MicroRNA-23a-27a-24-2簇在肝细胞癌中的功能及调控机制研究
发布时间：2021-08-16 12:28
研究目的肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）由于高复发率和频繁转移而成为全世界与癌症相关死亡的第四大最常见原因。对于肝细胞癌的发生发展/侵袭转移的研究一直是热点,但其具体机制至今仍不完全清楚。mi R-23a-27a-24-2簇位于人类染色体19p13.12,转录后形成3个成熟的mi RNAs:mi R-23a,mi R-27a和mi R-24。在mi R-23a-27a-24-2簇中,三个mi RNAs转录共用一个启动子。然而,在不同组织和细胞中,三个成熟mi RNAs表达有时一致,有时不一致。相同的mi RNA可以因为作用靶点的不同发挥不同的甚至相反的功能。目前对mi RNAs的研究多集中在单一的mi RNA上,对于mi RNA的整体功能及其调控网络的研究非常有限。本研究将利用CRISPR Cas9基因编辑技术建立mi RNA敲除Hep G2细胞模型,并在此基础上建立动物模型,分别阐述mi R-23a-27a-24-2簇中成熟mi RNAs的功能;同时利用CRISPR d Cas9（Catalytically dead Cas9,d Cas9）技术建...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：123 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
MiR-23a-27a-24簇结构简图
3图1.2.MiR-23a-27a-24-2簇中microRNAs的相互作用及靶基因MiR-23a-27a-24-2簇与肿瘤的多个生物学过程有关：增殖，细胞周期停滞，凋亡，分化，侵袭转移等。MiRNA可以因为靶基因不同而发挥不同功能。1.2.1p53信号通路p53是人类最重要的抑癌基因之一，在细胞周期、DNA修复、细胞凋亡、代谢等方面都发挥重要作用。p53功能丧失，肿瘤风险显著增加。研究表明，超过50%的肿瘤中，p53发生突变[21]。p53可以诱导miR-23a过表达并靶向X‐linkedinhibitorofapoptosisprotein（XIAP），抑制细胞凋亡[21]；相反，p53诱导miR-23a过表达后也可以靶向凋亡抑制者FOXA1，通过AMPK/p53/miR-23a/FOXA1信号通路抑制HCC细胞凋亡[22]。此外，p53依赖的miR-23a上调可以作用于p21，导致G2/M细胞周期停滞，进而抑制细胞增殖[23]。另一方面，miR-27a和RPL26与p533’UTR竞争性结合，在Six1存在的情况下，miR-27a与p53结合增加，从而降低p53表达[21]。miR-24可以通过与p533’UTR结合抑制p53表达进而影响肿瘤侵袭能力[24]。综上，miRNA可以通过直接/间接靶向p53调节细胞周期、细胞增殖、凋亡和侵袭。
41.2.2Wnt-β-catenin信号通路Wnt-β-catenin信号通路参与肿瘤发生发展的多个过程，其异常激活显著增加肿瘤发生风险。Frizzleds及LDLreceptor‐relatedprotein是Wnt的受体，结合后形成复合物以稳定β-catenin。细胞质内的β-catenin转移至细胞核后，β‐catenin–LEF/TCF转录复合物激活经典Wnt信号通路，C-Myc和CyclinD1是其下游基因[25]。最近的研究表明，miRNA诱导的遗传及表观遗传改变与Wnt-β-catenin信号通路相互关联[26]（图1.3）。MiRNAs可以作为Wnt-β-catenin的负调控因子,miR-27a及miR-24分别靶向WNT3A，WNT4[27]。另一方面，miRNA也可以通过靶向Wnt通路的抑制剂作用于信号通路的上游，发挥正向调节作用。例如，miR-23a/miR-27a可以直接靶向APC[28]而miR-27a直接靶向PP2A，造成β-catenin累积，进而激活Wnt-β-catenin信号通路[25]。miRNA与Wnt信号通路的相互作还体现在miRNA靶向β‐catenin/TCF4复合物进而影响细胞增殖及侵袭。图1.3MiR‐23a‐27a‐24‐2簇与Wnt信号通路MiR-23a/miR-27a/miR-24通过靶向APC，GSK3β上调β-catenin转录活性；而miR-27a，miR-24抑制Wnt并下调β-catenin转录活性。另一方面，miR-23a/miR-27a/miR-24与β-catenin/TCF/LEF复合物相互作用抑制下游靶基因。LRP,LDLreceptor-relatedprotein;DVL,Disheveled;APC,Adenomatouspolyposiscoli;GSK3β,Glycogensynthasekinase3β;TCF,T-cellfactor;LEF,Lymphoidenhancer-bindingfactor
