小分子激酶抑制剂对非小细胞肺癌的抗肿瘤疗效及机制研究
发布时间：2021-08-16 20:17
目的:1)通过分析晚期非小细胞肺癌患者的EGFR突变类型,探讨EGFR外显子19和21基因突变与患者临床病理特征的关系,探索非小细胞肺癌晚期患者口服EGFR-TKIs的疗效是否与EGFR突变类型有关,从而指导临床非小细胞肺癌患者个体化治疗;2)通过高通量测序方法对非小细胞肺癌患者的13种与靶向治疗相关的驱动基因的突变情况进行测序分析,从而分析不同的变异类型与临床病理特征以及预后的关系,为临床精准治疗提供理论依据;3)通过研究小分子蛋白酶抑制剂Oprozomib（OPZ）对肺癌细胞发生发展的作用,探讨第二代蛋白酶体抑制剂Oprozomib对肺癌的抗肿瘤效果以及抗肿瘤作用的初步分子机制。方法:1)收集新疆医科大学附属肿瘤医院组织病理学确证为非小细胞肺癌患者140例,分析患者的临床资料和EGFR突变类型。利用卡方检验和Fisher检验分析患者的临床资料与EGFR突变类型的相关性,除此之外,采用Kaplan-Meier生存分析比较EGFR19号外显子缺失突变和EGFR21号外显子突变的两类非小细胞肺癌患者的中位无进展生存期（mPFS）和中位总生存期（mOS）;2)收集新疆医科大学附属肿瘤医院2...
【文章来源】：新疆医科大学新疆维吾尔自治区
【文章页数】：111 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
外显子19缺失突变与外显子21点突变患者EGFR-TKI治疗的PFS生存曲线
第一部分·讨论23图1-2IHC方法检测非小细胞肺癌中ALK蛋白表达A：ALK3（+）；B：ALK2（+）；C：ALK1（+）；D：ALK0（-）。Figure1-2DetectionofALKproteinexpressioninnon-smallcelllungcancerbyIHCA：ALK3（+）；B：ALK2（+）；C：ALK1（+）；D：ALK0（-）.3讨论肺癌是世界上发病率和死亡率较高的恶性肿瘤之一[89]，虽然EGFR酪氨酸激酶抑制剂（TKIs）现在是专属的用于患有致敏EGFR突变的NSCLC患者，这些药物最初是针对未经选择的患者群体开发的。根据观察发现，NSCLCs占很大比例表达EGFR。2004年，厄洛替尼成为FDA批准的第一个分子靶向治疗用于治疗晚期NSCLC在癌症先前化疗进展的患者中。值得注意的是，此批准是基于2个月的PFS与安慰剂相比的优势，它的使用并没有特定的必需的生物标志物。在早期研究中探讨了EGFRTKI未选择的NSCLC患者的整体活动，这些药物在很大程度上令人失望。亚组分析通常有一小部分患者年轻，东亚女性，吸烟史很少或没有吸烟史的患者对TKI存在“戏剧性的反应”（Fujiwara等，2003）。肿瘤分析来自应答者的标本导致发现了一种关联，存在激活EGFR激酶结构域的突变和反应。在过去的十几年里，我们认识到了解疾病的必要性分子水平以识别特定的分子靶标可以鉴定或设计药物以抑制药物。随着分子生物学在肿瘤的发生发展的机制研究中的应用，尤其是分子靶向药物概念的提出
第二部分·研究内容与方法35通过末端修复将DNA片段两端变为平末端，在DNA片段的5’端加磷酸基团，在DNA的3’端加碱基A；3）通过TA连接将接头序列加到DNA片段的两端并纯化回收连接产物；4）随后通过一轮扩增并纯化获得可测序基因文库。具体建库流程如下图所示：图2-1建库流程图Figure2-1Constructionflowchart1.2.4.3簇生成当DNA文库上样到流动槽上，Flowcell上随机分布了两种不同的寡核苷酸序列，待测DNA片段通过接头和槽内寡核苷酸配对连接。随后每个片段通过桥式法扩增成簇克拢接下来合成的双链被解链，再分别与Flowcell上的接头杂交互补，通过延伸解链等步骤重复35个桥式PCR，利用变性剂NAOH将双链解链，并利用甲酰胺基嘧啶糖苷酶和对8-氧鸟嘌呤糖苷的选择性切断作用，将测序引物杂交至目标部位一端的通
