“脊髓康”治疗脊髓损伤的临床观察及其促进脊髓损伤后神经再生的实验研究
发布时间：2021-03-08 10:50
背景脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）后神经再生困难是世界性难题。脊髓损伤后如何改善病损局部微环境、延缓继发性损伤进展、促进神经元再生修复是治疗关键点。胶质疤痕的过度增生被认为是损伤后神经轴突不能再生并穿越损伤处的主要原因之一。中药“脊髓康”为无锡市中医医院临床经验方,前期研究发现具有镇痛、抗炎、促进神经营养因子表达等作用。然而,“脊髓康”促进脊髓损伤修复的作用机制尚不完全清楚。基于此,我们设计临床研究、基础实验,评价“脊髓康”治疗脊髓损伤的疗效,探讨其抑制星形胶质细胞活化促进脊髓损伤修复的机制,为其治疗脊髓损伤提供科学依据。目的（1）分析“脊髓康”促进脊髓损伤患者神经功能康复的疗效,探讨影响脊髓损伤患者神经功能恢复的相关因素;（2）观察大鼠脊髓损伤后脊髓组织中星形胶质细胞的动态表达情况,探讨星形胶质细胞在神经再生过程中的作用和意义;（3）观察“脊髓康”对大鼠脊髓损伤后病损区域组织结构、大鼠肌力的影响,评价“脊髓康”促进大鼠神经功能再生的疗效;（4）观察“脊髓康”对大鼠脊髓损伤后星形胶质细胞形态、GFAP、CSPG蛋白表达的影响,探讨其促进脊髓损伤后神经再生的作用...
【文章来源】：南京中医药大学江苏省
【文章页数】：108 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２?Ｃ假手术组Ｄ模型组大鼠（ＧＦＡＰ染色ｘｌ〇〇倍）??２．２组ＧＦＡＰ蛋Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ
?第三部分脊髓康促进脊髓损伤后神经再生的实验研究???１４ｄ??賺．，??ＧＦＡＰ?？一??ＧＡＰＨＤ??（图３?１：模型组２：假手术组）??组别?３ｄ?７ｄ?１４ｄ??假手术组?０．３３４±０．００１?０．３５６±０．００２?０．３９７±０．００３??模型组?０．２２５±０．００５ａ?０．４５１±０．００５ａ?０．４７８±０．００１ａ??表１各组大鼠脊髓组织中ＧＦＡＰ蛋白表达相对水平（Ｙ±Ｓ，ｎ＝３）??注：与假手术组比较，ａＰ＜〇．〇５??２．３各组大鼠ＧＦＡＰ?ｍＲＮＡ动态表达??不同时间点正常组脊髓损伤区ＧＦＡＰｍＲＮＡ表达量较为恒定，长时间保持为１；??未经造模的大鼠，在实验过程中的三个时间点，采样后行ＧＦＡＰｍＲＮＡ检测，数值??同正常组大鼠相比，无统计学差异（Ｐ＞０．０５）。大鼠成功造模后在开始阶段ＧＦＡＰ??ｍＲＮＡ表达低，３天后表达量逐渐上升，并第７天到达最高值，其后数据逐步降低，??但其高峰后的最低值仍高于假手术组。成功造模的大鼠，在实验过程中的三个时间??点，标本采样后行ＧＦＡＰ?ｍＲＮＡ检测，数值同正常大鼠相比有统计学差异（Ｐ＜?０．０５）。??（见表２）??组别?３ｄ?７ｄ?１４ｄ??假手术组?１．１３±０．０３?１．０３±０．０４?丨．１２±０．０２??模型组?０．３４?土?０．０２＊?１．６５?±０．０２＊?Ｌ５７±０．０３＊??表２各组大鼠脊髓组织中ＧＦＡＰ的动态变化（Ｙ±Ｓ，?ｎ＝３）??３小结??近年来，因脊髓损伤的修复难度高、患者致残率大，一直是科学研究的热点。??多年来的研究并未攻克这一难题。如何改善病损局部微环境、延缓继发性损伤进展、??促进
?南京中医药大学博士学位论文???Ｕ１斜板实验、肌力检测评价??斜板实验：将ＳＤ大鼠置于倾斜木板顶端，观察其下落角度。以其能够静止于??板上的最大角度为指标。随机抽取ＳＤ大鼠，在规定时间点，完成测试。??肌力：按改良的Ｔａｒｌｏｖ标准评价ＳＣＩ后肌力情况。分为五个等级：１分，大鼠??后肢未见肌肉收缩；２分，大鼠后肢可见肌肉收缩，无关节活动；３分，后肢肌肉??收缩、无法站立；４分，能站立，但行走不能；５分，大鼠后肢肌力正常。各组大鼠??术前均为５分。随机抽取ＳＤ大鼠，在规定时间点，完成测试。??２结果??２．１大鼠脊髓组织ＨＥ染色??假手术组可见分散的星形胶质细胞，无明显出血灶和明显的星形胶质细胞肥??大。模型组病变区神经纤维受损，局部出血灶，大量星形胶质细胞增殖并相互连接。??脊髓康组（高剂量、低剂量）中可见肥大的星形胶质细胞，与假手术组相比，胶质??增生明显。强的松组均可见星形细胞与少突胶质细胞，相对于脊髓康组，数量减少，??星形细胞有部分肥大（见图１）。??■■??假手术组?模型组??誓唤＃托謂々麵金．養??Ｏｆ－．：：?？??强的松组?脊髓康组??（图１?ＨＥ染色，放大倍数Ｘ２００）??２．２大鼠脊髓组织Ｎｉｓｓｌ染色??尼氏体广泛存在于细胞质。在机体内它的功能是合成蛋白质并为神经活动提供??能量。与ＨＥ染色相比，Ｎｉｓｓｌ染色能更清楚地观察神经元的细胞结构，并能确定神??经元的损伤程度。未经造模的大鼠脊髓组织内可见尼氏体无异常，正常的胞仁、胞??４７??
