细胞色素P450 4A11酶促血压调节相关研究
发布时间：2021-08-12 22:47
细胞色素P450 4s（CYP4s）,在人体多个器官有表达,能通过羟化作用将体内花生四烯酸（AA）代谢为脂肪酸20-羟基二十碳四烯酸（20-HETE）。CYP4s表达或活性改变可引起机体20-HETE量的变化。有研究认为,20-HETE可能作用影响血压调节的不同部位。20-HETE既是非常有效的血管收缩剂,它也能促进肾近曲小管和髓袢升支粗段的尿钠排泄,抑制钠重吸收而起到降血压作用。CYP4s是否有效调节血压且通过20-HETE,其效果及机制目前并不清楚。本课题为探索CYP4s促血压调节的效果及机制,且是否可能经20-HETE实现。为选择可能与原发性高血压（EH）更相关的CYP4s,首先考察了中国南方汉族EH人群与CYP4s家族中CYP4A11、CYP4F12、CYP4F2、CYP4F3及相关泛素连接酶Cullin3（CUL3）和Kelch样家族成员3（KLHL3）多个单核苷酸多态性（SNP）的相关性;最后发现CYP4A11、CYP4F3及CUL3和KLHL3有显著影响EH发病的SNPs,可能显著增加EH致病风险的有CYP4A11,故选其做目标酶深入考察,并通过动物、动物器官和细胞实验等...
【文章来源】：华南理工大学广东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：165 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
动脉环的肌动描记器[184]
华南理工大学博士学位论文32Figure2-1ElectrophoresispeakpatternofiMLDRtests(Orangepeakissizestandard)图2-2iMLDR检测的电泳峰型（橙色峰是尺寸标准，见箭头）2.4.5DNA位点SNPs与高血压关联性分析本实验针对DNA样本检测出的SNPs的等位基因表达结果，与试验对象进行高血压的关联性分析，其结果如下列表所示：其中CYP4s家族的CYP4A11基因多态性与EH关联性分析见表2-3至表2-6；CYP4F12基因多态性与EH关联性分析见表2-7至表2-10；CYP4F2基因多态性与EH关联性分析见表2-11至表2-14；CYP4F3基因多态性与EH关联性分析见表2-15至表2-18；而泛素化酶CUL3基因多态性与EH关联性分析见表2-19与表2-20，KLHL3基因多态性与EH关联性分析见表2-21与表2-22。表2-3CYP4A11rs1126742多态性在高血压患者和正常血压组的分布频率Table2-3DistributionfrequencyofCYP4A11rs1126742polymorphisminEHandnormotensivegroupCYP4A11rs1126742EHNormotensivePOR(95%CI)（T/C）nnFulldatasetAlleleT401402C1191220.8841.023(0.767-1.364)GenotypeTT1511501.000TC991020.8561.037(0.726-1.482)CC10101.0001.007(0.407-2.489)MAlleleT211212C51540.8281.054(0.687-1.616)GenotypeTT83801.000TC45520.5221.199(0.725-1.984)C310.6210.346(0.035-3.394)FAlleleT190190C68681.0001.000(0.676-1.479)GenotypeTT68701.000TC54500.6990.899(0.541-1.497)CC790.7941.249(0.440-3.543)
华南理工大学博士学位论文48CYP4A11小鼠同源性酶的考察目标。本部分主要探讨与人CYP4A11有79%同源性的小鼠Cyp4a10酶[236]对C57BL6/J小鼠血压的影响，来分析探讨CYP4s在实验动物中对高血压产生的影响。3.2材料、试剂与仪器3.2.1实验对象（1）雄性eNOS(-/-)小鼠(一种转基因小鼠：通过近交系自然变异法将C57BL/6J小鼠eNOS酶敲除，SPF级)，8~9周龄，购于广东省医学实验动物中心，饲养于广州总医院实验动物中心；（2）C57BL/6J雄性小鼠（野生型小鼠，无特定病原体(SpecificPathogenFree,SPF)级），8~9周龄，购自广东省医学实验动物中心，饲养于广州总医院实验动物中心；（3）293T人胚肾细胞，购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库；（4）HEK293人胚肾细胞，购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库。