丙戊酸钠通过TIF1γ介导的TGF-β/Smad信号通路抑制前列腺癌EMT的作用机制研究
发布时间：2021-07-22 19:07
研究背景:前列腺癌（prostate cancer,PCa）是泌尿系统常见的恶性肿瘤。在美国,PCa已成为第一位危害男性健康的恶性肿瘤,死亡率排第二位。中国PCa的发病率也在逐年上升,已经成为影响我国男性健康的难题之一。PCa进展相对缓慢,对于局限性及局部晚期PCa来说,其5年生存率大于99%,而晚期患者的5年生存率明显降低至3 0%左右。由雄激素依赖性前列腺癌（hormone-sensitive prostate cancer,HSPC）向去势抵抗性前列腺癌（castration resistant prostate cancer,CRPC）的转化及肿瘤的远处转移是导致治疗效果不佳及生存率下降的主要原因,且目前仍缺乏有效的治疗手段。因此,抑制前列腺癌的转移并寻求新的治疗靶点,具有极为重要的意义。上皮间质转化（epithelial mesenchymal transition,EMT）是指上皮细胞在特定的生理或病理情况下向间充质细胞转化的现象,其特征通常是间充质细胞标记物如波形蛋白（vimentin）、N-钙粘蛋白（N-cadherin）的表达上调和上皮细胞标记物如E-钙粘蛋白（E-c...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：179 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１?ＶＰＡ干预对前列腺癌细胞ＥＭＴ的影响??图１?Ａ：?ＶＰＡ干预ＬＮＣａＰ细胞，Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的表达明显上调，Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ、??ｖｉｍｅｎｔｉｎ的表达明显下调，与对照组比较，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）
ｌ?Ｙ的２个慢??病毒分别为ｌｖ－ｓｈ－ＴＩＦｌ?ｙ?－１、ｌｖ－ｓｈ－ＴＩＦｌ?ｙ?－２，过表达ＴＩＦ１?ｙ的３个慢病毒分别为??ｌｖ－ＴＩＦｌＹ－１、ｌｖ－ＴＩＦｌｙ－２、ｌｖ－ＴＩＦｌｙ－３。取?ＭＯＩ＝２０，通过高内涵显微镜荧观察??发现，感染７２ｈ，?ｌｖ－ｓｈ－ＴＩＦｌｙ感染ＬＮＣａＰ、ＰＣ３的感染效率均可达到９０％?（图??２）。用含有嘌呤霉素的完全培养基培养细胞，无明显细胞死亡时代表＇￣敲减??ＴＩＦ１?丫的稳转株筛选成功。??■?■??ＬＮＣａＰ?ＰＣ３??图２慢病毒转染ＬＮＣａＰ及ＰＣ３细胞高内涵显微镜下荧光成像??携带ｓｈＲＮＡ－ＴＩＦｌ?ｙ的慢病毒以Ｍ０Ｉ＝２０转染ＬＮＣａＰ及ＰＣ３细胞１２ｈ，培养７２ｈ??后，高内涵显微镜观察转染效率＞９０％，细胞状态良好。??随后，在敲减ＴＩＦ１?Ｙ表达的ＬＮＣａＰ细胞稳转株中，ｑＲＴ－ＰＣＲ实验检测沉默??效率，结果显示：ＴＩＦｌｙ的ｍＲＮＡ表达明显降低，ＴＩＦｌｙ的蛋白表达也明显降??低（敲减效率大于８０％），且ｌｖ－ｓｈ－ＴＩＦｌｙ－２的敲减效率更高。因此，在ＬＮＣａＰ??５５??
Ｄ＾ｍｍ?／／／?／／／?／Ｖ，／??ＰＣ３??Ｃ?，Ｄ??ＴｉＦｉＹ｜ｆｗ？?ｍｍ?ｍｍ?ｉＳ］ｉ５〇ＫＤ?２０ｎ?ｃ?６ｎ????￣??＞?■?ＬＮＣａＰ?〇?？?ｍ?ＬＮＣａＰ??ｇａｐｄｈ?＼ｍｍ?ｍｍ?ｍｍ?ｍｍ?３５ｋｄ?二?￥?？?■?ＰＣ３?ｇ?Ｔ?ｍ?ｐ〇３??ＬＮｃａｐ?．?ｉｆ?Ｊ?ｉ．??购?Ｌ￡＾ｍ腦＾ｉ＞ｉｌｌ?ｉＨｌ?ｉ?Ｊｉ＞！）?ｉｌｌ）??ＧＡＰＤＨ?［ｍｍ?３ｓｋｄ?＾／／／?ｙ／／?ｔ？ＫＶ／Ａ＞??ＰＣ３??图３敲减及过表达ＴＩＦＩｙ的ＰＣ３、ＬＮＣａＰ细胞稳转株的筛选??敲减及过表达ＴＩＦ１?丫的慢病毒载体转染ＬＮＣａＰ、ＰＣ３细胞。Ａ：?ＷＢ法检测??ＬＮＣａＰ、ＰＣ３细胞分别转染两株慢病毒后的ＴＩＦＩｙ的沉默效率。结果显示，??ｓｈ－ＴｌＦｌｙ－２的沉默效率最高。Ｂ：?ｑＲＴ－ＰＣＲ检测ＰＣ３、ＬＮＣａＰ细胞分别转染两??株慢病毒后的ＴＩＦｌ?ｙ的ｍＲＮＡ的沉默效率，结果显示，ｓｈ－ＴＩＦｌ?ｙ?－２的沉默效率??最高。Ｃ：?ＷＢ法检测ＰＣ３和ＬＮＣａＰ细胞分别转染三株慢病毒后的ＴＩＦｌ?Ｙ的过??表达效果。结果显示，ＬＮＣａＰ细胞中，ＴＩＦｙ－３的过表达效果最佳；ＰＣ３细胞中，??ＴＩＦｌ?ｙ?－２的过表达效果最佳。Ｄ：?ｑＲＴ－ＰＣＲ检测ＰＣ３和ＬＮＣａＰ细胞分别转染三??株慢病毒后的ＴＩＦＩｙ的ｍＲＮＡ的过表达效果，结果显示，ＬＮＣａＰ细胞中，??ＴＩＦＩｙ－３的过表达效果最佳；ＰＣ３细胞中，ＴＩＦＩｙ－２的过表达效果最佳。＊表示??与对照组相比，＊Ｐ＜〇．〇５，?ｎ＝３。??２．２．?ＴＩＦｌ?Ｙ在抑制ＰＣ３、ＬＮＣａＰ细胞ＥＭＴ中发
【参考文献】：
期刊论文
[1]2015年中国恶性肿瘤流行情况分析[J]. 郑荣寿,孙可欣,张思维,曾红梅,邹小农,陈茹,顾秀瑛,魏文强,赫捷. 中华肿瘤杂志. 2019 (01)
[2]Role of TRIM33 in Wnt signaling during mesendoderm differentiation[J]. Xiaojie Xia,Feifei Zuo,Maoguo Luo,Ye Sun,Jianbo Bai,Qiaoran Xi. Science China（Life Sciences）. 2017(10)
