基于P53/EGFR/STAT3信号通路探讨加味芍药甘草汤对子宫腺肌细胞增殖和迁移的干预机制
发布时间：2021-01-07 09:15
目的:研究加味芍药甘草汤通过介导miR-27a调控P53/EGFR/STAT3信号通路来治疗子宫腺肌病的干预机制,从分子水平上阐释加味芍药苷草汤治疗子宫腺肌病的深层机理,为进一步研究加味芍药苷草汤有效作用部位和临床优化处方提供实验基础。方法:1.选择自2015年9月至2016年5月在广州中医药大学第一附属医院住院并接受手术治疗的子宫腺肌病患者共10例,取其病灶组织进行细胞培养。2.以免疫化学法鉴定所培养的原代细胞;MTT法和流式细胞技术检测细胞的增殖情况、细胞周期分布和凋亡率;划痕实验以检测细胞的体外迁移能力;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞中 p53-273H、LIF、EGFR、p-EGFR、c-Src、STAT3、p-STAT3、COX-2 的表达;RT-qPCR 技术检测细胞中 p53-273HmRNA、LIFRmRNA、miR-27a、EGFR mRNA的表达。结果:1.本研究共收集了 10例子宫腺肌病病灶组织,均培养成功。原代细胞培养24h后,其中的间质细胞基本贴壁,呈梭形排列;腺上皮细胞则呈漩祸状排列;平滑肌细胞呈长梭形或椭圆形,呈放射、平行排列。2.经免...
【文章来源】：广州中医药大学广东省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２技术路线示意图??
（从左至右依次为角蛋白、波形蛋白、平滑肌肌动蛋白）??２．１．?５讨论??本课题的研究是基于子宫腺肌病病灶细胞体外培养基础上的，故细胞模型的建立??尤为重要。??细胞是人体最基本的单位，具备个体特有的遗传信息和功能特性。细胞培养是功??能基因组和疾病基因组研究中最方便、最快捷的研究工具，可用于生命现象的各项研??究，如细胞的活动及其调控；可应用在对某种疾病的研究，如炎症的发生；也可分析??生物工程相关的问题，如核酸的合成和复制；还可应用在组织工程方面，如千细胞的??组织修复等。??原代细胞培养是利用酶消化、机械或化学方法等单用或联合应用，使细胞从组织、??器官分散处理，在体外进行培养的方法［１１８］。由于原代培养的ＡＭ细胞保持了体内ＡＭ??细胞的性状，故有利于进行相关的检测，是一种较为理想的模型。其次，ＡＭ的发病机??制较为复杂。在动物模型中，常用激素诱导ＡＭ的形成，但此法常并发其他疾病，如??子宫内膜癌等；而垂体移植法则对操作者的技术水平较高的要求，且造模需要的时间??较长［１１９］。与动物模型相比，ＡＭ病灶细胞体外培养更利于反映在体情况，而且实验条??
（从左至右依次为角蛋白、波形蛋白、平滑肌肌动蛋白）??２．１．?５讨论??本课题的研究是基于子宫腺肌病病灶细胞体外培养基础上的，故细胞模型的建立??尤为重要。??细胞是人体最基本的单位，具备个体特有的遗传信息和功能特性。细胞培养是功??能基因组和疾病基因组研究中最方便、最快捷的研究工具，可用于生命现象的各项研??究，如细胞的活动及其调控；可应用在对某种疾病的研究，如炎症的发生；也可分析??生物工程相关的问题，如核酸的合成和复制；还可应用在组织工程方面，如千细胞的??组织修复等。??原代细胞培养是利用酶消化、机械或化学方法等单用或联合应用，使细胞从组织、??器官分散处理，在体外进行培养的方法［１１８］。由于原代培养的ＡＭ细胞保持了体内ＡＭ??细胞的性状，故有利于进行相关的检测，是一种较为理想的模型。其次，ＡＭ的发病机??制较为复杂。在动物模型中，常用激素诱导ＡＭ的形成，但此法常并发其他疾病，如??子宫内膜癌等；而垂体移植法则对操作者的技术水平较高的要求，且造模需要的时间??较长［１１９］。与动物模型相比，ＡＭ病灶细胞体外培养更利于反映在体情况，而且实验条??