【参考文献】：
期刊论文
[1]2014年中国分地区恶性肿瘤发病和死亡分析[J]. 陈万青,孙可欣,郑荣寿,张思维,曾红梅,邹小农,赫捷. 中国肿瘤. 2018(01)
本文编号：3346321
【文章来源】：新疆医科大学新疆维吾尔自治区
【文章页数】：111 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
外显子19缺失突变与外显子21点突变患者EGFR-TKI治疗的PFS生存曲线
第一部分·讨论23图1-2IHC方法检测非小细胞肺癌中ALK蛋白表达A：ALK3（+）；B：ALK2（+）；C：ALK1（+）；D：ALK0（-）。Figure1-2DetectionofALKproteinexpressioninnon-smallcelllungcancerbyIHCA：ALK3（+）；B：ALK2（+）；C：ALK1（+）；D：ALK0（-）.3讨论肺癌是世界上发病率和死亡率较高的恶性肿瘤之一[89]，虽然EGFR酪氨酸激酶抑制剂（TKIs）现在是专属的用于患有致敏EGFR突变的NSCLC患者，这些药物最初是针对未经选择的患者群体开发的。根据观察发现，NSCLCs占很大比例表达EGFR。2004年，厄洛替尼成为FDA批准的第一个分子靶向治疗用于治疗晚期NSCLC在癌症先前化疗进展的患者中。值得注意的是，此批准是基于2个月的PFS与安慰剂相比的优势，它的使用并没有特定的必需的生物标志物。在早期研究中探讨了EGFRTKI未选择的NSCLC患者的整体活动，这些药物在很大程度上令人失望。亚组分析通常有一小部分患者年轻，东亚女性，吸烟史很少或没有吸烟史的患者对TKI存在“戏剧性的反应”（Fujiwara等，2003）。肿瘤分析来自应答者的标本导致发现了一种关联，存在激活EGFR激酶结构域的突变和反应。在过去的十几年里，我们认识到了解疾病的必要性分子水平以识别特定的分子靶标可以鉴定或设计药物以抑制药物。随着分子生物学在肿瘤的发生发展的机制研究中的应用，尤其是分子靶向药物概念的提出
第二部分·研究内容与方法35通过末端修复将DNA片段两端变为平末端，在DNA片段的5’端加磷酸基团，在DNA的3’端加碱基A；3）通过TA连接将接头序列加到DNA片段的两端并纯化回收连接产物；4）随后通过一轮扩增并纯化获得可测序基因文库。具体建库流程如下图所示：图2-1建库流程图Figure2-1Constructionflowchart1.2.4.3簇生成当DNA文库上样到流动槽上，Flowcell上随机分布了两种不同的寡核苷酸序列，待测DNA片段通过接头和槽内寡核苷酸配对连接。随后每个片段通过桥式法扩增成簇克拢接下来合成的双链被解链，再分别与Flowcell上的接头杂交互补，通过延伸解链等步骤重复35个桥式PCR，利用变性剂NAOH将双链解链，并利用甲酰胺基嘧啶糖苷酶和对8-氧鸟嘌呤糖苷的选择性切断作用，将测序引物杂交至目标部位一端的通
【参考文献】：
期刊论文
[1]2014年中国分地区恶性肿瘤发病和死亡分析[J]. 陈万青,孙可欣,郑荣寿,张思维,曾红梅,邹小农,赫捷. 中国肿瘤. 2018(01)
本文编号：3346321
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