上述两种细胞均属于为贴壁依赖型成上皮样细胞；（5）大肠杆菌E·coliDH5α菌株，购自广州莱德尔生物科技有限公司；（6）表达载体质粒pLVX-IRES-ZsGreen1（图3-1）；辅助包装原件载体质粒pHelper1.0与pHelper2.0（图3-2），购自美国Clontech公司。图3-1质粒plvx-ires-zsgreen1序列与多克隆位点Figure3-1PlasmidpLVX-IRES-ZsGreen1sequenceandpolyclonalloci
【参考文献】：
期刊论文
[1]L-型钙通道参与大鼠动脉收缩反应的异质性[J]. 刘林,邝素娟,杨慧,饶芳,张梦珍,麦丽萍,林秋雄,单志新,杨敏,邓春玉. 中国药理学通报. 2018(04)
[2]尼索地平对离体人子宫动脉收缩的影响[J]. 杜梅素,杨波,刘雪芹,魏国会,张新霞,韩宗其,郭民英. 中国临床药理学与治疗学. 2018(01)
[3]TRPV4在小鼠脑血管内皮细胞中的表达及对血管张力调节作用研究[J]. 胡文霞,姜婉,叶立,叶沛,朱金行,沈兵,杜鹃. 安徽医科大学学报. 2017(10)
[4]抑制CYP4A11基因表达的siRNAs优选及对血管收缩相关因子的影响[J]. 李晋,胡静,李健,石磊,赵树进. 生命科学研究. 2017(01)
[5]Na+,K+-ATPase α1亚单位表达的研究进展[J]. 景兴慧,李晓果,刘波,王俊峰,高原. 川北医学院学报. 2016(02)
[6]细胞色素P450酶与微生物药物创制[J]. 李众,张伟,李盛英. 微生物学报. 2016(03)
[7]内皮素受体的分布及其生物功能[J]. 张珂,陈鹊汀,王晓冬,张越,李婷婷,石林. 医学研究与教育. 2014(03)
[8]高血压实验动物模型的研究进展[J]. 沈智洁,张志辉,杨侃. 中国循环杂志. 2014(03)
[9]EA.HY926人脐静脉内皮细胞株与原代细胞生物特性的比较研究[J]. 李慧,李秀娟,古力热巴·夏依买旦,阿曼古丽·如则,吴江,聂永梅. 新疆医科大学学报. 2014(01)
[10]安全药理实验中血压测量方法的选择及比较[J]. 关海源. 中国药理学与毒理学杂志. 2013(03)
硕士论文
[1]5-HT对糖尿病小鼠胰腺和肠系膜动脉功能的调节作用机制研究[D]. 高玉芳.浙江大学 2017
[2]盐敏感性高血压大鼠eNOS、iNOS表达与心、肾细胞凋亡的关系[D]. 黄幸.山西医科大学 2011
本文编号：3339222
【文章来源】：华南理工大学广东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：165 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
动脉环的肌动描记器[184]
华南理工大学博士学位论文32Figure2-1ElectrophoresispeakpatternofiMLDRtests(Orangepeakissizestandard)图2-2iMLDR检测的电泳峰型（橙色峰是尺寸标准，见箭头）2.4.5DNA位点SNPs与高血压关联性分析本实验针对DNA样本检测出的SNPs的等位基因表达结果，与试验对象进行高血压的关联性分析，其结果如下列表所示：其中CYP4s家族的CYP4A11基因多态性与EH关联性分析见表2-3至表2-6；CYP4F12基因多态性与EH关联性分析见表2-7至表2-10；CYP4F2基因多态性与EH关联性分析见表2-11至表2-14；CYP4F3基因多态性与EH关联性分析见表2-15至表2-18；而泛素化酶CUL3基因多态性与EH关联性分析见表2-19与表2-20，KLHL3基因多态性与EH关联性分析见表2-21与表2-22。