脑钠肽及受体在运动预适应诱导的早期与晚期心肌保护效应中的作用

发布时间：2017-10-13 16:13

  本文关键词：脑钠肽及受体在运动预适应诱导的早期与晚期心肌保护效应中的作用

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【摘要】：研究目的：一次短时间大强度的间歇运动可对心脏产生强大的保护作用的现象称为运动预适应（exercise preconditioning，EP）。目前，EP的保护效应作用已为研究学者证实，但EP诱导的心肌保护作用的机制尚待进一步的探讨。在EP机制的研究中发现脑钠肽（brain natriureticpeptide，BNP）作为心肌保护的重要因子，在EP机制中可能起着重要的调控作用，但目前BNP在EP中的变化及具体机制尚缺乏报道。因此，本研究以EP对一次持续大强度运动的心肌保护效应作为研究基础，以BNP为研究核心，探讨BNP与受体（natriuretic peptide receptor，NPR）在EP早期心肌保护效应期与晚期心肌保护效应期的变化规律及可能关系，为EP心肌保护效应及机制的研究提供更新的理论与实验依据。 研究方法：150只健康雄性SD大鼠随机分为6组：C组，对照组。HE组，对大鼠进行一次持续3h的大强度跑台运动，诱导大鼠急性心肌损伤。EEP组，以一次大强度间歇跑台运动建立EP模型，EP后0.5h取材。LEP组，进行一次EP，24h后取材。EEP+HE组，EP后0.5h进行一次3h大强度跑台运动。LEP+HE组，EP后24h进行一次3h大强度跑台运动。应用免疫化学发光法检测血浆心肌肌钙蛋白I（cardiac troponinI，cTnI）的含量，应用苏木素碱性复红苦味酸染色观察心肌缺血缺氧的改变，综合评价心肌结构和功能改变，探讨EP早期与晚期保护效应期对一次大强度运动大鼠心肌的保护作用。应用酶联免疫吸附法检测血浆BNP及氨基末端前体脑钠（N-terminal pro-brain natriuretic peptide）的含量，实时荧光定量PCR法检测大鼠左心室BNP，NPR-A，NPR-B，NPR-CmRNA表达变化，免疫印迹法检测大鼠左心室BNP， NPR-A， NPR-B，NPR-C表达水平，免疫组织化学法显示大鼠左心室BNP，NPR-A，NPR-B，NPR-C表达的分布，揭示EP早期保护期、晚期保护期与一次大强度运动后BNP，NPR-A，NPR-B，NPR-C mRNA与蛋白表达的分布规律。 研究结果：（1）与C组相比，HE组血浆cTnI含量明显升高，心肌缺血缺氧严重。与HE组相比，EEP+HE组与LEP+HE组血浆cTnI含量明显下降，心肌缺血缺氧减轻。（2）与C组相比，HE组左心室BNP表达显著增加，BNP免疫反应阳性面积与IOD显著增加。血浆BNP含量显著升高，血浆NT-proBNP含量无明显改变。与C组相比，HE组左心室NPR-A、NPR-C mRNA水平无明显改变，NPR-B mRNA水平显著升高。与C组相比，HE组左心室NPR-A蛋白水平无明显改变，NPR-B、NPR-C蛋白水平显著升高， NPR-B免疫阳性面积与IOD增加。（3）与C组相比，大鼠左心室EEP组、LEP组BNP mRNA，BNP表达与免疫阳性反应面积和IOD显著升高，EEP组血浆BNP含量显著升高，LEP组血浆BNP含量无明显改变。EEP组、LEP组血浆NT-proBNP含量无明显改变。与C组相比，EEP组与LEP组NPR-A、NPR-B、NPR-C mRNA水平明显升高， NPR-A、NPR-B蛋白表达与免疫阳性反应明显升高，NPR-C蛋白水平下降。（4）与HE组相比， EEP+HE组与LEP+HE组大鼠左心室BNP mRNA水平明显升高，但BNP水平无明显改变，BNP免疫阳性面积与IOD明显上升，LEP+EE组血浆BNP含量显著下降，EEP+EE组血浆NT-proBNP含量显著下降。与HE组相比， EEP+HE组与LEP+HE组大鼠左心室NPR-A、NPR-B、NPR-C mRNA水平均显著升高，NPR-A、NPR-B蛋白表达及免疫阳性面积与IOD明显增加，但NPR-C蛋白表达呈下降趋势。（5）与EEP+HE组相比，LEP+HE组大鼠左心室BNP mRNA水平显著升高，BNP表达与免疫阳性反应无明显改变，血浆NT-proBNP含量显著上升。与EEP+HE组相比，LEP+HE组大鼠左心室NPR-A、 NPR-B mRNA无明显改变， NPR-C mRNA水平显著上升，LEP+EE组大鼠左心室NPR-A、 NPR-B、 NPR-C蛋白水平无明显改变，LEP+EE组大鼠左心室NPR-A免疫阳性反应无明显改变，NPR-B免疫阳性反应面积及IOD显著下降。 研究结论：EP可使大鼠心肌产生早期保护效应与晚期保护效应，这种通过大强度间歇运动产生的心肌适应可减轻随后一次持续3h的大强度运动造成的心肌损伤，，EP可促使心肌BNP、NPR-A与NPR-B表达的增加，减少NPR-C在心肌细胞表达，间接减少NPR上游BNP在心肌细胞的清除率，提高BNP在心肌中的作用率，增强心肌对氧化应激及缺血缺氧的耐受，是EP保护效应的重要机制之一。
