MicroRNA-200c逆转胃癌细胞顺铂耐药机制及与胃癌患者含铂方案化疗疗效、预后相关性研究

发布时间：2017-12-17 12:17

  本文关键词：MicroRNA-200c逆转胃癌细胞顺铂耐药机制及与胃癌患者含铂方案化疗疗效、预后相关性研究

  更多相关文章： miR-200c 胃癌 铂 ERCC3 ERCC4

【摘要】：胃癌是全世界男性死亡的第三大原因,也是女性死亡的第五大原因。虽然根治性手术切除是目前最有效的治疗,但40-70%的患者一经诊断即为晚期。此外,手术后40-60%的患者出现复发。进展期胃癌患者五年生存率仅为5-20%,中位生存期小于1年。含铂方案化疗是晚期胃癌的一线治疗方案,但由于原发性和继发性耐药,有效率仅有29-48%。因此,迫切需要寻找更好的治疗策略。研究表明,microRNAs(miRNAs)与肿瘤的形成、生长、转移,可作为肿瘤抑制基因或癌基因。miRNAs在不同肿瘤的耐药中扮演着重要的角色。作为生物标志物,可用于癌症的诊断和预测治疗效果和预后。Mi RNA-200c(miR-200c)是miR-200家族的成员,其基因定位于人类12号染色体(12p13.31)。此前,发现miR-200c对胃癌细胞SGC7901/DDP逆转耐药及抑制增殖作用与诱导钙粘附蛋白E、磷酸酶基因蛋白和Bax蛋白的表达、抑制Akt信号通路的激活和抑制B淋巴细胞瘤-2基因蛋白的表达有关。此外,miRNAs还与DNA修复相关机制相关。最近的一项研究表明,miR-192的可以靶向抑制肝癌HepG2.2.15细胞核苷酸切除修复(Nucleotide excision repair,NER)途径中核苷酸切除修复交叉互补基因(excision repaircross-complementing gene,ERCC)3蛋白和ERCC4蛋白。故mi R-200c在胃癌耐药细胞株的异常表达,其是否通过NER途径的ERCC3和ERCC4发挥作用尚未可知。本研究拟在前期研究和文献报告的基础上,进一步观察mi R-200c是否通过NER途径的ERCC3和ERCC4发挥作用,并进一步研究miR-200c的表达和治疗Ⅳ期胃癌患者接受一线含铂化疗方案治疗疗效和预后的相关性,从而指导临床治疗晚期胃癌患者。本研究包含三个部分。第一部分MicroRNA-200c逆转胃癌细胞顺铂耐药机制目的:探讨MicroRNA-200c(miR-200c)在胃癌细胞株SGC7901/DDP耐药逆转的分子机制,特别是与NER途径中两个重要蛋白ERCC3和ERCC4调控关系。方法:通过慢病毒载体转染来研究对SGC7901/DDP、SGC7901细胞株miR-200c和ERCC3、ERCC4表达水平的影响。分别用qRT-PCR和Western blot方法检测细胞株转染前后miR-200c和ERCC3、ERCC4的表达变化;MTT法对各细胞株进行顺铂耐药的评估。结果:与亲本SGC7901细胞相比,顺铂耐药细胞株SGC7901/DDP的miR-200c在转染前的表达水平较低,而ERCC3和ERCC4蛋白表达均升高,且差异有统计学意义(P均0.05)。慢病毒载体可调节细胞株miR-200c的表达水平。在慢病毒上调miR-200c的SGC7901/DDP细胞株,对比亲本SGC7901/DDP细胞株和慢病毒空载SGC7901/DDP细胞株,ERCC3、ERCC4蛋白表达下降,顺铂耐药性降低,差异有统计学意义(P均0.001)。在慢病毒下调mi R-200c的SGC7901细胞株,与亲本SGC7901细胞株和慢病毒空载的SGC7901细胞相比,ERCC3、ERCC4蛋白表达与顺铂耐药性均升高,且差异均有统计学意义(P均0.001)。结论:过表达miR-200c能通过下调ERCC3和ERCC4逆转SGC7901/DDP细胞株的顺铂耐药,提示机制涉及到核苷酸切除修复途径。第二部分Ⅳ期胃癌患者肿瘤组织中MicroRNA-200c表达水平与含铂方案化疗疗效、预后相关性研究目的:观察Ⅳ期胃癌患者肿瘤组织中的miR-200c表达水平与含铂方案化疗疗效及预后的相关性。方法:肿瘤组织标本及癌旁组织取自51例接受含铂方案化疗的Ⅳ期胃癌患者。用qRT-PCR方法对这些标本进行miR-200c的表达的测定。同时对miR-200c表达水平与患者疗效和预后进行相关性分析。结果:miR-200c在胃癌组织中的表达明显低于癌旁组织(P0.05)。发现miR-200c的表达与患者的临床特征无显著相关性。miR-200c高表达的患者有较好的化疗疗效和更长的无进展生存期、总生存期。受试者工作曲线的分析表明,胃癌组织中的miR-200c表达水平可以预测患者含铂方案化疗疗效。多因素分析显示,胃癌组织中miR-200c的高表达的患者有更长的无进展生存期、总生存期。结论:Ⅳ期胃癌患者癌组织中miR-200c的高表达与更好的含铂方案化疗效果和预后相关,提示胃癌组织中miR-200c的水平可能对预测Ⅳ期胃癌患者含铂化疗疗效及预后有意义。第三部分Ⅳ期胃癌患者血浆中MicroRNA-200c表达水平与含铂方案化疗疗效、预后相关性研究目的:观察Ⅳ期胃癌患者血浆中的miR-200c表达水平与含铂方案化疗疗效及预后的相关性。探讨Ⅳ期胃癌患者肿瘤组织与血浆中miR-200c的表达之间有无关联性。方法:血浆取自51例接受含铂方案化疗的Ⅳ期胃癌患者及胃镜证实慢性浅表性胃炎患者。用qRT-PCR方法对这些标本进行miR-200c的表达的测定。同时对miR-200c表达水平与患者疗效和预后进行相关性分析。采用Pearson相关分析51例胃癌患者肿瘤组织与血浆中miR-200c表达相关性。结果:血浆mi R-200c在胃癌患者的表达明显低于慢性浅表性胃炎患者(P0.05)。发现miR-200c的表达与患者的临床特征无显著相关性。miR-200c高表达的患者有较好的治疗效果和更长的无进展生存期、总生存期。受试者工作曲线的分析表明,血浆中的miR-200c表达水平可以预测患者治疗效果。多因素分析显示,血浆中miR-200c的高表达的患者有更长的无进展生存期、总生存期。胃癌患者肿瘤组织与血浆中miR-200c的表达具有正相关性,(r==0.873,P0.05)。结论:Ⅳ期胃癌患者血浆中miR-200c的高表达与更好的含铂方案化疗效果及预后相关,提示血浆miR-200c的水平可能预测Ⅳ期胃癌患者化疗疗效及预后。Ⅳ期胃癌患者肿瘤组织与血浆中miR-200c的表达具有正相关性,通过检测血浆中miR-200c的表达在一定程度上可间接反映肿瘤组织中的表达情况。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R735.2

