃癌细胞的发生发展过程中STAT信号通路所起的作用和白藜芦醇的抗肿瘤活性与该信号通路可能存在的内在联系。方法(1)胃癌细胞MGC-803、BGC-823在含有10%国产优级胎牛血清的L-DMEM中进行培养,用100μΜ白藜芦醇处理48h后收取细胞和爬片进行保存;ags细胞采用含有10%进口fbs的s,/f12培养液中培养,用100μΜ白藜芦醇处理48h后收取细胞和爬片进行保存。(2)对细胞爬片进行he染色,观察100μΜ白藜芦醇和80μΜag490处理后细胞的数量和形态上的变化。(3)运用mtt法检测白藜芦醇对胃癌细胞生长抑制情况。(4)运用fcm(流式细胞术)方法检测白藜芦醇和ag490处理细胞后细胞周期和凋亡情况。(5)应用icc(免疫细胞化学)、rt-pcr和westernblotting等方法检测在用白藜芦醇处理48h后jak/stat信号通路中stat3、p-stat3以及stat3的负向调控因子socs3、p-shp2和pias3的表达水平的改变。(6)运用icc的方法检测ag490处理48h后三个细胞系中p-stat3表达情况。结果(1)he染色结果发现胃癌细胞系mgc-803、bgc-823和ags在100μΜ白藜芦醇处理48h后细胞形态都发生明显变化;抑制mgc-803的生长,有少量细胞凋亡,抑制bgc-823和ags的生长,同时诱导细胞凋亡;同时ags细胞胞质缩小,有个别细胞融合成大细胞现象。在80μΜag490处理48h前后,胃癌细胞系mgc-803、bgc-823和ags的形态发生变化,数量减少。(2)mtt结果显示白藜芦醇浓度梯度处理胃癌细胞系mgc-803、bgc-823和ags48h后,细胞的增殖与活性与白藜芦醇浓度呈负相关,其中bgc-823和ags更为敏感。(3)fcm检测结果发现在100μΜ白藜芦醇处理胃癌细胞系mgc-803、bgc-823和ags48h前后,细胞周期被阻滞在g1期,且三个细胞系均有不同程度的细胞凋亡,而且bgc-823和ags凋亡率高于mgc-803;在80μΜag490处理胃癌细胞系mgc-803和bgc-82348h前后,细胞周期被阻滞在g1期,且有不同程度的生长抑制;在80μΜag490处理胃癌细胞系ags48h前后,细胞周期被阻滞在s期,且有一定的生长抑制。总的来说,胃癌细胞系mgc-803、bgc-823和ags对白藜芦醇和ag490都具有一定的敏感性:其中mgc-803对白藜芦醇欠敏感,bgc-823和ags对白藜芦醇较敏感;mgc-803、bgc-823和ags对ag490均较敏感。(4)icc结果显示在100μΜ白藜芦醇处理48h后,在胃癌细胞系mgc-803中STAT3表达略微下调,而p-STAT3表达没有明显变化,SOCS3表达上调、PIAS3表达下调,p-SHP2无明显变化;在BGC-823中,STAT3和p-STAT3均表达下调,负向调控因子p-SHP2和PIAS3均表达上调,而SOCS3无明显变化。AGS细胞系中,除了SOCS3表达下调以外其他均没有明显变化。(5)Western blotting结果显示在100μΜ白藜芦醇处理48h后,在胃癌细胞系MGC-803中STAT3表达略微下调、p-STAT3和p-SHP2无明显变化。在AGS中STAT3和p-STAT3均没有明显变化,而p-SHP2表达略微下调;在BGC-823中STAT3和p-STAT3均表达下调,负调控因子p-SHP2无明显变化。(6)RT-PCR结果显示100μΜ白藜芦醇处理胃癌细胞系MGC-803、BGC-823和AGS 48h后,MGC-803和BGC-823中STAT3表达下调,AGS中STAT3略微下调;在MGC-803中负调控因子SHP2无明显变化、SOCS3有所上升,而PIAS3表达下调;在BGC-823中负调控因子SHP2和PIAS3表达明显上升,SOCS3无明显变化;在AGS中负向调控因子SHP2和PIAS3均无明显变化,而SOCS3表达下调。结论(1)白藜芦醇能够抑制胃癌细胞系MGC-803、BGC-823和AGS细胞的生长、并促进BGC-823和AGS细胞凋亡,细胞被阻滞在G1期。(2)BGC-823和MGC-803细胞系对RES敏感性差异可能与STAT3信号通路的抑制程度有关。(3)白藜芦醇、AG490处理BGC-823细胞后细胞凋亡程度不同,提示白藜芦醇可能存在多靶点。(4)AG490通过抑制STAT3的活化下调p-STAT3的水平进而抑制胃癌细胞系MGC-803、BGC-823和AGS的生长。(5)不同的胃癌细胞系对白藜芦醇的敏感性与STAT3通路的活化状态不完全一致,提示白藜芦醇对胃癌细胞增殖和凋亡可能存在多细胞信号通路的协同作用,以及对胃癌进行个体化治疗具有必要性。
【关键词】：胃癌 白藜芦醇 STAT信号通路 AG490
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285
【目录】：
- 中文摘要6-9
- 英文摘要9-13
- 前言13-15
- 一 材料与方法15-18
- 二 实验方法18-26
- 结果26-41
- 讨论41-45
- 结论45-46
- 参考文献46-50
- 综述50-62
- 参考文献57-62
- 致谢62-63
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 牛桂军;黄杰安;;STAT3在消化系统恶性肿瘤研究进展[J];国际消化病杂志;2010年01期
