慢性痛诱发背根节神经元新生的初步研究

发布时间：2021-05-06 19:08

　　慢性疼痛是世界范围内最常见的慢性疾病之一,如炎症痛、神经病理性痛和癌痛。常常引起焦虑与抑郁,从而加重患者的经济和心理负担。关于慢性痛的机制,研究最多的是神经元的可塑性改变。其中初级感觉神经元的过度兴奋和敏化（外周敏化）,以及由转录、翻译和翻译后调节引起的脊髓、脑干和皮层神经元兴奋性突触传递的增强（中枢敏化）是目前认为最主要的两种机制。其它的神经元机制包括去抑制（减少抑制性突触传递）,下行途径易化（如从脑干到脊髓）,以及皮层和脊髓的长时程增强。这些神经元的改变参与持续疼痛的发展,与维持密切相关。近年来,人们逐渐认识到,背根节的胶质细胞—卫星细胞也参与慢性痛的发生发展。中枢神经系统损伤后,胶质细胞常常发生一定程度的去分化,甚至具备神经元发生的潜能。在外周神经系统,颈动脉体和肠神经节的胶质细胞在慢性缺氧和肠炎的情况下,会产生新的神经元,以适应疾病情况下机体功能的需求。考虑到背根节的卫星细胞在发育上与颈动脉体和肠神经节的胶质细胞都来自神经嵴,慢性痛情况下受累的背根节接收持续性的外周刺激,我们猜想:慢性痛情况下,背根节的卫星细胞是否也具有神经元发生的潜能?如果具有,卫星细胞可能以一种前所未料的方... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：126 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
缩略语表
中文摘要
ABSTRACT
前言
文献回顾
第一部分 慢性痛后背根节卫星细胞的活化
    1 材料
        1.1 实验动物
        1.2 仪器
        1.3 试剂
        1.4 缓冲液的配制
    2 方法
        2.1 小鼠SNI及 CFA慢性痛模型的建立
        2.2 BrdU注射
        2.3 冰冻组织切片的制备
        2.4 免疫荧光组织化学染色
        2.5 BrdU染色
        2.6 图像采集和统计处理
    3 结果
        3.1 正常背根节中卫星细胞的分群
        3.2 慢性疼痛后卫星细胞的增殖
        3.3 在慢性痛后卫星细胞中前体细胞标记蛋白的上调
    4 讨论
第二部分 慢性痛条件下背根节的神经元发生
    1 材料
        1.1 实验动物
        1.2 仪器
        1.3 试剂
    2 方法
        免疫组织荧光化学染色
    3 结果
        3.1 慢性痛模型下背根节的神经元发生
        3.2 慢性痛模型下背根节中的DNA损伤/修复
        3.3 慢性痛模型下背根节新生神经元的类型
    4 讨论
第三部分 慢性痛条件下新生神经元的来源
    1 材料
        1.1 实验动物
        1.2 仪器
        1.3 试剂
    2 方法
        2.1 小鼠CFA及 SNI慢性痛模型的建立
        2.2 Tamoxifen注射
        2.3 免疫组织荧光化学染色
    3 结果
        3.1 慢性痛条件下背根节基于PDGFRα-Cre的细胞命运追踪
        3.2 慢性痛条件下背根节基于GFAP-Cre的细胞命运追踪
        3.3 慢性痛条件下背根节基于Sox2-Cre的细胞命运追踪
    4 讨论
第四部分 胶质源性新生神经元功能特性的初步探索
    1 材料
        1.1 实验动物
        1.2 仪器
        1.3 试剂
        1.4 实验药品与材料
        1.5 实验溶液
    2 方法
        2.1 实验细胞准备
        2.2 全细胞膜片钳记录
        2.3 Biocytin标记
        2.4 TRPV1 染色
        2.5 数据采集
        2.6 统计分析
    3 结果
        3.1 胶质源性新生神经元样细胞的电生理特性
        3.2 胶质源性新生神经元对辣椒素的反应
    4 讨论
小结
参考文献
附录
个人简历和研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Regulation of Pain and Itch by TRP Channels[J]. Carlene Moore,Rupali Gupta,Sven-Eric Jordt,Yong Chen,Wolfgang B.Liedtke.  Neuroscience Bulletin. 2018(01)
[2]针刺干预慢性疼痛突触可塑性变化:“疼痛记忆”的机制探讨[J]. 杨一玲,黄键澎,蒋丽,刘健华.  针刺研究. 2017(06)



本文编号：3172464