[3]Association of overexpression of TIF1γ with colorectal carcinogenesis and advanced colorectal adenocarcinoma[J]. Shilpa Jain,Shashideep Singhal,Franto Francis,Cristina Hajdu,Arief Suriawinata,Elizabeth H Weinshel,Fritz Francois,Peng Lee. World Journal of Gastroenterology. 2011(35)
[4]HDACs,histone deacetylation and gene transcription: from molecular biology to cancer therapeutics[J]. PaolaGallinari,StefaniaDiMarco,PhillipJones,MichelePallaoro,ChristianSteinkühler. Cell Research. 2007(03)
本文编号：3297723
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：179 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１?ＶＰＡ干预对前列腺癌细胞ＥＭＴ的影响??图１?Ａ：?ＶＰＡ干预ＬＮＣａＰ细胞，Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的表达明显上调，Ｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ、??ｖｉｍｅｎｔｉｎ的表达明显下调，与对照组比较，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）
ｌ?Ｙ的２个慢??病毒分别为ｌｖ－ｓｈ－ＴＩＦｌ?ｙ?－１、ｌｖ－ｓｈ－ＴＩＦｌ?ｙ?－２，过表达ＴＩＦ１?ｙ的３个慢病毒分别为??ｌｖ－ＴＩＦｌＹ－１、ｌｖ－ＴＩＦｌｙ－２、ｌｖ－ＴＩＦｌｙ－３。取?ＭＯＩ＝２０，通过高内涵显微镜荧观察??发现，感染７２ｈ，?ｌｖ－ｓｈ－ＴＩＦｌｙ感染ＬＮＣａＰ、ＰＣ３的感染效率均可达到９０％?（图??２）。用含有嘌呤霉素的完全培养基培养细胞，无明显细胞死亡时代表＇￣敲减??ＴＩＦ１?丫的稳转株筛选成功。??■?■??ＬＮＣａＰ?ＰＣ３??图２慢病毒转染ＬＮＣａＰ及ＰＣ３细胞高内涵显微镜下荧光成像??携带ｓｈＲＮＡ－ＴＩＦｌ?ｙ的慢病毒以Ｍ０Ｉ＝２０转染ＬＮＣａＰ及ＰＣ３细胞１２ｈ，培养７２ｈ??后，高内涵显微镜观察转染效率＞９０％，细胞状态良好。??随后，在敲减ＴＩＦ１?Ｙ表达的ＬＮＣａＰ细胞稳转株中，ｑＲＴ－ＰＣＲ实验检测沉默??效率，结果显示：ＴＩＦｌｙ的ｍＲＮＡ表达明显降低，ＴＩＦｌｙ的蛋白表达也明显降??低（敲减效率大于８０％），且ｌｖ－ｓｈ－ＴＩＦｌｙ－２的敲减效率更高。因此，在ＬＮＣａＰ??５５??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]2015年中国恶性肿瘤流行情况分析[J]. 郑荣寿,孙可欣,张思维,曾红梅,邹小农,陈茹,顾秀瑛,魏文强,赫捷. 中华肿瘤杂志. 2019 (01)
[2]Role of TRIM33 in Wnt signaling during mesendoderm differentiation[J]. Xiaojie Xia,Feifei Zuo,Maoguo Luo,Ye Sun,Jianbo Bai,Qiaoran Xi. Science China（Life Sciences）. 2017(10)
[3]Association of overexpression of TIF1γ with colorectal carcinogenesis and advanced colorectal adenocarcinoma[J]. Shilpa Jain,Shashideep Singhal,Franto Francis,Cristina Hajdu,Arief Suriawinata,Elizabeth H Weinshel,Fritz Francois,Peng Lee. World Journal of Gastroenterology. 2011(35)
[4]HDACs,histone deacetylation and gene transcription: from molecular biology to cancer therapeutics[J]. PaolaGallinari,StefaniaDiMarco,PhillipJones,MichelePallaoro,ChristianSteinkühler. Cell Research. 2007(03)
本文编号：3297723
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