2 艾源;;在大颗粒淋巴细胞白血病中体细胞STAT3的突变[J];中国普外基础与临床杂志;2014年01期
3 吴巾红;钟家蓉;谢盛慧;;STAT3在小鼠急性病毒性心肌炎发病中的作用研究[J];重庆医科大学学报;2010年07期
4 刘俊;冯学泉;王金环;;STAT3信号通路及其肿瘤分子靶向治疗的研究进展[J];中国神经精神疾病杂志;2011年07期
5 陈玉娟;汪静;王晓东;吕青;王宇;朱精强;李宏江;刘雪娟;羊晓勤;杨金巧;;STAT3在乳腺浸润性导管癌中表达水平与临床病理特征相关性研究[J];中国肿瘤临床;2013年10期
6 李夏;王雨生;朱洁;赵炜;刘敏;杨秀梅;;缺氧诱导体外培养人视网膜色素上皮细胞中STAT3的活化[J];国际眼科杂志;2007年06期
7 白莉 ,钱桂生 ,余祖滨 ,钱频;缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞STAT3表达及细胞增殖的影响[J];解放军医学杂志;2004年09期
8 崔向荣;朱静;田杰;邓兵;李娅莎;白璐;;STAT3过度表达和激活对骨髓间充质干细胞瘤样转化的作用[J];中国生物制品学杂志;2013年03期
9 史培荣;陈显久;何东宁;李丽华;南欣荣;;口腔鳞状细胞癌组织中STAT3的表达及意义研究[J];中国实用口腔科杂志;2010年04期
10 何文琼;钱晓萍;刘宝瑞;;STAT3与肿瘤个体化治疗[J];医学研究生学报;2009年09期
中国重要会议论文全文数据库 前9条
1 吴巾红;钟家蓉;;STAT3在小鼠急性病毒性心肌炎发病中的作用及机制研究[A];中华医学会第十五次全国儿科学术大会论文汇编（上册）[C];2010年
2 张幼怡;;大、小鼠心脏β-肾上腺素受体激活STAT3的不同机制[A];第六届海峡两岸心血管科学研讨会论文摘要集[C];2007年
3 吴国英;汤根兄;;Stat3及Bcl-2在口腔黏膜癌前病变癌变中表达的相关性[A];第七届全国口腔黏膜病暨第五届口腔中西医结合大会论文汇编[C];2008年
4 张钰;杜小莉;阮侠;林德晨;冯彦斌;彭海勇;崔静璐;陈微;王永泉;徐昕;蔡岩;韩亚玲;张宏冰;詹启敏;王明荣;;Stat3与PLK1交互作用参与食管癌细胞恶性增殖及凋亡的调节[A];遗传学与社会可持续发展——2010中国青年遗传学家论坛论文摘要汇编[C];2010年
5 冯铭恩;冯亮;李冬水;习海波;罗龙华;孙庭;;STAT3及CD147在前列腺癌中的表达研究[A];第七次全国中西医结合男科学术会议及全国中西医结合男科提高班论文汇编及讲义[C];2011年
6 于晓棠;朱世能;许祖德;胡锡琪;朱藤芳;陈洁晴;陆世伦;;STAT3在大鼠实验性肝癌中的表达及活化[A];中华医学会病理学分会2006年学术年会论文汇编[C];2006年
7 宋玉环;汪素文;汪运山;;AFP、VEGF及STAT3在胃癌中的表达及意义[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
8 马荣;陈宏;;STAT3与相关皮肤病的研究进展[A];2014全国中西医结合皮肤性病学术年会论文汇编[C];2014年
9 黄陈;裘正军;陈铜;孙晶;柴小军;曹俊;黄克俭;张放;江驶;朱麟;刘俊;;STAT3信号通路与胰腺癌中MMP-2表达的相关性研究[A];中华医学会第十一届全国胰腺外科学术研讨会论文汇编[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前7条
1 苏雨行;阻断STAT3信号通路对人脑胶质母细胞瘤细胞增殖抑制的实验研究[D];山东大学;2008年
2 黄陈;阻断STAT3信号通路对胰腺癌侵袭转移的抑制作用及其机制[D];上海交通大学;2007年
3 王晓强;STAT3信号通路在鼻息肉发病机制中作用的初步研究[D];重庆医科大学;2013年
4 高丽芳;RNAi沉默STAT3对前列腺癌及黑色素瘤的生长抑制作用[D];吉林大学;2004年
5 孙志钢;STAT3及其靶基因对食管鳞癌生物学行为调控机制的实验研究[D];山东大学;2012年
6 官静;IL-21与STAT3在哮喘小鼠肺组织的表达及作用[D];南方医科大学;2013年
7 张道宫;STAT3、Survivin在喉癌中的表达及AG490抑制喉癌细胞STAT3信号传导通路的研究[D];山东大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈婧;中药白花蛇舌草提取物抑制癌细胞STAT3活化并诱导细胞凋亡[D];兰州大学;2015年
2 刘雅琦;神经胶质瘤细胞与人脑微血管内皮细胞之间关于STAT3的信号交互作用机制[D];宁夏医科大学;2015年
3 黄诚;STAT3和CD14在胃癌中的表达及临床意义[D];安徽医科大学;2014年
4 李海莹;STAT3和cyclinD1的表达与食管鳞癌患者临床特征及生存期的相关性分析[D];暨南大学;2015年
5 朱正国;胃癌细胞白藜芦醇敏感性与STAT3信号通路关系的初探[D];大连医科大学;2015年
6 段海霞;双脱甲氧基姜黄素介导STAT3信号通路对卵巢癌细胞侵袭和转移的影响[D];第四军医大学;2011年
7 祝宝让;反义STAT3设计及其对肺腺癌A549细胞辐射敏感性影响的研究[D];第二军医大学;2007年
8 王s
本文编号：328819
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/mpalunwen/328819.html
