Sema4C在宫颈癌中调节上皮间质转化及其机制研究

发布时间：2021-02-03 08:07

　　背景与目的:尽管诊断和筛查技术提高,以及有疫苗可用,宫颈癌仍是世界范围内女性肿瘤相关死亡的第三大原因,盆腔淋巴结转移是一个重要的宫颈癌复发或死亡的危险因素。FIGO2018分期系统,首次提出病理学及影像学检查结果用于分期,宫颈癌临床分期首次向手术病理分期靠近,淋巴结转移纳入分期,使宫颈癌的诊治发生变革。开展宫颈癌的早期普查,使得宫颈癌尽量可以得到早发现早治疗,但是由于缺乏有效的生物标记,在首次手术之前仍不能准确评估是否有淋巴转移,使得一些患者未得到标准的治疗。于是寻找宫颈癌淋巴结转移有关的机制通路和候选基因意义重大。肿瘤的病理EMT过程中导致细胞的形态向间充质细胞转变,被认为在癌症进展中起重要作用,并与预后不良有关。EMT在宫颈癌的淋巴转移中起重要作用,具有EMT表型的宫颈癌表现出肿瘤进展,侵袭转移能力提高,对化疗药物及放疗不敏感。因此一些可以持续激活宫颈癌细胞EMT的因子,可以成为评估宫颈癌预后的指标和作为宫颈癌侵袭转移的治疗的靶点。转录生长因子-β家族诱导的EMT在生长发育和肿瘤形成中起重要作用。在晚期宫颈癌中TGF-β1在细胞外的水平增加,用TGF-β1处理宫颈癌细胞系不仅导致了... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：106 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

宫颈癌EMT有关的信号通路

利用公共网站按照RNA干扰序列设计原则,针对人Sema4C基因序列,设计多个RNA干扰靶点序列,依据前期研究[47]基础选择具有最佳的动力学参数靶点进入后续试验流程;由上海吉凯公司合成含干扰序列的双链DNA,连接在酶切后的RNA干扰载体上。将连接好的产物进行转化,对长出的克隆进行PCR鉴定及测序比对,正确的克隆即为构建成功的目的基因RNA干扰慢病毒载体(见图2.1)。shRNA慢病毒信息单

按照实验方法2.2.2和2.2.3通过Realtime-PCR和Western blot分别检测三株宫颈癌细胞中Sema4C mRNA和SEMA4C蛋白的表达水平。结果显示在基因水平和蛋白水平三株细胞中都有Sema4C表达,C33A中Sema4C表达量相对偏高最高,Hela次之,SiHa中表达量相比前两者低,三者之间的表达差异无统计学意义(P>0.05)。(图2.3.1)表明Sema4C在宫颈癌细胞系中普遍表达,本实验选用相对表达量居中的Hela细胞做为实验细胞。2.3.2 Sema4C-shRNA慢病毒的感染效率和封闭效应

【参考文献】：
期刊论文
[1]《国际妇产科联盟（FIGO）2018癌症报告:宫颈癌新分期及诊治指南》解读[J]. 李静,索红燕,孔为民.  中国临床医生杂志. 2019(06)
[2]Twist及YB-1基因表达上调与子宫颈癌上皮间质转化的相关性[J]. 李旻,关弘,胡新荣,王鹰,魏茜,杨青凤.  中华病理学杂志. 2015 (08)
[3]Semaphorin4C在乳腺癌 子宫内膜癌及前列腺癌中的表达及意义[J]. 陈颖,张磊,刘文欣,王耕辛,吴明富,马丁,郝权.  中国肿瘤临床. 2010(09)

博士论文
[1]初步探讨Sema4C在乳腺癌免疫逃逸中的作用[D]. 胥琴.华中科技大学 2014
[2]SEMA4C调节肿瘤微环境中肿瘤细胞和淋巴内皮细胞的交互作用促进肿瘤淋巴转移[D]. 蒋学锋.华中科技大学 2010



本文编号：3016178