【参考文献】：
期刊论文
[1]三七总皂苷对神经胶质瘤细胞增殖、迁移及凋亡的影响[J]. 孙树凯,马磊,张海红,贾栋. 神经解剖学杂志. 2016(05)
[2]三七皂苷Ft1抑制乳腺癌细胞增殖、迁移及促进凋亡的机制研究[J]. 邱水平,李鸿丽,石海莲,吴辉,黄菲,张蓓蓓,吴晓俊,王峥涛. 药学学报. 2016(07)
[3]磷酸化信号转导和转录激活因子3（Y705）在子宫腺肌症中的表达及其临床意义[J]. 王静,杨阳,杨宁,邓晓惠,杨兴升,晁岚. 解剖学报. 2016(02)
[4]腹腔镜病灶切除术联合左炔诺孕酮宫内缓释系统治疗子宫腺肌症的疗效观察[J]. 赵蓉,王丽梅,顾玉婵,陈圆,魏特曼,吴楠,王树鹤. 中国妇产科临床杂志. 2016(01)
[5]甘草查尔酮A对小鼠黑色素瘤B16F10细胞体外迁移能力的影响[J]. 马晓懿,杨新惠,郑秋生. 中国实验方剂学杂志. 2015(18)
[6]三七抗肿瘤作用实验研究概况[J]. 张静宇,张静波. 环球中医药. 2015(08)
[7]中药芍药甘草汤基原及药效组分和药理作用研究概况[J]. 朱广伟,张贵君,汪萌,王晶娟,渠磊,蔡悦萍. 中华中医药杂志. 2015(08)
[8]甘草次酸C3、C30衍生物的合成及其体外抗肿瘤活性研究[J]. 孟艳秋,刘立伟,刘冬莹,王向磊,傅谟宏. 现代药物与临床. 2015(06)
[9]腹腔镜下子宫动脉阻断术结合中药治疗子宫腺肌症的临床观察[J]. 张小强,惠新平. 中国冶金工业医学杂志. 2015(03)
[10]活血消癥法治疗子宫腺肌病临床观察[J]. 李梅,金季玲. 山西中医. 2015(04)
博士论文
[1]子宫腺肌病ER及miR-21介导的Ras/Raf通路作用机制及加味芍药甘草汤对其的干预[D]. 曾玉燕.广州中医药大学 2015
[2]加味芍药甘草汤对子宫腺肌病MAPK/ERK信号通路干预机制[D]. 王帅.广州中医药大学 2015
[3]P53突变体获得性功能在肿瘤发生中作用机制的研究[D]. 王文宇.中国科学技术大学 2013
硕士论文
[1]琥珀散加减治疗子宫腺肌病痛经（寒凝血瘀证）的临床观察[D]. 于淼.长春中医药大学 2012
本文编号：2962297
【文章来源】：广州中医药大学广东省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２技术路线示意图??
（从左至右依次为角蛋白、波形蛋白、平滑肌肌动蛋白）??２．１．?５讨论??本课题的研究是基于子宫腺肌病病灶细胞体外培养基础上的，故细胞模型的建立??尤为重要。??细胞是人体最基本的单位，具备个体特有的遗传信息和功能特性。细胞培养是功??能基因组和疾病基因组研究中最方便、最快捷的研究工具，可用于生命现象的各项研??究，如细胞的活动及其调控；可应用在对某种疾病的研究，如炎症的发生；也可分析??生物工程相关的问题，如核酸的合成和复制；还可应用在组织工程方面，如千细胞的??组织修复等。??原代细胞培养是利用酶消化、机械或化学方法等单用或联合应用，使细胞从组织、??器官分散处理，在体外进行培养的方法［１１８］。由于原代培养的ＡＭ细胞保持了体内ＡＭ??细胞的性状，故有利于进行相关的检测，是一种较为理想的模型。其次，ＡＭ的发病机??制较为复杂。在动物模型中，常用激素诱导ＡＭ的形成，但此法常并发其他疾病，如??子宫内膜癌等；而垂体移植法则对操作者的技术水平较高的要求，且造模需要的时间??较长［１１９］。与动物模型相比，ＡＭ病灶细胞体外培养更利于反映在体情况，而且实验条??