【关键词】：运动预适应 心肌保护效应 心肌损伤 脑钠肽 利钠肽受体
【学位授予单位】：上海体育学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：G804.2
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-13
• 概述13-15
• 第一部分 利钠肽在运动与心脏保护的研究现状及展望15-41
• 1 前言15
• 2 利钠肽分子生物学特征15-17
• 2.1 心钠素15-16
• 2.2 脑钠肽16-17
• 2.3 C-型利钠肽17
• 2.4 利钠肽受体17
• 3 利钠肽在心血管系统中的作用17-30
• 3.1 心钠素的心脏保护作用17-18
• 3.2 脑钠肽的心脏保护作用18-20
• 3.3 C-型利钠肽在心血管中的作用20-22
• 3.4 利钠肽受体 A 的心脏保护作用22-24
• 3.5 利钠肽受体 B 的心脏保护作用24-26
• 3.6 利钠肽受体 C 的心脏保护作用26-30
• 4 利钠肽与运动30-32
• 4.1 运动对 ANP 的影响30-31
• 4.2 运动对 BNP 的影响31-32
• 5 展望32-33
• 6 参考文献33-41
• 第二部分 运动预适应对一次大强度运动致大鼠急性心肌损伤的早期与晚期保护效应41-54
• 1 前言41-42
• 2 材料与方法42-46
• 2.1 实验试剂42
• 2.2 实验仪器和设备42-43
• 2.3 技术路线43
• 2.4 实验对象与分组43-44
• 2.5 运动预适应心肌保护效应模型的建立44
• 2.7 一次大强度运动模型的建立44
• 2.8 取材44
• 2.9 大鼠血浆 cTnI 的含量检测44-45
• 2.10 石蜡切片的制作45
• 2.11 苏木素碱性复红苦味酸染色与图像分析45
• 2.12 统计方法45-46
• 3 实验结果46-49
• 3.1 大鼠血浆 cTnI 含量变化46
• 3.2 大鼠心肌缺血缺氧改变46-49
• 4 分析讨论49-51
• 4.1 一次大强度运动致大鼠心肌损伤49-50
• 4.2 EP 对一次大强度运动大鼠心肌的保护效应50-51
• 5 结论51-52
• 6 参考文献52-54
• 第三部分 脑钠肽在运动预适应心肌保护效应中的表达变化54-73
• 1 前言54-55
• 2 材料和方法55-60
• 2.1 主要试剂55-56
• 2.2 技术路线56
• 2.3 实验对象与分组及动物模型的建立56
• 2.4 大鼠左心室 BNP 实时荧光定量 PCR 法56-58
• 2.5 大鼠血浆 BNP 与 NT-proBNP 的检测58
• 2.6 免疫印迹法58-59
• 2.7 免疫组织化学法（ SABC 法）59
• 2.8 数据统计分析59-60
• 3 结果60-66
• 3.1 大鼠血浆 BNP 与 NT-proBNP 含量的变化60-61
• 3.2 大鼠左心室 BNP 免疫印迹结果61-62
• 3.3 大鼠左心室 BNP 免疫组织化学结果62-65
• 3.4 大鼠左心室 BNP mRNA 实时荧光定量 PCR 结果65-66
• 4 分析与讨论66-69
• 4.1 EP 对 BNP 表达和分布的影响66-68
• 4.2 BNP 在 EP 早期与晚期心肌保护效应中表达的变化68-69
• 5 结论69-70
• 6 参考文献70-73
• 第四部分 利钠肽受体在运动预适应心肌保护效应中的表达变化73-105
• 1 前言73-74
• 2 材料和方法74-77
• 2.1 主要试剂74
• 2.2 主要技术路线74-75
• 2.3 实验对象和方案75
• 2.4 实时荧光定量 PCR 法75-76
• 2.5 免疫印迹法76
• 2.6 免疫荧光染色法76-77
• 2.9 数据统计分析77
• 3 实验结果77-88
• 3.1 大鼠左心室三型利钠肽受体免疫印迹结果77-79
• 3.2 大鼠左心室三型利钠肽受体免疫荧光结果79-86
• 3.3 大鼠左心室三型利钠肽受体 mRNA 实时荧光定量 PCR 结果86-88
• 4 分析讨论88-98
• 4.1 EP 对 NPR 表达变化的影响88-91
• 4.2 NPR 在 EP 早期与晚期心肌保护效应中的作用91-98
• 5 结论98-99
• 6 参考文献99-105
• 全文总结105-106
• 附录106-107
• 致谢107-108
• 英文缩略词表108

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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5 郝U

本文编号：1025831