离心运动对肌浆网钙调控蛋白的作用及针刺的干预机制

发布时间：2017-11-02 03:21

  本文关键词：离心运动对肌浆网钙调控蛋白的作用及针刺的干预机制

  更多相关文章： EIMD 针刺 钙通道 肌浆网 cAMP-PKA通路

【摘要】：目的：钙离子是介导细胞内损伤和修复的关键信号。本研究希望通过观察离心运动和针刺干预对细胞内钙浓度和钙通道机能的影响,来探讨介导骨骼肌损伤和修复的钙信号规律和针刺疗法的机制。方法：实验一SD大鼠分为3周离心运动3E、3周运动+针刺3EA、3周单纯针刺3A和安静组3C,进行3周下坡跑离心训练,并对3EA和3A进行针刺干预；酶联免疫测试cAMP、SLN浓度,免疫印迹测试PDE4D3、FKBP12、PLB、PLB-ser16蛋白表达。实验二大鼠分为一次离心运动E、运动+针刺EA、单纯针刺A、和安静C组,在运动后0-72小时使用透射电镜观察肌细胞形态,X射线能谱分析细胞钙浓度,并测试cAMP、SLN、PDE4D3、FKBP12、PLB、PLB-ser16.实验三制备离体灌流肌条(GC组),并在电刺激至力竭后针刺(GEA组),并使用PKA抑制剂(PKA组)H89和NCX阻断剂(NCX组)CB-DMB干预,观察肌细胞形态和钙浓度。结果：3E的cAMP上升；3EA的PLB、ser16/PLB上升；3E的PDE4D3、3E和3EA的FKBP12下降。E肌节运动后6h紊乱,至72h未完全恢复,EA 12h出现紊乱,24-48h完全恢复；E运动后即刻和72h钙升高,EA在12小时升高。E组PDE4D3在6-72h升高,EA在12-48h升高；E组FKBP12在0-12h升高,72h降低,EA在0-48h升高；E组PLB在6-48h升高,EA在0-6h升高；E组ser16/PLB在0-48h降低,EA在12-48h升高；EA组SLN在6h升高；E组cAMP在6-12和48-72h升高,EA在0、12-48h升高。GC组损伤严重,钙较GEA高；GEA组损伤大大缓解；PKA组损伤大于GEA组,小于GC组,钙有上升趋势；NCX组损伤程度和钙上升程度和GC组基本相当。结论：肌细胞在离心运动后即刻出现钙超载,诱发损伤,并在12-72h触发钙信号进行修复；针刺可缓解即刻钙超载,并通过加强钙通道机能来促进修复性钙信号的提前出现和修复的提前完成；长期离心运动可造成RyR钙漏,介导损伤,针刺可通过PLB磷酸化和维持PDE4D3来缓解钙超载；在运动后即刻,针刺缓解钙超载的机制主要是激活NCX通道,cAMP-PKA的激活也有部分作用。
【关键词】：EIMD 针刺 钙通道 肌浆网 cAMP-PKA通路
【学位授予单位】：北京体育大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：G804.2
【目录】：

• 搞要5-6
• ABSTRACT6-11
• 1 前言11-16
• 1.1 概述11-12
• 1.2 研究内容12
• 1.3 研究假设12-14
• 1.4 研究方案14-16
• 1.4.1 实验一技术路线14-15
• 1.4.2 实验二技术路线15-16
• 1.4.3 实验三技术路线16
• 2 文献综述-运动性骨骼肌损伤与细胞内钙超载16-27
• 2.1 损伤和钙超载的关系16-20
• 2.1.1 运动性骨骼肌损伤的概念及症状17-18
• 2.1.2 运动性骨骼肌损伤的预防与治疗18
• 2.1.3 运动性骨骼肌损伤发生的微观机制18-19
• 2.1.4 运动性骨骼肌损伤与钙超载的关系19-20
• 2.2 骨骼肌细胞内的钙超载现象的产生20-26
• 2.2.1 细胞膜牵张激活离子通道与运动性钙超载的关系21-22
• 2.2.2 肌浆网兰尼定受体引发的“钙漏”现象与钙超载22-23
• 2.2.3 肌浆网钙泵SERCA对钙超载的作用23-25
• 2.2.4 细胞膜钠钙交换蛋白与细胞内钙超载的关系25-26
• 2.3 针刺对运动性骨骼肌损伤的治疗作用26-27
• 3 研究与分析过程27-112
• 3.1 试验一 三周离心运动对肌细胞钙分布、钙通道蛋白机能的影响以及针刺的干预作用27-52
• 3.1.1 前言27-28
• 3.1.2 材料与方法28-35
• 3.1.3 实验结果35-47
• 3.1.4 讨论47-52
• 3.1.5 小结52
• 3.2 试验二 一次离心运动对肌细胞钙分布、钙通道蛋白机能的影响以及针刺的干预作用52-102
• 3.2.1 前言52-53
• 3.2.2 材料与方法53-57
• 3.2.3 实验结果57-97
• 3.2.4 讨论97-102
• 3.2.5 小结102
• 3.3 试验三 PKA抑制剂H89和NCX阻断剂CB-DMB对离体灌注力竭肌肉针刺效果的影响102-112
• 3.3.1 前言102-103
• 3.3.2 材料与方法103-106
• 3.3.3 实验结果106-111
• 3.3.4 讨论111
• 3.3.5 小结111-112
• 4 结论112
• 5 创新点112-113
• 致谢113-114
• 参考文献114-121
• 附录121-122
• 个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果122

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本文编号：1129771