（从左至右依次为角蛋白、波形蛋白、平滑肌肌动蛋白）??２．１．?５讨论??本课题的研究是基于子宫腺肌病病灶细胞体外培养基础上的，故细胞模型的建立??尤为重要。??细胞是人体最基本的单位，具备个体特有的遗传信息和功能特性。细胞培养是功??能基因组和疾病基因组研究中最方便、最快捷的研究工具，可用于生命现象的各项研??究，如细胞的活动及其调控；可应用在对某种疾病的研究，如炎症的发生；也可分析??生物工程相关的问题，如核酸的合成和复制；还可应用在组织工程方面，如千细胞的??组织修复等。??原代细胞培养是利用酶消化、机械或化学方法等单用或联合应用，使细胞从组织、??器官分散处理，在体外进行培养的方法［１１８］。由于原代培养的ＡＭ细胞保持了体内ＡＭ??细胞的性状，故有利于进行相关的检测，是一种较为理想的模型。其次，ＡＭ的发病机??制较为复杂。在动物模型中，常用激素诱导ＡＭ的形成，但此法常并发其他疾病，如??子宫内膜癌等；而垂体移植法则对操作者的技术水平较高的要求，且造模需要的时间??较长［１１９］。与动物模型相比，ＡＭ病灶细胞体外培养更利于反映在体情况，而且实验条??
【参考文献】：
期刊论文
[1]三七总皂苷对神经胶质瘤细胞增殖、迁移及凋亡的影响[J]. 孙树凯,马磊,张海红,贾栋. 神经解剖学杂志. 2016(05)
[2]三七皂苷Ft1抑制乳腺癌细胞增殖、迁移及促进凋亡的机制研究[J]. 邱水平,李鸿丽,石海莲,吴辉,黄菲,张蓓蓓,吴晓俊,王峥涛. 药学学报. 2016(07)
[3]磷酸化信号转导和转录激活因子3（Y705）在子宫腺肌症中的表达及其临床意义[J]. 王静,杨阳,杨宁,邓晓惠,杨兴升,晁岚. 解剖学报. 2016(02)
[4]腹腔镜病灶切除术联合左炔诺孕酮宫内缓释系统治疗子宫腺肌症的疗效观察[J]. 赵蓉,王丽梅,顾玉婵,陈圆,魏特曼,吴楠,王树鹤. 中国妇产科临床杂志. 2016(01)
[5]甘草查尔酮A对小鼠黑色素瘤B16F10细胞体外迁移能力的影响[J]. 马晓懿,杨新惠,郑秋生. 中国实验方剂学杂志. 2015(18)
[6]三七抗肿瘤作用实验研究概况[J]. 张静宇,张静波. 环球中医药. 2015(08)
[7]中药芍药甘草汤基原及药效组分和药理作用研究概况[J]. 朱广伟,张贵君,汪萌,王晶娟,渠磊,蔡悦萍. 中华中医药杂志. 2015(08)
[8]甘草次酸C3、C30衍生物的合成及其体外抗肿瘤活性研究[J]. 孟艳秋,刘立伟,刘冬莹,王向磊,傅谟宏. 现代药物与临床. 2015(06)
[9]腹腔镜下子宫动脉阻断术结合中药治疗子宫腺肌症的临床观察[J]. 张小强,惠新平. 中国冶金工业医学杂志. 2015(03)
[10]活血消癥法治疗子宫腺肌病临床观察[J]. 李梅,金季玲. 山西中医. 2015(04)
博士论文
[1]子宫腺肌病ER及miR-21介导的Ras/Raf通路作用机制及加味芍药甘草汤对其的干预[D]. 曾玉燕.广州中医药大学 2015
[2]加味芍药甘草汤对子宫腺肌病MAPK/ERK信号通路干预机制[D]. 王帅.广州中医药大学 2015
[3]P53突变体获得性功能在肿瘤发生中作用机制的研究[D]. 王文宇.中国科学技术大学 2013
硕士论文
[1]琥珀散加减治疗子宫腺肌病痛经（寒凝血瘀证）的临床观察[D]. 于淼.长春中医药大学 2012
本文编号：2962297
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/2962297.html
教材专著
