脂肪己糖-6-磷酸脱氢酶在肥胖及胰岛素抵抗发生中的作用及机制研究

发布时间：2021-03-30 19:24

　　目的:肥胖是一种严重危害公共健康的代谢性疾病,并显著增加了 2型糖尿病及代谢综合征的发病风险。糖皮质激素（GCs）是一种肾上腺皮质分泌的类固醇激素,能够调节糖及脂肪代谢。过多的GCs生成或摄入能够诱发肥胖及代谢综合征。1lβ-HSD1依赖内质网腔内NADPH能够促进组织GCs的生成,并已成为肥胖及代谢综合征的主要发病因素。已糖-6-磷酸脱氢酶（H6PDH）是内质网腔内生成NADPH的关键酶,进而影响了组织11β-HSD1的活性。然而,H6PDH在调节脂肪组织GCs的生成及其在肥胖及胰岛素抵抗发生中的作用及分子机制目前仍不明确。本研究拟利用脂肪组织特异性H6PDH过表达和敲除小鼠模型,观察小鼠代谢表现型变化,并探索脂肪组织H6PDH在调节脂肪GCs代谢及其诱发的肥胖、胰岛素抵抗发生中的作用及分子机制,为临床预防、治疗肥胖及代谢综合征的发生提供新的靶点及理论基础。方法:1.脂肪H6PDH过表达在诱发腹部肥胖及胰岛素抵抗中的作用及分子机制利用本实验组已经建立的脂肪组织H6PDH过表达（aP2-H6PDH-Tg）小鼠模型,将孵育的小鼠进行基因型分析,确定脂肪组织H6PDH过表达（aP2-H6P... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：147 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

脂肪组织H6PDH过表达小鼠实验流程

吉林大学博士学位论文42图2.2aP2-H6PDH小鼠（Tg）和对照组小鼠（WT）基因型鉴定我们通过实时RT-PCR和Westernblot检测了脂肪组织H6PDHmRNA和蛋白表达水平。如图2.3A显示，aP2-H6PDH小鼠的白色附睾脂肪和肠系膜脂肪H6PDHmRNA表达水平为对照组小鼠的3.2倍和2.6倍（P<0.01），皮下脂肪H6PDHmRNA表达较对照组增加了1.4倍（P<0.01）。同时，脂肪组织微粒体H6PDH的活性分析显示，aP2-H6PDH小鼠的皮下脂肪及附睾脂肪中NADPH的生成明显增多，在反应20分钟时，aP2-H6PDH小鼠脂肪组织中NADPH的生成量为WT对照组的4.3倍（P<0.01，图2.3B）。图2.3aP2-H6PDH小鼠和对照组小鼠脂肪组织H6PDHmRNA表达及活性分析A.aP2-H6PDH（Tg）小鼠和对照组（WT）小鼠附睾脂肪（Epi），肠系膜脂肪（Mes）和皮下脂肪（Sub）H6PDHmRNA表达水平，并根据18S进行同定分析；B.小鼠附睾脂肪及皮下脂肪H6PDH活性分析。**P<0.01vsWT小鼠。

吉林大学博士学位论文42图2.2aP2-H6PDH小鼠（Tg）和对照组小鼠（WT）基因型鉴定我们通过实时RT-PCR和Westernblot检测了脂肪组织H6PDHmRNA和蛋白表达水平。如图2.3A显示，aP2-H6PDH小鼠的白色附睾脂肪和肠系膜脂肪H6PDHmRNA表达水平为对照组小鼠的3.2倍和2.6倍（P<0.01），皮下脂肪H6PDHmRNA表达较对照组增加了1.4倍（P<0.01）。同时，脂肪组织微粒体H6PDH的活性分析显示，aP2-H6PDH小鼠的皮下脂肪及附睾脂肪中NADPH的生成明显增多，在反应20分钟时，aP2-H6PDH小鼠脂肪组织中NADPH的生成量为WT对照组的4.3倍（P<0.01，图2.3B）。图2.3aP2-H6PDH小鼠和对照组小鼠脂肪组织H6PDHmRNA表达及活性分析A.aP2-H6PDH（Tg）小鼠和对照组（WT）小鼠附睾脂肪（Epi），肠系膜脂肪（Mes）和皮下脂肪（Sub）H6PDHmRNA表达水平，并根据18S进行同定分析；B.小鼠附睾脂肪及皮下脂肪H6PDH活性分析。**P<0.01vsWT小鼠。

【参考文献】：
期刊论文
[1]中国成人超重和肥胖症预防与控制指南(节录)[J]. 中国肥胖问题工作组.  营养学报. 2004(01)



本文编号：3110016