新型多肽探针的设计及在检测前列腺癌细胞中的应用研究

发布时间：2021-02-04 07:49

　　背景:前列腺癌是老年男性好发的肿瘤之一。在临床中大多数患者确诊为前列腺癌时已处于中晚期,失去了完全治愈的机会。目前前列腺癌的筛查诊断主要依据血清PSA检测和直肠指检,但是上述检测方法具有明显的局限性。因此寻找可以早期诊断前列腺癌的新型生物标志物成为了迫切的需求。锌和铜离子与前列腺癌发生发展的关系为早期诊断前列腺癌提供了新的方法。通过比较前列腺正常上皮细胞和前列腺癌细胞对于锌、铜离子富集能力的差异,则可区分正常细胞和癌细胞,从而达到早期诊断前列腺癌的目的。利用荧光探针技术检测生物体内金属离子成为了近些年的研究热点,可视化检测的优点让此技术非常适合应用于医学研究与疾病诊断。目前已有多种类型性能表现良好的荧光探针被相继报道,其中尤以多肽类探针表现最为引人注目。目的:本文依据不同原理设计了可特异性检测锌和铜离子的多肽荧光探针,旨在利用多肽探针成像检测前列腺正常上皮细胞和前列腺癌细胞内锌、铜离子的含量,通过对比细胞之间富集锌、铜离子能力的差异,从而实现前列腺癌的早期诊断。方法:1.利用固相合成法合成基于多肽的锌离子探针L、H₂L和铜离子探针DP5;2.通过荧光光谱检测探针对... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：110 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

DP5的合成路线图

在此基础上,我们检测了DP5的抗干扰能力,以确定它是否能在复杂的环境中实现对于Cu2+离子的检测。如图4-2b所示,黑色柱状代表DP5单独存在时测定的荧光强度。红色柱状代表DP5对于各种等量的离子的荧光响应,而蓝色柱状代表在其它离子存在的情况下,DP5对于Cu2+的识别结果。从图中可以看出DP5能够特异性的识别检测Cu2+,并且在其余金属离子存在的情况下也未受到明显的影响。作为荧光探针,DP5具有良好的抗干扰能力且能够胜任特异识别检测Cu2+离子。4.4.3 荧光滴定实验

我们用Cu2+离子对DP5进行了荧光滴定研究。随着Cu2+的逐渐加入,探针DP5(10μM)在560 nm处的荧光强度也在逐渐降低(图4-3a)。如图4-3b所示,在所加Cu2+为0.5 equiv时,滴定曲线也开始进入平台期。这个结果提示DP5与Cu2+离子的结合比例为2:1。此外,图4-3b的插图为加入0.5 equiv Cu2+离子时,DP5溶液在365 nm紫外灯下颜色发生改变由黄绿色变为无色。4.4.4 Job工作曲线测定

【参考文献】：
期刊论文
[1]最大雄激素阻断与单纯去势治疗转移性前列腺癌比较(英文)[J]. Abeer A.Mahmoud,Eman A.El-Sharawy,Mohamed M.El-Bassiouny,Ramy R.Ghali.  The Chinese-German Journal of Clinical Oncology. 2014(09)
[2]锌及ZIP家族与前列腺癌关系的研究进展[J]. 王芝千,陈卫民.  临床医学工程. 2010(01)



本文编号：3017987