p300和HDAC1相互调节RORγt乙酰化和功能

发布时间：2017-10-26 07:40

  本文关键词：p300和HDAC1相互调节RORγt乙酰化和功能

  更多相关文章： T辅助细胞 17维甲酸孤儿核受体 乙酰化 去乙酰化 泛素化 p300 HDAC1

【摘要】：辅助性T细胞17(T helper cells 17,Th17 cell)是近年来新发现的不同于Th1、Th2和调节性T细胞(Regulatory T cells,Treg)的一群CD4+T细胞亚群。因其主要分泌白细胞介素-17(Interleukin 17,IL-17),被命名为Th17细胞。IL-17在组织炎症中主要通过诱导炎症细胞因子和趋化因子的产生而发挥作用,如IL-6和CXCL8等。由于IL-17很强的前炎症因子作用,Th17细胞与多种自身免疫性疾病和感染性疾病的发生和发展有关,如系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematous,SLE)、类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)、多发性硬化症(Multiple sclerosis,MS)、炎症性肠炎(Inflammatory bowel disease,IBD)、银屑病(Psoriasis)以及桥本氏甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)等。维甲酸相关孤儿核受体(Retinoid-related orphan receptor gammat,RORγt)是Th17细胞最重要的关键核转录因子,和其他转录因子一起协同促进Th17细胞的分化,如RORα、信号转导子与转录激活子(Signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、白细胞介素调节因子4(Interferon regulatory factor 4,IRF4)、Runt相关转录因子(Runt-related transcription factor 1,Runx1)、芳香烃受体(Aryl hydrocarbon receptor,AHR)以及B细胞活化转录因子(B cell-activating transcription factor,BATF)等。另外,T转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β),IL-6,IL-23和IL-1β是Th17细胞分化和增殖的必要生长因子,并且可以促进IL-17,IL-23受体(Interleukin 23 receptor,IL-23R)以及RORγt的表达。在生物体内,组蛋白乙酰化和组蛋白去乙酰化处于动态平衡,精确地调控基因的表达和转录,从而维持细胞的正常生理和生化过程。乙酰化包括对组蛋白的乙酰化以及转录因子的乙酰化,其中通过修饰转录因子可以影响蛋白质的稳定性,亚细胞定位以及DNA的结合能力。另外,在生物体内,泛素化修饰在蛋白质的降解、定位、代谢和功能方面也起着十分重要的作用,它参与了细胞增殖、分化、凋亡、信号转导、转录控制、DNA修复和免疫应答等细胞调控。Th17细胞的关键核转录因子RORγt的表达、翻译后修饰状态及其活性的调节决定着Th17细胞的免疫活性。然而RORγt如何调节仍旧不是十分清楚。本研究首先通过免疫沉淀检测到在人源Th17细胞存在乙酰化的RORγt,而且这种乙酰化作用在组蛋白去乙酰化酶抑制剂存在的情况下更为显著;免疫共沉淀证实在人源Th17细胞组蛋白乙酰转移酶(Histon acetyltransferase,HATs)p300可以和RORγt相互作用;免疫印迹结果发现p300可以稳定RORγt的蛋白水平且呈剂量依赖性;应用免疫沉淀实验证实p300可以乙酰化RORγt,且乙酰化的位点主要在RORγt的第81位的赖氨酸。此外,应用Ni-NTA镍螯合树脂纯化实验发现p300可以泛素化RORγt,泛素化的位点主要在RORγt的第258位的赖氨酸,且p300泛素化RORγt蛋白主要针对63位赖氨酸相关的泛素化;利用基因沉默方法(shRNA)在人源Th17细胞中消减p300后,减少RORγt蛋白水平以及RORγt有关的基因表达;利用荧光素酶报告基因实验结果发现p300上调了RORγt介导的IL-17表达且为剂量依赖性。更为有趣的是,组蛋白去乙酰化酶(Histon deacetylase,HDACs)HDAC1也可以与RORγt相互作用,同时可以去乙酰化RORγt。另外,HDAC1可以抑制p300依赖的RORγt介导的IL-17的转录。人源Th17细胞存在乙酰化的RORγt,本研究力图从分子和基因水平阐明乙酰转移酶p300以及去乙酰化酶HDAC1相互调控RORγt的分子机制,从而为临床自身免疫病防治提供线索和理论依据。
【关键词】：T辅助细胞 17维甲酸孤儿核受体 乙酰化 去乙酰化 泛素化 p300 HDAC1
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R392
【目录】：

• 中英文缩略语对照表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 1 引言11-22
• 2 实验材料与方法22-38
• 3 结果38-52
• 4 讨论52-55
• 5 结论55-56
• 6 参考文献56-67
• 附录67-69
• 致谢69-70
• 综述70-88
• 参考文献77-88

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张正行;;用C~(14)—乙酸酐作乙酰基测定[J];南药译丛;1961年01期

2 赵戈石,徐青云,张福生;湘西各民族人群异烟肼乙酰化代谢分型[J];湖南医学;1986年05期

3 郭瑞臣,王本杰,倪梅媛,李朝武,栾杨,王晓芸;国人乙酰化表型测定研究(附 203 例报告)[J];山东医科大学学报;1997年04期

4 崔f^,郭瑞臣,刘萍,于继鸣;203例中国人群乙酰化代谢表型测定[J];山东医药工业;1997年03期

5 黄的;张华凤;;赖氨酸乙酰化作用:更为广泛的蛋白调控方式[J];国际药学研究杂志;2012年02期

6 张锦生;;蛋白质乙酰化与肺癌及肺纤维化[J];复旦学报(医学版);2011年04期

7 周洁;Bromodomain[J];国外医学(生理、病理科学与临床分册);2002年06期

8 刘霞;张亮;黄荣忠;王啸;王明菊;杨柳;张陆军;陈世刚;谢鹏;;乙酰化生物学研究进展[J];重庆医科大学学报;2014年04期

9 秦晓琴;邓艳春;;抑癌基因的乙酰化与去乙酰化[J];国际神经病学神经外科学杂志;2008年06期

10 叶霞;邓华瑜;张力;赵敬;袁磊;;乙酰化酶抑制剂Garcinol对雌激素促乳腺癌细胞MCF-7增殖的作用与机制[J];第二军医大学学报;2014年07期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 刘红利;李新刚;陈燕;吴青;;曲古菌素A调节NB4细胞组蛋白乙酰化和P21~(WAF/CIP1)表达[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年

中国重要报纸全文数据库 前2条

1 记者 王春;我科学家发现生命新陈代谢中“乙酰化”奥秘[N];科技日报;2010年

2 记者 曹继军;复旦团队发现生命新陈代谢“乙酰化”新机制[N];光明日报;2010年

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 吴庆四;p300和HDAC1相互调节RORγt乙酰化和功能[D];安徽医科大学;2015年

中国硕士学位论文全文数据库 前5条

1 姚斐娜;蛋白质乙酰化定量研究[D];复旦大学;2013年

2 李苗;GATA-1乙酰化对WNK4基因表达调控机制的研究[D];中国医科大学;2008年

3 王文岩;肝癌细胞组蛋白H3乙酰化修饰定量及乙酰化分离富集新方法研究[D];复旦大学;2011年

4 谢宏霞;SIRT5对STAT3的乙酰化调节及其功能的研究[D];浙江理工大学;2010年

5 王文文;组蛋白H3乙酰化介导TGFβ2上调H9C2细胞转录因子的研究[D];重庆医科大学;2013年

，

本文编号：1097712