RIOK3调控巨噬细胞功能及肿瘤浸润转移的相关机制研究

发布时间：2021-09-21 21:40

　　巨噬细胞是一种多功能免疫细胞,在机体的特异性和非特异性免疫反应中均发挥重要作用。除了吞噬异物、提呈抗原以及炎症反应等全身效应,巨噬细胞在局部组织的浸润情况与多种疾病的发生发展密切相关。尤其是肿瘤组织局部浸润的巨噬细胞,可通过调控肿瘤的侵袭和转移影响患者预后,但相关机制尚未明确。研究调控巨噬细胞的增殖、分化以及功能极化的分子机制,将有助于阐明其与肿瘤发生发展的相关性,并为靶向肿瘤巨噬细胞相关的肿瘤免疫治疗提供新靶点。RIOK3（RIO Kinase 3）是一种非典型丝苏氨酸蛋白激酶,与RIOK1、RIOK2一起同属于RIO（right open reading frame）家族的一员。有研究表明,RIOK3与Ⅰ型干扰素的产生、NF-κB信号转导通路、Hedgehog信号转导通路以及Akt/mTOR通路的活化有关,并参与调控细胞免疫功能和细胞增殖。mRNA表达谱分析结果表明RIOK3在髓系细胞中呈现高表达,提示该蛋白可能参与了巨噬细胞的相关功能。利用我们已经建立的巨噬细胞RIOK3特异性敲除小鼠（LysM Cre RIOK3 LoxP/LoxP,以下简写为RIOK3-/-）、恶性黑色素瘤原... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：145 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．２巨噬细胞增殖相关基因表达

正文第一部分结果??对照组密集，用ＩｍａｇｅＪ计数细胞提示单位面积内实验组细胞所占总面积的比例高??于对照组（图１．３?Ａ－Ｂ）。??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＲＪＯＫ３７－??ＣｅＵ＿ｔｅｒｑ＿－Ｕｏｎ?鱗．濟＇興：??Ｉ］?＊??ｆａ?■＿??＾?瞧晒??ｉ?－〇－?ｉｒｉ：ｘｒ??ｒ?＾?＿雜．，趕纖＿｜｜??乂?＃?＃?＃??图１．３细胞增殖实验。Ａ．ＩｍａｇｅＪ定量Ｂ中紫色染色的细胞面积占比（ｎ?＝?６）；?Ｂ．与??ＣＣＫ８结果对应的光镜下结晶紫染色细胞分布（４０Ｘ）；Ｃ．巨噬细胞在Ｍ－ＣＳＦ?１０ｎｇ／??ｍｌ?体外培养?７?天中?ＣＣＫ８?吸光度值（ｎ?＝?６，?＊?ｐ＜０＿０５，?＊＊?ｐ＜０．０１，＊＊＊?ｐ＜０．００１）??随后为了进一步了解巨噬细胞在体外培养过程中细胞分裂的情况，采用ＣＦＳＥ??染色提取后的骨髓细胞，记录时间为ＤａｙＯ，流式细胞技术检测Ｄａｙｌ、３、５、７时??４８８ｍｎ激发光下发射的信号。结果提示，敲除ＲＩＯＫ３的巨噬细胞其发生分裂的比??例与平均每个细胞分裂的次数均高于对照组（图１．４），在Ｄａｙ３时ＲＩＯＫ３－／－组的细??胞几乎都已分裂（ｍｅａｎＤｉｖｓｉｏｎｒａｔｅ?＝?９８．４３％），且每个细胞平均分裂达１．４６次（ｍｅａｎ??２８??

用流式细胞仪检测信号结果提示ＲＩ〇Ｋ３＾组Ｄａｙ４、５、６、７培养的巨噬细胞处于??Ｇ０／Ｇ１期的细胞均低于对照组，相对的Ｓ期和Ｇ２期细胞比例总和则高于对照组??（图１．５），说明实验组处于活跃分裂的细胞比例要高于对照组。Ｄａｙ５的细胞处于活??２９??


本文编号：3402540