蛋白吸附层影响基因转染的机理及硫鎓聚合物用于肿瘤基因输送的研究

发布时间：2021-06-01 03:58

　　基因治疗是将治疗型核酸药物输送到细胞中特定靶点来更改基因表达的过程,因具备高疗效低毒副作用的特点成为肿瘤等基因类疾病的理想治疗方法。基因治疗的临床应用受制于缺乏安全、高效基因输送载体。用于体内基因治疗的载体主要分为两类:病毒载体和非病毒载体。病毒载体是工程化改造后的病毒,能介导携带的基因在靶细胞中高效转染并长期表达,因而成为基因治疗临床试验中应用最多的载体。但病毒载体存在生物安全性隐患和生产困难等缺点,限制了其进一步应用。非病毒载体,特别是阳离子聚合物,具有低免疫原性和低毒性、通用性、容易扩大制备等优点。然而,阳离子聚合物的主要缺陷之一是在血清存在下基因转染效率会极大降低。以阳离子聚合物载体的金标准,分子量25kDa的枝状聚乙烯亚胺（bPEI25k）为例,其纳米复合物的转染效率会在血清存在下降低2-3个数量级。目前关于血清蛋白影响纳米复合物转染的机理已有研究,但仍存在争议且研究缺乏系统性。因此,在第二章,我们以bPEI25k为模型载体,研究了血清蛋白和牛血清白蛋白（BSA）对PEI纳米复合物理化特性及对基因转染的影响。血清蛋白或BSA吸附在PEI纳米复合物表面,形成了稳定的纳米复合物/... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【部分图文】：

图１．１．２０１６年基因治疗临床试验中处理的病例统计

借助病毒高效转染能力，使得外源基因高效输送到宿主细胞中并使之持续高表达。目前，??在基因治疗中常见的病毒载体有逆转录病毒，慢病毒，腺病毒，腺相关病毒，单纯疱疹病??毒和痘病毒。ｍ迄今为止约有６７％的基因治疗临床试验采用病毒载体（图１．３）。２０００年，??世界首例基因治疗获得成功，该治疗采用逆转录病毒为载体，对重症联合免疫缺陷进行治??疗。２３世界首个基因治疗产品Ｇｌｙｂｅｍ，即采用腺相关病毒来治疗脂蛋白脂肪酶缺乏症??（ＬＰＬＤ）。尽管病毒载体由于其高效性在临床试验上已取得了一些成功，而其安全性问题??仍是制约病毒载体进一步应用的瓶颈。２４?１９９９年，１８岁的病人Ｊｅｓｓｅ?Ｇｅｌｓｉｎｇｅｒ在接受腺病??毒为载体的基因治疗后，病毒的免疫原性诱发强烈的人体免疫反应，从而导致多器官衰竭??而死亡；２００２－２００３年两位患者在接受以小鼠白血病病毒（一种逆转录病毒）为载体的基因??治疗后，逆转录病毒基因组插入到Ｔ细胞的致癌基因附近，激活其表达，从而使病人患上??白血病。２１除此之外，病毒载体缺乏肿瘤靶向特异性，携载目的基因容量小，价格高昂，难??以大规模制备

体序列中而导致致癌基因表达，具有很高的生物安全性。２７此外，非病毒载体结构筒单，易??于化学修饰来改变其功能，易于规模化生产和制备。２６，２８基于如上特性，在近２０年来非病??毒基因载体输送的研究得到越来越多的关注，已成为基因治疗研究的热点（图１．４）。非病??毒载体主要包括阳离子脂质体，阳离子聚合物，树枝状大分子等。２９??８００?ｔ??－＾Ｖｒｉａｌ?ｇｅｎｅ?ｄｅｌｉｖｅｒｙ??Ｓ?．．．?－＾－Ｎｏｎ－ｖｒｉａｌ?ｇｅｎｅ?ｄｅｌｉｖｅｒｙ??｜?６００?．??ＴＯ??茗４００?■?产??ｊ＝?Ｘ?产气，？嘩??｜?２００－?／??Ｑ－??０?ｆ?，———，?，?，??１９９０?１９９５?２０００?２００５?２０１０?２０１５??Ｙｅａｒ??图１．４．?１９９２年到２０１５年病毒载体与非病毒载体输送领域所发表文章。??Ｆｉｇｕｒｅ?１．４．?Ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ?ａｒｔｉｃｌｅｓ?ｃｏｎｃｅｒｎｉｎｇ?ｖｉｒａｌ?ａｎｄ?ｎｏｎ－ｖｉｒａｌ?ｇｅｎｅ?ｄｅｌｉｖｅｒｙ?ｆｒｏｍ?１９９２?ｔｏ?２０１５．??４??


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