表2-3CYP4A11rs1126742多态性在高血压患者和正常血压组的分布频率Table2-3DistributionfrequencyofCYP4A11rs1126742polymorphisminEHandnormotensivegroupCYP4A11rs1126742EHNormotensivePOR(95%CI)（T/C）nnFulldatasetAlleleT401402C1191220.8841.023(0.767-1.364)GenotypeTT1511501.000TC991020.8561.037(0.726-1.482)CC10101.0001.007(0.407-2.489)MAlleleT211212C51540.8281.054(0.687-1.616)GenotypeTT83801.000TC45520.5221.199(0.725-1.984)C310.6210.346(0.035-3.394)FAlleleT190190C68681.0001.000(0.676-1.479)GenotypeTT68701.000TC54500.6990.899(0.541-1.497)CC790.7941.249(0.440-3.543)
华南理工大学博士学位论文48CYP4A11小鼠同源性酶的考察目标。本部分主要探讨与人CYP4A11有79%同源性的小鼠Cyp4a10酶[236]对C57BL6/J小鼠血压的影响，来分析探讨CYP4s在实验动物中对高血压产生的影响。3.2材料、试剂与仪器3.2.1实验对象（1）雄性eNOS(-/-)小鼠(一种转基因小鼠：通过近交系自然变异法将C57BL/6J小鼠eNOS酶敲除，SPF级)，8~9周龄，购于广东省医学实验动物中心，饲养于广州总医院实验动物中心；（2）C57BL/6J雄性小鼠（野生型小鼠，无特定病原体(SpecificPathogenFree,SPF)级），8~9周龄，购自广东省医学实验动物中心，饲养于广州总医院实验动物中心；（3）293T人胚肾细胞，购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库；（4）HEK293人胚肾细胞，购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库。上述两种细胞均属于为贴壁依赖型成上皮样细胞；（5）大肠杆菌E·coliDH5α菌株，购自广州莱德尔生物科技有限公司；（6）表达载体质粒pLVX-IRES-ZsGreen1（图3-1）；辅助包装原件载体质粒pHelper1.0与pHelper2.0（图3-2），购自美国Clontech公司。图3-1质粒plvx-ires-zsgreen1序列与多克隆位点Figure3-1PlasmidpLVX-IRES-ZsGreen1sequenceandpolyclonalloci
【参考文献】：
期刊论文
[1]L-型钙通道参与大鼠动脉收缩反应的异质性[J]. 刘林,邝素娟,杨慧,饶芳,张梦珍,麦丽萍,林秋雄,单志新,杨敏,邓春玉. 中国药理学通报. 2018(04)
[2]尼索地平对离体人子宫动脉收缩的影响[J]. 杜梅素,杨波,刘雪芹,魏国会,张新霞,韩宗其,郭民英. 中国临床药理学与治疗学. 2018(01)
[3]TRPV4在小鼠脑血管内皮细胞中的表达及对血管张力调节作用研究[J]. 胡文霞,姜婉,叶立,叶沛,朱金行,沈兵,杜鹃. 安徽医科大学学报. 2017(10)
[4]抑制CYP4A11基因表达的siRNAs优选及对血管收缩相关因子的影响[J]. 李晋,胡静,李健,石磊,赵树进. 生命科学研究. 2017(01)
[5]Na+,K+-ATPase α1亚单位表达的研究进展[J]. 景兴慧,李晓果,刘波,王俊峰,高原. 川北医学院学报. 2016(02)
[6]细胞色素P450酶与微生物药物创制[J]. 李众,张伟,李盛英. 微生物学报. 2016(03)
[7]内皮素受体的分布及其生物功能[J]. 张珂,陈鹊汀,王晓冬,张越,李婷婷,石林. 医学研究与教育. 2014(03)
[8]高血压实验动物模型的研究进展[J]. 沈智洁,张志辉,杨侃. 中国循环杂志. 2014(03)
[9]EA.HY926人脐静脉内皮细胞株与原代细胞生物特性的比较研究[J]. 李慧,李秀娟,古力热巴·夏依买旦,阿曼古丽·如则,吴江,聂永梅. 新疆医科大学学报. 2014(01)
[10]安全药理实验中血压测量方法的选择及比较[J]. 关海源. 中国药理学与毒理学杂志. 2013(03)
硕士论文
[1]5-HT对糖尿病小鼠胰腺和肠系膜动脉功能的调节作用机制研究[D]. 高玉芳.浙江大学 2017
[2]盐敏感性高血压大鼠eNOS、iNOS表达与心、肾细胞凋亡的关系[D]. 黄幸.山西医科大学 2011
本文编号：3339222
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3339222.html
教材专著