本文编号：3070926
【文章来源】：南京中医药大学江苏省
【文章页数】：108 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２?Ｃ假手术组Ｄ模型组大鼠（ＧＦＡＰ染色ｘｌ〇〇倍）??２．２组ＧＦＡＰ蛋Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ
?第三部分脊髓康促进脊髓损伤后神经再生的实验研究???１４ｄ??賺．，??ＧＦＡＰ?？一??ＧＡＰＨＤ??（图３?１：模型组２：假手术组）??组别?３ｄ?７ｄ?１４ｄ??假手术组?０．３３４±０．００１?０．３５６±０．００２?０．３９７±０．００３??模型组?０．２２５±０．００５ａ?０．４５１±０．００５ａ?０．４７８±０．００１ａ??表１各组大鼠脊髓组织中ＧＦＡＰ蛋白表达相对水平（Ｙ±Ｓ，ｎ＝３）??注：与假手术组比较，ａＰ＜〇．〇５??２．３各组大鼠ＧＦＡＰ?ｍＲＮＡ动态表达??不同时间点正常组脊髓损伤区ＧＦＡＰｍＲＮＡ表达量较为恒定，长时间保持为１；??未经造模的大鼠，在实验过程中的三个时间点，采样后行ＧＦＡＰｍＲＮＡ检测，数值??同正常组大鼠相比，无统计学差异（Ｐ＞０．０５）。大鼠成功造模后在开始阶段ＧＦＡＰ??ｍＲＮＡ表达低，３天后表达量逐渐上升，并第７天到达最高值，其后数据逐步降低，??但其高峰后的最低值仍高于假手术组。成功造模的大鼠，在实验过程中的三个时间??点，标本采样后行ＧＦＡＰ?ｍＲＮＡ检测，数值同正常大鼠相比有统计学差异（Ｐ＜?０．０５）。??（见表２）??组别?３ｄ?７ｄ?１４ｄ??假手术组?１．１３±０．０３?１．０３±０．０４?丨．１２±０．０２??模型组?０．３４?土?０．０２＊?１．６５?±０．０２＊?Ｌ５７±０．０３＊??表２各组大鼠脊髓组织中ＧＦＡＰ的动态变化（Ｙ±Ｓ，?ｎ＝３）??３小结??近年来，因脊髓损伤的修复难度高、患者致残率大，一直是科学研究的热点。??多年来的研究并未攻克这一难题。如何改善病损局部微环境、延缓继发性损伤进展、??促进
?南京中医药大学博士学位论文???Ｕ１斜板实验、肌力检测评价??斜板实验：将ＳＤ大鼠置于倾斜木板顶端，观察其下落角度。以其能够静止于??板上的最大角度为指标。随机抽取ＳＤ大鼠，在规定时间点，完成测试。??肌力：按改良的Ｔａｒｌｏｖ标准评价ＳＣＩ后肌力情况。分为五个等级：１分，大鼠??后肢未见肌肉收缩；２分，大鼠后肢可见肌肉收缩，无关节活动；３分，后肢肌肉??收缩、无法站立；４分，能站立，但行走不能；５分，大鼠后肢肌力正常。各组大鼠??术前均为５分。随机抽取ＳＤ大鼠，在规定时间点，完成测试。??２结果??２．１大鼠脊髓组织ＨＥ染色??假手术组可见分散的星形胶质细胞，无明显出血灶和明显的星形胶质细胞肥??大。模型组病变区神经纤维受损，局部出血灶，大量星形胶质细胞增殖并相互连接。??脊髓康组（高剂量、低剂量）中可见肥大的星形胶质细胞，与假手术组相比，胶质??增生明显。强的松组均可见星形细胞与少突胶质细胞，相对于脊髓康组，数量减少，??星形细胞有部分肥大（见图１）。??■■??假手术组?模型组??誓唤＃托謂々麵金．養??Ｏｆ－．：：?？??强的松组?脊髓康组??（图１?ＨＥ染色，放大倍数Ｘ２００）??２．２大鼠脊髓组织Ｎｉｓｓｌ染色??尼氏体广泛存在于细胞质。在机体内它的功能是合成蛋白质并为神经活动提供??能量。与ＨＥ染色相比，Ｎｉｓｓｌ染色能更清楚地观察神经元的细胞结构，并能确定神??经元的损伤程度。未经造模的大鼠脊髓组织内可见尼氏体无异常，正常的胞仁、胞??４７??
本文编号：3070926
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