小胶质细胞在早期生活应激所致行为异常中的作用机制研究

发布时间：2021-04-23 21:27

　　人类或其他哺乳动物发育早期经历的事件刺激,例如母爱忽视、虐待、食物短缺、精神压力、疾病和感染等,对其后期发育过程中的认知和心理健康产生重大影响。个体所经历早期应激事件后产生的免疫记忆等痕迹通过复杂的分子和细胞机制,以表观遗传和细胞的可塑性改变等方式保存下来,进而影响个体发育后期中枢神经系统对应激事件的响应水平。动物和临床实验表明,中枢神经系统的炎症因子失衡是个体心理和行为异常的重要诱发因素。对早期应激动物中枢神经系统内环境变化的基础研究,为这类应激所致的心理发育异常的临床治疗和药物开发提供了重要参考。在本研究中,我们通过母婴分离的方法建立C57BL/6J小鼠的早期应激（Early life stress,ELS）模型,研究这一应激模式中小胶质细胞的表型及相关分子标记的变化,分别从细胞和分子层面探索调控小胶质细胞表型对早期应激子代个体精神病理进程的影响。研究主要分以下几个方面:1.研究早期应激子代小鼠对二次应激的行为响应。与对照组相比,早期应激小鼠在抑郁和焦虑样行为检测中的表现并未显示出统计学上的显著性差异,综合性抑郁评分显示无明显抑郁样症状。在给予青春期小鼠短期的阈下束缚应激（Chro... 

【文章来源】：电子科技大学四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：112 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
abstract
缩略词表
第一章 绪论
    1.1 早期应激与神经病理的研究现状
        1.1.1 早期应激的研究背景
        1.1.2 早期应激动物模型的建立与发展
    1.2 小胶质细胞参与应激介导的神经免疫和行为调控
        1.2.1 小胶质细胞与应激响应
        1.2.2 中枢免疫调节失衡与行为异常
        1.2.3 小胶质细胞激活表型与神经发生
        1.2.4 小胶质细胞与抑郁症
    1.3 早期应激的生理及行为学影响
        1.3.1 早期应激对小胶质细胞表型的影响
        1.3.2 早期应激与神经发生
        1.3.3 早期应激与应激敏感性
    1.4 PPARγ调控小胶质细胞表型与应激响应水平
        1.4.1 PPARγ与神经免疫调节
        1.4.2 PPARγ与应激反应调控
    1.5 本研究的目的和意义
    1.6 本研究的内容与结构
        1.6.1 论文研究内容
        1.6.2 论文结构安排
第二章 早期应激所致子代行为及小胶质细胞表型的改变
    2.1 引言
    2.2 实验材料与方法
        2.2.1 实验动物
        2.2.2 早期应激和二次应激
        2.2.3 米诺环素给药
        2.2.4 行为学检测
        2.2.5 免疫组织化学染色
        2.2.6 实时荧光定量PCR
        2.2.7 统计学分析
    2.3 结果
        2.3.1 早期应激对子代行为的影响
        2.3.2 二次应激对子代行为的影响
        2.3.3 早期应激对小胶质细胞表型的影响
        2.3.4 二次应激对小胶质细胞表型的影响
    2.4 讨论
    2.5 本章小结
第三章 调控小胶质细胞表型改善海马区内环境稳态和神经发生
    3.1 引言
    3.2 实验材料与方法
        3.2.1 实验动物
        3.2.2 早期应激和二次应激
        3.2.3 实时荧光定量PCR
        3.2.4 蛋白质免疫印迹
        3.2.5 免疫组织化学染色
        3.2.6 统计学分析
    3.3 结果
        3.3.1 米诺环素缓解早期应激和二次应激所致海马区炎症因子失衡
        3.3.2 米诺环素改善早期应激和二次应激所致神经发生异常
    3.4 讨论
    3.5 本章小结
第四章 PPARγ参与调控早期应激所致的小胶质细胞表型转换
    4.1 引言
    4.2 实验材料与方法
        4.2.1 实验动物
        4.2.2 行为学检测
        4.2.3 动物筛选
        4.2.4 免疫组织化学染色
        4.2.5 实时荧光定量PCR
        4.2.6 酶联免疫吸附测试
        4.2.7 统计学分析
    4.3 结果
        4.3.1 早期应激小鼠不同应激敏感型的行为学差异
        4.3.2 早期应激小鼠的应激敏感性与小胶质细胞的激活表型相关
        4.3.3 PPARγ表达水平与子代应激敏感性的关联
    4.4 讨论
    4.5 本章小结
第五章 调控PPARγ缓解早期应激对子代行为和神经发生的影响
    5.1 引言
    5.2 材料与方法
        5.2.1 实验动物
        5.2.2 早期应激和二次应激
        5.2.3 行为学检测
        5.2.4 吡格列酮和GW9662给药
        5.2.5 免疫组织化学染色
        5.2.6 实时荧光定量PCR
        5.2.7 蛋白质免疫印迹
        5.2.8 原代小胶质细胞培养
        5.2.9 原代神经干细胞培养
        5.2.10 神经干细胞的条件培养
        5.2.11 统计学分析
    5.3 结果
        5.3.1 调节PPARγ影响子代小鼠的应激敏感性
        5.3.2 激活PPARγ调控小胶质细胞激活表型
        5.3.3 激活PPARγ改善早期应激子代海马区神经发生异常
        5.3.4 小胶质细胞条件培养基对神经前体细胞增殖和分化的影响
    5.4 讨论
    5.5 本章小结
第六章 米诺环素调节小胶质细胞表型与PPARγ的关联
    6.1 引言
    6.2 实验材料与方法
        6.2.1 实验动物
        6.2.2 早期应激和二次应激
        6.2.3 米诺环素和GW9662给药
        6.2.4 行为学检测
        6.2.5 免疫组织化学染色
        6.2.6 实时荧光定量PCR
        6.2.7 蛋白质免疫印迹
        6.2.8 统计学分析
    6.3 结果
        6.3.1 米诺环素调节原代小胶质细胞PPARγ的表达水平
        6.3.2 PPARγ信号影响米诺环素对早期应激子代行为的调控作用
    6.4 讨论
    6.5 本章小结
第七章 总结与展望
    7.1 本研究工作总结
    7.2 后续工作展望
致谢
参考文献
攻读博士学位期间取得的成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]Minocycline targets multiple secondary injury mechanisms in traumatic spinal cord injury[J]. Robert B.Shultz,Yinghui Zhong.  Neural Regeneration Research. 2017(05)



本文编号：3156071