从H3K27甲基化修饰探讨雷公藤甲素对软骨破坏的作用及可能机制

发布时间：2021-05-16 07:04

　　第一部分雷公藤甲素对CIA大鼠软骨破坏的影响及机制研究目的采用胶原诱导关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）大鼠模型,观察雷公藤甲素（Triptolide,TP）治疗后大鼠关节、滑膜组织形态变化,评价软骨及骨质破坏情况,检测基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinase,MMPs）的表达,并检测组蛋白H3K27、催化H3K27组蛋白甲基化转移酶EZH2、去甲基转移酶JMJD3的表达,探讨TP对CIA大鼠软骨破坏的作用及可能机制。方法（1）选取适应性喂养一周的SPF级Wistar雄性大鼠60只,随机选取8只作为对照组,其余采用牛Ⅱ型胶原+完全弗氏佐剂尾背部多点注射建立类风湿关节炎模型。（2）造模成功的大鼠分别随机挑选并分为模型组（CIA）8只、雷公藤甲素低剂量组（TPL）8只、雷公藤甲素高剂量组（TP H）8只。（3）在造模第21天开始给予雷公藤甲素低剂量组（3.15mg/kg·d）灌胃,雷公藤甲素高剂量组（5.36mg/kg·d）灌胃,模型组（CIA）、对照(control给予等体积生理盐水灌胃,连续灌胃28天。（4）饲养期间观察大鼠的... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：82 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
第一部分:雷公藤甲素对CIA大鼠软骨破坏的影响及机制初探
    前言
    实验材料与实验方法
        1 实验材料
        2 方法
        3 数据的统计学分析
    结果
        1 TP对 CIA大鼠一般情况和关节的影响
        2 Micro-CT检测TP对 CIA大鼠骨质破坏的影响
        3 ELISA法检测TP对 CIA大鼠炎症因子的影响
        4 HE法检测TP对 CIA大鼠膝关节滑膜组织及踝关节大体病理
        5 番红固绿及甲苯胺蓝染色法观察TP对软骨情况
        6 组化法检测TP对基质金属蛋白酶的表达
        7 PCR法检测组蛋白H3K27 及相关甲基化修饰酶的表达
    讨论
    参考文献
第二部分 TP对人RA-FLS的作用及机制初探
    前言
    材料与方法
        1 材料
        2 方法
        3 数据的统计学分析
    结果
        1 人RA-FLS的培养鉴定
        2 MTT法检测雷公藤甲素对原代FLS增殖的影响
        3 流式细胞术检测雷公藤甲素对凋亡的影响
        4 Transwell检测雷公藤甲素对FLS细胞迁移的迁移
        5 RT-PCR检测雷公藤甲素对FLS基质金属蛋白酶的影响
        6 Wb检测H3K27 和甲基化修饰酶变化
    讨论
    参考文献
综述:从表观遗传学探讨中药对成纤维样滑膜细胞的影响
    1 FLS在 RA中的作用
        1.1 FLS异常增殖是滑膜组织内膜称里层增生的基础
        1.2 FLS与促炎细胞因子网络
        1.3 FLS与血管生成
        1.4 FLS与软骨结合形成血管翳破坏软骨
    2 FLS与表观遗传学
        2.1 FLS与 DNA甲基化
        2.2 RA-FLS与组蛋白修饰
        2.3 RA-FLS与 miRNA
    3 中药与FLS
        3.1 中药对FLS的增殖和凋亡的影响
        3.2 中药对FLS相关炎性因子的影响
        3.3 中药对FLS相关骨质破坏的影响
    4 中医药与表观遗传学
        4.1 中医证型与表观遗传学
        4.2 中药方剂与表观遗传学
            4.2.1 中药方剂特性与表观遗传学
            4.2.2 中药治疗与表观遗传学
    参考文献
致谢



本文编号：3189220