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 陈培锋;;托烷司琼加镇吐合剂控制肺癌含铂方案化疗所致恶心、呕吐的临床观察[J];中国医院药学杂志;2008年13期

2 崔芳囡;贾立群;刘猛;;中医药联合含铂方案治疗老年进展期非小细胞肺癌的临床研究[J];吉林中医药;2012年02期

3 韩兴华;刘乐;;胱抑素-C监测含铂方案化疗对肾功能影响的临床观察[J];蚌埠医学院学报;2011年10期

4 余建国;;盐酸帕洛诺司琼注射液防治恶性肿瘤含铂方案诱发恶心呕吐的效果观察[J];中国当代医药;2013年29期

5 金艺凤;王莹;刘东华;王金艳;孙珍贵;;氨磷汀配合含铂方案治疗晚期肺癌的疗效观察[J];安徽医药;2012年07期

6 倪国汉;低场强MRI在胃癌诊断中的作用[J];放射学实践;2002年02期

7 戴成雨;胃癌20例误诊分析[J];实用医学杂志;2002年03期

8 李秋波,陶智慧,胡奎,韩智,马勇;胃癌术前区域动脉灌注化疗加手术联合治疗的疗效观察(附24例)[J];航空航天医药;2003年03期

9 倪海滨,毛振彪,黄介飞,肖明兵,季颖林,张彦亮,冒海蕾;血清可溶性细胞间粘附分子-1与胃癌临床意义的研究[J];南通医学院学报;2003年01期

10 邢亚莉;姚春霞;唐晓君;刘春梅;;彩超在胃癌诊断中的价值[J];基层医学论坛;2007年17期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 武淑兰;魏志杰;殷宇明;;胃癌致微血管病性溶血性贫血的诊断[A];第十一届全国红细胞疾病学术会议暨学习班论文汇编[C];2007年

2 丁涛;;超声在诊断胃癌中的应用[A];中国超声医学工程学会第三届全国肌肉骨骼超声医学学术交流会论文汇编[C];2011年

3 陈晓康;吕国荣;苏若瑟;;应用彩色能量多普勒血流显像对胃癌的诊断价值[A];庆祝中国超声医学工程学会成立20周年——第八届全国超声医学学术会议论文汇编[C];2004年