【参考文献】：
期刊论文
[1]食管鳞癌肿瘤微环境中miRNA与TGF-β1的相关性分析[J]. 朱龙萍,金丽艳,蒋日月,汪茜茜,蒋健,毛朝明,陈德玉. 细胞与分子免疫学杂志. 2013(05)
本文编号：3345672
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：123 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
MiR-23a-27a-24簇结构简图
3图1.2.MiR-23a-27a-24-2簇中microRNAs的相互作用及靶基因MiR-23a-27a-24-2簇与肿瘤的多个生物学过程有关：增殖，细胞周期停滞，凋亡，分化，侵袭转移等。MiRNA可以因为靶基因不同而发挥不同功能。1.2.1p53信号通路p53是人类最重要的抑癌基因之一，在细胞周期、DNA修复、细胞凋亡、代谢等方面都发挥重要作用。p53功能丧失，肿瘤风险显著增加。研究表明，超过50%的肿瘤中，p53发生突变[21]。p53可以诱导miR-23a过表达并靶向X‐linkedinhibitorofapoptosisprotein（XIAP），抑制细胞凋亡[21]；相反，p53诱导miR-23a过表达后也可以靶向凋亡抑制者FOXA1，通过AMPK/p53/miR-23a/FOXA1信号通路抑制HCC细胞凋亡[22]。此外，p53依赖的miR-23a上调可以作用于p21，导致G2/M细胞周期停滞，进而抑制细胞增殖[23]。另一方面，miR-27a和RPL26与p533’UTR竞争性结合，在Six1存在的情况下，miR-27a与p53结合增加，从而降低p53表达[21]。miR-24可以通过与p533’UTR结合抑制p53表达进而影响肿瘤侵袭能力[24]。综上，miRNA可以通过直接/间接靶向p53调节细胞周期、细胞增殖、凋亡和侵袭。
41.2.2Wnt-β-catenin信号通路Wnt-β-catenin信号通路参与肿瘤发生发展的多个过程，其异常激活显著增加肿瘤发生风险。Frizzleds及LDLreceptor‐relatedprotein是Wnt的受体，结合后形成复合物以稳定β-catenin。细胞质内的β-catenin转移至细胞核后，β‐catenin–LEF/TCF转录复合物激活经典Wnt信号通路，C-Myc和CyclinD1是其下游基因[25]。最近的研究表明，miRNA诱导的遗传及表观遗传改变与Wnt-β-catenin信号通路相互关联[26]（图1.3）。MiRNAs可以作为Wnt-β-catenin的负调控因子,miR-27a及miR-24分别靶向WNT3A，WNT4[27]。另一方面，miRNA也可以通过靶向Wnt通路的抑制剂作用于信号通路的上游，发挥正向调节作用。例如，miR-23a/miR-27a可以直接靶向APC[28]而miR-27a直接靶向PP2A，造成β-catenin累积，进而激活Wnt-β-catenin信号通路[25]。miRNA与Wnt信号通路的相互作还体现在miRNA靶向β‐catenin/TCF4复合物进而影响细胞增殖及侵袭。图1.3MiR‐23a‐27a‐24‐2簇与Wnt信号通路MiR-23a/miR-27a/miR-24通过靶向APC，GSK3β上调β-catenin转录活性；而miR-27a，miR-24抑制Wnt并下调β-catenin转录活性。另一方面，miR-23a/miR-27a/miR-24与β-catenin/TCF/LEF复合物相互作用抑制下游靶基因。LRP,LDLreceptor-relatedprotein;DVL,Disheveled;APC,Adenomatouspolyposiscoli;GSK3β,Glycogensynthasekinase3β;TCF,T-cellfactor;LEF,Lymphoidenhancer-bindingfactor
【参考文献】：
期刊论文
[1]食管鳞癌肿瘤微环境中miRNA与TGF-β1的相关性分析[J]. 朱龙萍,金丽艳,蒋日月,汪茜茜,蒋健,毛朝明,陈德玉. 细胞与分子免疫学杂志. 2013(05)
本文编号：3345672
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/yxlbs/3345672.html
教材专著