4 于吉人;;胃癌的术前系统评估[A];2004年浙江省外科学学术年会论文汇编[C];2004年

5 杨军乐;宁文德;董季平;徐敏;;多层螺旋CT在胃癌诊断中的应用研究[A];中华医学会第十三届全国放射学大会论文汇编（下册）[C];2006年

6 张晓鹏;;胃癌磁共振成像研究进展[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议教育集[C];2006年

7 张丽红;常维平;黄贤会;;螺旋CT在特殊部位胃癌诊断中的应用[A];中国医师协会放射医师分会首届会员大会暨第四届医学影像山东论坛、山东省第16次放射学会议暨山东省第14届医学影像学学术研讨会论文集[C];2007年

8 陈静;;彩色多普勒超声检查在胃癌的应用[A];中国超声医学工程学会第七届全国腹部超声学术会议学术论文汇编[C];2007年

9 刘池波;梁勇;王海宝;杨林军;梁津逍;;胃癌患者中血清淀粉样蛋白A的测定及临床意义[A];第二届中国医学细胞生物学学术大会暨细胞生物学教学改革会议论文集[C];2008年

10 吴厚宾;;腹腔镜在胃癌诊治中的应用进展(综述)[A];江西省第二届胃肠外科学术会议暨江西省第十二次中西医结合普通外科学术会议论文汇编[C];2012年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 钱铮;新技术能提高胃癌诊断准确率[N];中国中医药报;2009年

2 记者 陈青;胃癌患者从“存活”迈向“乐活”[N];文汇报;2010年

3 李楠;胃癌诊断敏感性从不足30%提高到57.4%[N];健康报;2008年

4 通讯员 李楠;胃癌“转化医学”研究见成效[N];上海科技报;2008年

5 记者 楚燕　通讯员 那伟 高树灼;厦门胃癌研究达国际领先水平[N];厦门日报;2009年

6 胡德荣;新型胃癌分子标志物研究获突破[N];中国医药报;2010年

7 本报记者 周芳;改善饮食习惯 早发现早治疗[N];吉林日报;2006年

8 中南大学湘雅二医院 杨燕贻;胃癌防治有哪些错误观念[N];大众卫生报;2005年

9 特约记者 程守勤;胃癌诊断又有新方法[N];家庭医生报;2003年

10 重庆万州 黄琼;胃癌的手术治疗[N];上海中医药报;2013年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 李敏;MicroRNA-200c逆转胃癌细胞顺铂耐药机制及与胃癌患者含铂方案化疗疗效、预后相关性研究[D];安徽医科大学;2017年

2 孙大志;基于microRNA 21的调控作用探讨从痰论治胃癌的作用机制[D];中国人民解放军医学院;2012年

3 陈悦之;TNFAIP8在胃癌中的表达和对调节胃癌细胞增殖，影响侵袭及迁移中的作用研究[D];山东大学;2015年

4 殷继鹏;肿瘤血管靶向肽GX1用于胃癌的分子影像研究[D];第四军医大学;2015年

5 蔡习强;TFEB介导的自噬在胃癌耐药中的作用及其机制研究[D];第四军医大学;2015年

6 赵晓迪;microRNA-7调控胃癌恶性生物学行为的功能与分子机制研究[D];第四军医大学;2015年

7 尚华;MicroRNA-125a在胃癌中表达水平的研究及其临床意义[D];山东大学;2015年

8 关中正;TGF-β在胃癌免疫逃逸中作用及机制研究[D];山东大学;2015年

9 黄勇;AEG-1/MT qDH、NF-κB、MMP-9在胃癌中的表达及相关性的研究[D];山东大学;2015年

10 谢黎明;胃癌中miR-124表达的意义及作用机制研究[D];南华大学;2015年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 申燕;非小细胞肺癌含铂方案化疗与营养的相关性研究[D];昆明医科大学;2016年

2 徐海蓉;胃癌危险因素的流行病学研究[D];南京医科大学;2002年

3 张军利;p27、PTEN与VEGF蛋白在胃癌组织中的表达及其意义[D];泰山医学院;2014年

4 马春婷;胃癌与幽门螺杆菌的相关性研究[D];石河子大学;2015年

5 王士杰;腹腔镜手术治疗进展期远端胃癌的临床疗效及患者术后随访生存质量研究[D];中国人民解放军医学院;2015年

6 李浩;胃癌血清蛋白标记物的筛选与鉴定[D];郑州大学;2015年

7 王巍;胃癌患者血液样品的光谱分析[D];郑州大学;2015年

8 李玉博;高场磁共振在胃癌术前T分期与分级的价值[D];郑州大学;2015年

9 张苏钰;SOX4和P53蛋白在胃癌组织中的表达及贞芪扶正胶囊对胃癌术后辅助治疗作用的观察[D];兰州大学;2015年

10 马来阳;能谱CT成像在胃癌术前分期及分化程度评价中的应用研究[D];兰州大学;2015年

，

本文编号：1300080